六、重症患者免疫状态的检测

机体抗感染免疫由复杂的天然及获得性免疫系统组成,对于预防微生物方面起着重要作用。在发生感染后数小时到数天中,天然免疫起着重要作用。T淋巴细胞因子包括IFN-γ能够放大天然免疫反应,参与了感染早期的机体防御反应过程。而当感染持续存在或出现机会性感染后,获得性免疫则发挥着重要作用。研究表明,在全身感染期间特别是晚期阶段都存在单核细胞及粒细胞的失活,与血中快速循环或波动的细胞因子含量不同,细胞的表型则呈现稳定状态。此外,细胞因子的半衰期很短,而单核细胞或粒细胞离开骨髓后半衰期约24小时。单核细胞在迁移向不同组织后分化成为不同类型的巨噬细胞;粒细胞生命短暂,发生炎症后也向炎症区域集聚。以上特性使我们可以把单核细胞或粒细胞的功能分析作为常用的检测指标。
在全身感染过程中,常出现免疫功能的失常,表现为单核细胞分泌TNF-α能力下降,HLA-DR及CD80/86表达降低,同时抗原呈递能力的减弱。在这种状态下,机体至少暂时保持着产生抗炎因子IL-1ra和IL-10的能力,这些抗炎细胞因子的大量释放与机会性感染的危险性和患者不良预后有关。长期处于危重状况的患者极易发生感染,临床上免疫功能严重受到抑制(被称为免疫功能衰竭)是其主要诱因。事实上,在Volk等监测的1000多例重症患者中,如果单核细胞的HLA-DR表达及产生炎症因子功能不能恢复,则无一存活。他们最初在全身感染器官移植受体患者中观察到这一现象,称之为“免疫麻痹”。另外一些研究也验证了其他几项指标的诊断意义。一般来说,免疫麻痹可定义为:①HLA-DR表达明显减少(<30%或<5000分子/细胞);②抗原呈递能力下降;③产生促炎细胞因子的能力明显下降(全血受500pg/ml内毒素刺激后TNF-α产生<300pg/ml)。目前,常规工作中采用这些参数作为诊断依据的主要障碍是流式细胞仪应用及细胞因子检测的标准化程度较差。不同实验室有自己不同的标准,因此不同实验室得出的结果就难以进行比较。因为实行标准化是进行临床多中心试验的前提,因此有必要把改进标准化作为当前工作的主要任务,特别是HLA-DR及TNF-α检测的标准化问题。
Volk等应用半自动系统分析全血在低浓度LPS刺激时产生TNF-α的能力(试剂盒包含标准化的培养试管、稀释液、内毒素及半自动TNF-α检测程序,图25-4-4)。

图25-4-4 采用标准化单核细胞功能半自动分析系统检测TNF-α的释放
当用标准化很好的试剂检测中性粒细胞的相关参数时,试剂批内误差<5%,批间误差<20%。然而,在不同个体之间却有时存在较大的差异(低反应者与高反应者相差>5倍),而中性粒细胞的表型却在一直保持稳定,显而易见这是由基因差异决定的。
检测方法要求用100μl肝素抗凝同时被稀释10倍的全血,在500pg/ml LPS刺激后4小时,判断免疫麻痹的标准为TNF-α分泌<300pg/ml,而正常范围为500~2500pg/ml。样本处理需15分钟,得出结果总共需要5.5小时。由于培养上清可在-70℃中保存,故不必多中心都拥有TNF-α半自动测量系统。故这种标准化良好的方法较容易应用于多中心的临床试验研究。
另一个衡量免疫反应功能的指标为CD14+单核细胞HLA-DR的表达。很多中心应用不同的抗体、流式细胞仪及不同的方案使相关数据之间很难进行比较。应用一种全新的细胞流式分析方法(Quantibrite HLA-DR,Becton-Dickinson公司)能够定量地检测CD14+单核细胞HLA-DR的表达。同时采用新的抗体标记技术及标准珠使得标准化过程减少了不少人为的因素,变异系数<10%。若应用溶血素方法整个过程可<45分钟。需要指出的是,使用EDTA抗凝对于防止分析前的影响很关键,定量分析HLA-DR的表达对于评价机体细胞免疫功能极为重要(表25-4-2)。
表25-4-2 HLA-DR的表达与细胞免疫功能的关系

有报道采集了77例烧伤体表总面积大于30%患者血标本,通过流式细胞技术(使用QuantiBRITETM抗HLA-DR PE*/抗单核细胞PerCP-Cy5.5单克隆抗体)对患者烧伤后 1、3、5、7、14、21、28 天 CD14+单核细胞表面 HLA-DR 结合量进行动态的定量分析。结果显示,严重烧伤患者伤后第1天开始CD14+单核细胞表面HLA-DR结合量明显低于正常对照组,其表达均值与烧伤面积呈显著负相关(r=-0.7232,P<0.01)。并发 MODS者 CD14+单核细胞表面的HLA-DR表达量持续下降,其中伤后第3、14、21、28天显著低于非MODS组。随着CD14+单核细胞HLA-DR表达水平的下降,MODS发生频率增加,患者预后不良。说明大面积烧伤可导致机体CD14+单核细胞HLA-DR表达严重受损和免疫功能障碍,动态观察其定量表达水平有助于烧伤后MODS的病程监测及患者预后判断。
由此可见,目前至少有两种标准化的方法用来检测单核细胞的功能。另外,有些研究还提到了T淋巴细胞的功能失调。据报道,T淋巴细胞的功能抑制与ICU患者不良的预后相关,T淋巴细胞的免疫障碍表现为IFN-γ/IL-4的比率失调。这种1型细胞因子与2型细胞因子的比例失调在CD8 T淋巴细胞亚群中尤为常见,存在免疫麻痹的全身感染患者发生了Th1/Th2的极性化分化。但目前并不清楚T淋巴细胞的功能失常是创伤、应激或全身感染的结果,还是不充分的抗原呈递所致,可能与两者均有关。

中国疾病预防控制中心曾指出,儿童青少年营养健康状况目前仍面临:营养不足、微量营养素缺乏和超重肥胖三大营养挑战。
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新冠疫苗有效期是多久?哪些人不适合接种?疫苗19问,权威答复→

近期,关于新冠疫苗的消息接连不断:疫苗紧急接种开打、获批上市、全民免费、首批新冠病毒疫苗开始接种...

大家在期待的同时也难免有些疑问:

新冠疫苗能否和其他疫苗一起接种?
接种后多久可以摘口罩?
接种后还会感染新冠吗?

别着急!
专家为你解答!

受访专家:
上海市(复旦大学附属)公共卫生临床中心党委书记卢洪洲
上海市长宁区疾病预防控制中心综合业务办、应急办主任庄建林

新冠疫苗和其他疫苗能否同时接种?
Vaccine
新冠疫苗属于灭活疫苗,原则上可与其他疫苗同时接种。但是,由于新冠疫苗投入应用时间尚短,我们缺乏新冠疫苗与其他疫苗同时接种的研究,并不建议新冠疫苗和其它疫苗一起接种,建议在接种时间上最好能与其他疫苗分开(>14 天),尽可能排除其他疫苗对新冠疫苗干扰,从而利于更好更密切地关注新冠疫苗接种后的反应。

HPV疫苗和新冠疫苗间隔多久可以注射?
Vaccine
建议接种时间应相隔至少2周,以尽量减少疫苗间相互影响。

已经注射流感疫苗,是否还需要注射新冠疫苗?
Vaccine
已经注射流感疫苗仍然有必要注射新冠疫苗。两者预防的是两种不同的疾病。流感疫苗主要针对流感病毒,新冠疫苗针对新冠病毒。

18岁以下及59岁以上的人群什么时候能注射?在这之前该如何防护?
Vaccine
由于我国疫情严格控制,新冠疫苗的三期临床试验均在境外进行,尚缺乏18岁以下及59岁以上人群疫苗接种数据。目前相关临床研究正在逐步开展,仍需等待充足的临床试验数据再决定他们的注射时间。

在此之前,针对这些免疫力脆弱的人群,需要严格的自我防护意识,比如出行佩戴口罩,注意个人卫生,尽量避免接触密集人群和出入高风险地区。

此外,也需要预防其他疾病,比如流感等。最后,疫情防控下,还需要保持充足规律的睡眠,适度的运动,均衡营养以及保持健康的心理状态。

为什么康复的患者和无症状感染者不建议接种?
Vaccine
康复患者和无症状患者对于新冠病毒均有一定的宿主免疫保护力存在,比如自然感染后产生了一定的中和抗体。

目前对于这类人群,尚不了解自然感染产生的保护效应能存在多长时间;其次,体内多少的中和抗体能产生有效的抗病毒感染;最后,感染过新冠病毒者发生二次感染的报道虽有,但现象并不普遍。因此,对该类人群暂无接种建议。

有些病人有基础性疾病无法注射,但免疫力又低,应该怎么防护?
Vaccine
基础疾病免疫力差的人群防护,首先需要严格防控新冠,做到提高自身的防控意识,注意防控细节,采取科学的防控措施。

其次需要特别注意对基础疾病控制,如积极配合基础疾病治疗,进行康复锻炼,防止疾病加重或者复发。

最后,冬季也需要防止其他流行病比如流感等。在基础治疗的同时,保持充足规律的睡眠,适度的运动,均衡营养以及保持健康的心理状态。

注射部位有瘢痕是否无法注射?注射的两针需要在不同胳膊吗?
Vaccine
不推荐在瘢痕部位注射疫苗,建议绕开瘢痕部位注射。

第一,瘢痕可能会影响肌肉注射的吸收效果。

第二,瘢痕部位将影响我们对不良反应如皮肤红、肿的观察。

第三,疫苗接种可能加重瘢痕组织的创伤。

新冠疫苗的注射没有规定需要在不同胳膊上。这取决于自身情况与接种医务工作者对注射部位的仔细评估。

哪种程度的过敏需要特别注意?“过敏体质”能打吗?
Vaccine
并不是说偶然性的过敏就不能打疫苗了,如果对疫苗里面的成分过敏是不能接种的。还有一种是正处在过敏阶段,还没好,这个时候是属于急性发作的阶段,在这种情况下,也是建议暂缓接种的。

从医学的角度来讲,其实只有对疫苗过敏才能算是“不能接种疫苗”的禁忌症,但因为新冠疫苗是比较新的一个疫苗,从安全性考虑,会把禁忌症的范围扩得更宽泛一点,所以就会出现不让过敏性鼻炎患者或者得过湿疹的人接种的情况。但原则上,除非是这个时候正好这些病症在发作,这种情况接种疫苗一定是要暂缓的,否则,从医学的角度来讲,如果只是曾经得过过敏性鼻炎或者湿疹之类的,但是现在症状都控制好了,没有再用药的,那这些人实际上应该是可以接种的。

生理期可以接种疫苗吗?
Vaccine
生理期是可以接种的,这种是属于正常的可接种情况,除非存在发热或其他感染症状。

辉瑞疫苗更早上市,国内为什么没有使用呢?
Vaccine
因为中国有《疫苗法》,规定疫苗正式上市之前都要做三期临床试验。辉瑞疫苗如果要进入中国,也得在中国完成必要的临床试验,才能证明在中国人群中的安全性和有效性。另外,mRNA疫苗对运输的条件要求比较苛刻,很容易在硬件不达标的时候出现疫苗失效的问题。国产灭活疫苗的保存条件没有这么苛刻,在目前现有的免疫接种服务体系里面可以提供,更加适合我国国情。

接种疫苗后留观的30分钟内要注意哪些变化?
Vaccine
极少部分人在接种疫苗后可能会出现严重的过敏反应,严重时会发生休克。这种反应大部分发生在接种疫苗之后的30分钟内。所以在留观的30分钟内,大家要关注身体变化,例如是否头晕,血压降低或者感到无力或眩晕等症状。一旦出现要立即告知接种点的医务人员。

第一针和第二针间隔的期间需要注意什么?
Vaccine
首先需要注意,间隔时间是至少两周,这是一个时间限制的问题。另外,如果第一针接种完之后,出现比较严重的不良反应,第二针不建议再打。这些不良反应是指除了部位疼痛或者是轻度的发热这些表现以外的,一些其他比较严重的不良反应。并且,注射后出现不适自己在休息后仍无法缓解的,需要及时找医生进行判断。

疫苗注射完成后多久就可以摘掉口罩了呢?
Vaccine
疫苗接种完之后还是建议继续延续原来的防护措施,戴口罩、勤洗手、保持社交距离等。首先是因为疫苗起效需要一段时间,至少需要两个礼拜。另外,并不是所有人接种完之后都能够达到比较理想的效果,所以说继续坚持防护措施既是保护自己也是对他人负责。

广泛接种疫苗后,有没有可能相对放松防疫管控呢?
Vaccine
距离这一目标还很遥远,想要达到这个目标,保守估计至少要三分之二的人接种疫苗。

接种新冠疫苗后是否还会得新冠肺炎?
Vaccine
目前我们国家使用的灭活新冠疫苗有效保护率为80%左右,这是因为所有的疫苗接种后,只是降低了感染的概率,而不是说彻底不得这个疾病。

注射新冠疫苗后还要做核酸检测吗?

Vaccine
核酸检测与接种疫苗不能相互替代。比方说,接种完疫苗之后出境了,再回国还是要测核酸的。一是可能接种完之后,在还来不及产生抗体之前,就可能被感染了。还有一种情况是,接种疫苗之后没有产生足够的抗体而被感染。所以说,接种疫苗对个人来说只是降低风险,而不是具有100%的保护作用。但是可以在测完核酸之后,提供自己的接种疫苗的一些证明,可以帮助医生做一个综合判断。

什么时候可以实现全民接种?
Vaccine
现在已经在开始紧急接种,接下来就是向社会公众开放。因为需要接种的人数多,肯定是得有个步骤的,接种服务的提供量也是有限的,所以它肯定是一个慢慢推进的过程。

从最紧急的、风险最高的人开始接种,再逐步推向更广泛的人群。现在还有一些未成年人以及老年人不能接种,在未来随着临床试验的推进,未来有可能会进一步扩展到这些人群。

抗体可以在人体内维持大概多久的有效期?
Vaccine
现在还没有定论,因为疫苗刚上市不久,还需要观察。目前看下来,至少能达到半年以上,但这个需要再进一步观察,因为疫苗刚开始接种也没多久。

在美国有打疫苗后立马致死的例子,打疫苗后死亡的风险有多大?
Vaccine
有两种可能,一是与疫苗无关,比方说因为美国接种疫苗的年龄段是不限的,老年人也可以打,但可能有些老年人年纪已经很大了,或者说是本身有一些基础毛病,正好是这个阶段,它可能不是因为疫苗导致的意外死亡,而是因为其他原因。另外一种,是疫苗过敏引起的,主要是由于急性休克引起的死亡,这种情况就需要在已知某些成分过敏的情况下规避。

温馨提醒

接种后,接种部位要保持干燥,3天内不要接触水,防止发生感染,所以接种者最好在注射疫苗前先洗好澡。

另外,虽然接种新冠疫苗并没有严格的饮食禁忌,但大家最好在接种疫苗后的一周内,不要饮酒或食用过于辛辣、刺激食物,防止酒精等成分影响抗体的生成或掩盖接种疫苗后出现的不良反应,贻误治疗。

最后
疫苗不是万能的
不管是已接种、准备接种
还是暂时未计划接种
都要戴好口罩、勤洗手
保持社交距离

做好个人防护
最大程度隔离病毒
一起迎接春暖花开


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