猫传染性腹膜炎(三)冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断

一、

粪便病毒检测

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非突变的FCoV感染特征是肠道细胞持续性进行病毒复制以及经粪便排泌病毒。通过反转录多聚酶链反应(RT-PCR)或电镜检测病毒可确定粪便病毒排泌。这两种诊断方法都可能出现假阴性。

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粪便排毒量呈波动变化,因此理想的情况是在确定猫是非病毒排泌者前应连续4~5天对粪便进行检查。

二、

肠道活组织检查

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肠道活组织检查显示肠绒毛顶端非特异性损伤,绒毛变钝和融合。

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肠道活组织免疫荧光或免疫组化染色进行病毒抗原检查可进行确诊。

三、

猫传染性腹膜炎的诊断

根据临床症状和常规实验室检测结果可怀疑FIP,没有单个能确诊FIP的检测,所以应该根据实验室评估(例如,血常规、血清生化、细胞学、血清学和病毒学)、影像诊断和组织病理检测结果进行综合性诊断。

关键点:FIP患猫临床症状和实验室异常对该病来说并不具有特异性;不过,根据这些综合分析可进行FIP假定性诊断。

猫传染性腹膜炎诊断特征

参数或程序

暗示FIP的发现

年龄

6月龄至3岁龄(但所有年龄都可能发生)

居住环境

猫舍或多猫家庭

症状

发热(非反应性)

渗出液(腹部、胸腔)

肝脏疾病(黄疸等)

肾脏疾病(肾肿大)

肠道疾病(胃肠道症状)

眼睛疾病(葡萄膜炎)

中枢神经疾病(多灶性)

肺部疾病(咳嗽)

临床过程

进行性

全血细胞计数

贫血(非再生性)

嗜中性粒细胞增多或减少;核左移

淋巴细胞减少

嗜中性粒细胞包涵体(免疫复合体?)

血浆蛋白

总血浆蛋白浓度升高

高球蛋白血症(γ、α2)

A/G<0.8

高纤维蛋白原血症(400-700mg/dl)

血清生化

肝脏检测异常(ALT、ALP、胆汁酸、胆红素升高)

氮质血症(尿素氮、肌酐浓度升高)

胰脂肪酶免疫反应性升高(胰腺炎)

尿液分析

蛋白尿、胆红素尿

放射学和超声波检查

渗出(腹部、胸腔)

器官肿大(肝脏、肾脏、肠道等)

器官浸润(肺脏)

CT和MRI脑影像检查

脑积水、脑膜反差增强

渗出液分析:

黄色、清亮、粘性、泡沫性、纤维素性

蛋白质

40~ 100g/L(A/G<0.8,球蛋白>50%,γ球蛋白>32%)

白细胞

1000~2000个/μl

细胞学

脓性肉芽肿性渗出

脑脊液分析:

蛋白质

50~350mg/dl

白细胞

100~10000个/μl

细胞学

嗜中性粒细胞>单核细胞

血清学

高FCoV抗体滴度

RT-PCR试验

FCoV核酸(血液、渗出液或组织)

组织病理学

血管炎和脓性肉芽肿性炎症

免疫荧光和免疫组化阳性

四、

常规实验室检查

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血常规检测通常揭示非特异性异常,反映的是慢性炎性反应,诸如非再生性贫血、嗜中性粒细胞性白细胞增多或减少、应激性淋巴细胞减少。

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由于长期免疫刺激,70%非渗出性病例和50%渗出性病例总血清蛋白浓度和血清球蛋白浓度(特别是γ和α2)升高,而血清白蛋白浓度经常下降。一项研究显示白球比(A/G<0.8)高度暗示存在FIP(92%阳性预测值),然而A/G>0.8暗示FIP不太可能(61%阴性预测值)。血清蛋白电泳通常无必要。

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血清生化可能检测腹部受影响器官诸如肝脏(血清肝酶活性、胆红素浓度和胆汁酸浓度升高)、肾脏(肌酐和尿素氮浓度升高)或胰腺(胰脂肪酶免疫反应性升高)。

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尿液分析结果可能包括蛋白尿或胆红素尿。

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FIP有时出现弥散性血管内凝血,引起凝血时间延长、血小板下降以及纤维蛋白降解产物增加。

五、

影像学诊断

在查找受影响器官方面影像学诊断是有用的,也利于诊断渗出液或活组织采样。

放射学和超声波

放射学检查在确诊腹部或胸腔渗出、腹部器官膨大(例如,肾脏和肝脏)或肺部浸润方面是有用的。受损器官(肝脏、肾脏、脾脏、胰腺、肠道、网膜和淋巴结)也可使用超声波进行扫描、抽吸以及活组织检查。

六、

中枢神经系统CT和MRI检查

神经性FIP,CT和MRI检查常见继发性堵塞性脑积水。MRI也可见脑膜和室管膜反差增强。

七、

渗出液分析

关键点:对于渗出性FIP临床诊断液体分析通常是有用的。渗出性FIP典型的液体是高蛋白性脓性肉芽肿性渗出液。

l

FIP液体外观清亮、粘性、草黄色或金黄色,可能呈粘性,含有斑块状或条状纤维蛋白。由于含有高浓度蛋白所以摇晃时起泡,冷藏可出现凝结。

l

FIP液体蛋白浓度很高,接近血浆,介于40~100g/L。如果液体内总蛋白浓度高于35g/L,球蛋白浓度超过50%,则很可能是渗出性FIP。如果A/G比大于0.8,或白蛋白比例高于50%,则更可能是FIP以外的其它疾病。

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FIP液体有核细胞数量通常介于1000~20000个/μl,与其它渗出液相比数量较低。

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FIP液体细胞学特征是脓性肉芽肿性渗出液。细胞类型主要是非退变的嗜中性粒细胞和巨噬细胞,以及数量不定的浆细胞和淋巴细胞。

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渗出液其它检查包括抗FCoV抗体试验和RT-PCR试验检测冠状病毒核酸。渗出液内抗体和RT-PCR检测较血清检测诊断价值更高。

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使用免疫荧光或免疫组化检查渗出液巨噬细胞内FCoV抗原是确诊渗出性FIP最准的方法,阳性预测值为100%。

A, Rivalta test粘蛋白定性试验:醋酸溶液上层出现一层凝胶表明试验阳性。液体来自一只PCR确诊为猫传染性腹膜炎的猫。该猫中度黄疸,注意试管中部漂浮的物质所呈现的凝胶黄纹。Photo by Sam Royer, Purdue University.

猫传染性腹膜炎(三)冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断

B, FCoV immunofluorescence test猫冠状病毒免疫荧光检测:猫传染性腹膜炎特异性细胞学检测包括细胞内猫冠状病毒免疫荧光检查。图示表明有三个感染的完整的巨噬细胞(绿色)出现在腹水中,腹水来自一只传染性腹膜炎的猫。Courtesy of Jacqueline Norris, University of Sydney, Australia.

猫传染性腹膜炎(三)冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断

C:猫传染性腹膜炎患猫浓缩的腹水涂片。注意中度嗜碱性巨噬细胞和非退变的嗜中性粒细胞。背景出现嗜碱性粗糙的颗粒蛋白,以及嗜碱性蛋白新月体和纤维蛋白丝。

猫传染性腹膜炎(三)冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
D:非败血性渗出液。猫传染性腹膜炎腹水。液体内含有泡沫状空泡化的巨噬细胞、轻度退变的嗜中性粒细胞和中等至大淋巴细胞。一些猫传染性腹膜炎病例淋巴细胞呈中等大小,并呈反应性。载玻片上也出现颗粒状沉淀的蛋白。

猫传染性腹膜炎(三)冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断

脑脊液和房水

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神经性FIP脑脊液和眼型FIP前房内房水分析具有很高的诊断价值,其内蛋白浓度和有核细胞数量(嗜中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞)均升高。

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脑脊液和前房液也用于评估抗FCoV抗体的出现。对于FIP,通常脑脊液或房水内抗体与血清中抗体比值较脑脊液或房水总蛋白浓度与血清总蛋白浓度比值更高。

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脑脊液和房水PCR检查冠状病毒核酸意义有限。

关键点:当并发出现进行性神经症状(特别是多灶性)、脑脊液蛋白和白细胞增加(特别是嗜中性粒细胞)、影像检测存在脑积水时,更可能是神经性FIP。

八、

聚合酶链式反应

关键点:RT-PCR检测结果应与其它临床发现综合判读,不要使用该试验作为FIP诊断的唯一根据。

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RT-PCR病毒试验用于检测血液、渗出液、组织或粪便中的冠状病毒核酸。

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阳性检测结果表明存在FCoV,但不能鉴别变异的致FIP的突变体和非突变的FCoV。病毒血症不仅仅发生于FIP,也发生于健康的FCoV携带者。一项研究显示,流行区猫舍高达80%的猫存在病毒血症和RT-PCR检测结果阳性,这并不能预示存在FIP。因此,RT-PCR本身并不是可靠的确诊试验。

关键点:PCR试验不能鉴别突变和非突变的FCoV。

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通常来说,渗出液和组织样本较血液来说更可能呈阳性。血浆较血清更敏感。尿液和脑脊液检测率最低,因此不应用作常规PCR检测。

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粪便RT-PCR可用于检测FCoV排毒情况,特别对于猫舍控制计划的健康猫。连续4~5天检测粪便。几个月后复检以查找长期持续性排毒者。

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样本RNA降解或实验室技术较差可出现RT-PCR检测结果假阴性。检测所用引物可能并不检测FCoV所有毒株。

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PCR样本需要细心处理以避免无效的检测结果。应冷冻样本并尽早进行检测。

九、

组织病理学

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组织病理学被看作是确诊FIP的“金标准”,受损组织进行活组织检测以查找FIP特异性损伤如血管炎和脓性肉芽肿性炎症。

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通过PCR、免疫荧光抗体和免疫组化技术可查出组织样本中的冠状病毒。

十、

免疫荧光和免疫组化

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组织样本和渗出液巨噬细胞使用免疫荧光或免疫组化染色查找细胞内FCoV抗原是诊断渗出性FIP最确定的试验,阳性预测值可达100%(即,实际上无假阳性)。

检测结果为阴性不能排除FIP,这种情况常发生于样本中受感染巨噬细胞数量不足或病毒抗原被FCoV抗体竞争性结合而掩盖时。

分享:犬猫内科-王姜维博士
_曹燕硕士

猫传腹诊断!

因为多样的临床症状使得FIP较难诊断,尤其非渗出型的FIP,因其病程较缓、涉及组织器官多且特异性较低使得诊断更加困难。然而,结合病史、临床症状和实验室检查,在大多数情况下都能做出相对可靠的诊断。

患猫实验室检查血常规和生化可能出现的异常包括:轻度至中度非再生性贫血、小红细胞血症、淋巴细胞减少症、中性粒细胞增多症(伴或不伴有核左移)、高胆红素血症、高球蛋白血症、低白蛋白血症和白球比小于0.8。

渗出型FIP会有渗出液,典型的FIP渗出液是黄色的,透明或混浊,粘稠,且渗出液化验一般蛋白含量高(> 35g / L),有核细胞成份少(<5000个有核细胞/μL)。渗出液细胞成份主要是巨噬细胞和嗜中性粒细胞。可以在渗出液中检测到白蛋白、球蛋白,如果渗出物白球比小于0.4高度提示FIP。

除上述非特异性检查外,还可以对患猫进行免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)来检测FCoV;其中免疫组织化学因阳性检出率高被认为是检测FIP的金标准。免疫组织化学可以选择病变的组织和渗出液/脑脊液中的巨噬细胞进行检测,但因为选择样本的不同可能会出现假阴性的结果,如细针抽吸(FNA)或tru-cut活检样本中病变组织过少,或渗出液/脑脊液中巨噬细胞携带的病毒量过少。逆转录聚合酶链反应能够检测各种临床样本中FCoV 的RNA,可以选择渗出液、脑脊液、病变组织进行检测,是诊断有渗出或神经症状FIP的一种有效方法,但也必须谨慎使用,需要结合患猫病史和临床症状综合判读。也可以进行测序检测突变基因位点,但因基因突变并非FIPV特有,故临床上不推荐在RT-RCR外单独进行基因测序。

另外,市场上有检测血清/渗出液/脑脊液的FOCV的抗体试剂盒用于诊断FIP,但临床上不推荐使用,因为在健康的FCoV感染猫中经常发现阳性结果,而在患有FIP的猫中可能出现阴性结果。

今天想跟大家分享来自西乡分院的伍锋医生写的一些关于宠主教育的内容,希望能帮到大家!

在日常生活中,猫狗难免因为多种因素导致了疼痛的发生。
如果它发生疼痛时,你是否能够及时发现呢?

因为它们在发生疼痛时,没有明显特征,仅有轻微的行为等改变,再加上它们比我们人类更能够忍受痛苦,
所以对于动物发生疾病时导致的疼痛,往往会被大家给忽略,最终将小病拖成大病,甚至是错过了最佳的治疗时机。

案例1:
狗狗在外排便遭遇流浪狗咬伤。当时宠主已经是及时发现了,但是没有发现狗狗身上有明显伤痕,就没有带来医院诊治。等过了几天,隐藏在毛发深处的咬伤发生感染,它就开始不断的舔舐自己的皮肤,这时宠主还以为是正常的打理毛发,还高兴着它现在越来越爱干净了。又过了两天,狗狗舔舐行为愈加严重,这时宠主仔细观察体表才发现有一处明显伤口,后面送来我院检查,发现原本咬伤应该只是一个牙印大小的伤口,演变成有一张银行卡面积的皮下空腔。在这样的情况下,唯有进行手术方式进行开创清洗并缝合,整个伤口最终缝了有21针。(在被咬伤和伤口感染期间,其实动物是会有明显疼痛的,只是它告诉我们的方式不同,如果足够细心观察,足以将这场手术避免的。)

案例2:
有一只猫咪在春节期间,宠主回家过年,将猫咪独自留在家中一个月。宠主回家后,猫咪还是能吃能喝,但是有看见它的体型逐渐消瘦,经历了两个月时间,猫咪体内的疾病终于爆发并发生呕吐,这时宠主才想到要带来医院就诊。经过检查,猫咪患的是脂肪肝并且激发了肝性脑病,经过了24小时的紧急救治,吸氧,输血,装置鼻饲管,最终还是抢救无效而发生死亡。(该猫在体型逐渐消瘦期间,其实已经发生了疼痛表现,只是宠主未能及时发现。)

通过以上两个案例,我们可以明显看出,动物在患病初期,它们的轻微表现都很可能是疼痛的征兆,此时它们默默的承受着痛苦继续爱着你,然而我们却没有尽到相应的责任好好爱护它们。

所以各位家长应该武装自己的观察能力,学会辨别疼痛,让它们豁免疼痛的困扰,将问题扼杀在摇篮之中。

通常动物发生疼痛时,可分为轻度疼痛,中度疼痛及重度疼痛的不同,从而发生不同的行为表现。

轻度疼痛:通常它们会表现不安与烦躁的情绪,并且在与它们互动的过程中,表现得不积极。

中度疼痛:通常它们会不爱运动,比平时更爱舔舐身体得某个地方,行走姿势会发生改变,有时还会异常得发出嚎叫或者“嘶嘶”声。当宠主触碰到它们身体得某个地方,会变得异常敏感和易怒。在食欲上会有进食减少的情况,在与它们的互动中,会表现得迟钝。

重度疼痛:这时它们的精神状态会显得极度沉郁,无精打采,完全没有食欲,并且会持续呻吟或者尖叫。

总的来说,它们在承受不同类型的疼痛时,会在食欲,精神状态,行走异常,嗜睡,行为异常,反应迟钝,情绪转变等方面发生变化,只要我们能够细心观察,定能及时发现问题,及时就诊,减少它们的痛苦。


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