细胞无菌检测
无菌检测 sterility testing----利用方法对细胞中细菌、真菌、支原体和病毒检验的过程。包括是否有污染及确定具体污染
一、一般要求
应根据细胞来源、潜在污染暴露史、细胞预期应用目的及所处环境等方面对细胞进行风险评估。考虑的因素包括但不限于以下几个方面:
a)应考虑细胞样本源。来自不同物种的细胞很可能携带潜在的微生物;
b) 应根据细胞的使用目的进行相关污染检测;
c)考虑细备和细胞培养的全周期所处的环境因素。根据暴露史评估可能的污染，如用于培养细胞的动物血清可能被特定的微生物污染。
依据风险评估判可能性最大的微生物污染类型，评估现有检验方法的话用性为待检测样本选择合适的方法。
二、方法选择
1.总体要求
在选择检测方法时,应了解该方法原理、微生物类型以及灵敏度等。
选择检测方法应依据预期目的、样本特性和处理因素。
选择的方法应经过验证或确认。
2.细菌和真菌
细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米，其形状多样，如球状、杆状和螺旋状等。由于分布广泛、生长迅速和体积大小等特点，细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。
细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到；受感染的培养物通常会变得浑浊，有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。在低倍显微镜下，细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的293细胞被大肠杆菌污染。
(1)依据需要选择适用干细菌和真菌的检测方法,如直接镜检法、膜过滤法、直接接种法、PCR法、MNP标记法、飞行时间质谱等。
(2)初步判断是否有细菌或真菌污染物,宜采用直接镜检法。
(3)若试验样品性质如可行，应首先选择膜过滤法进行检测。
(4)直接接种法对干细胞培养体系中添加抗生素的样品应考虑抗生素对细菌和直菌的抑制效应而影响检测的敏感性。
(5)利用PCR的方法检测细菌16SrRNA高保守区的序列来判断是否有细菌污染。利用PCR的方法检测细菌16SrRNA可变区的序列和MNP标记序列分析污染细菌的种属，利用MNPITS1或ITS2等序列判断感染真菌的种属。
(6)对微生物的组分进行检测可采用飞行时间质谱法等。
3.病毒
病毒是一种微小的感染性病原体，利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小， 难以在培养中被检测到，也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数 病毒对宿主有非常严格的要求，因此，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁， 尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞时。要检测细胞培养物是否被病毒感染，可以使用电子显微镜观察、用抗体组合进行免疫染色、ELISA检测或是使用合适 的病毒引物进行PCR扩增。
(1)依据需要选择适用干病毒检测的方法,如直接镜检法、细胞形态观察及血吸附试验、体外不同细胞接种法、动物检查法、鸡胚接种检查法、PCR法、高通最测序法、基因片技术、荧光免疫法、酶联免疫法和血细胞凝集试验等方法。
(2)可利用光学显微镜观察病毒感染导致的细胞病变合胞体的形成:可通过电子显微镜观察大小和形态来识别病毒;可通过免疫电镜技术识别病毒。
(3)取细胞培养物的上清液或细胞培养物的裂解物，接种已知未污染病毒的相应细胞，检测是否出现细胞病变,或采用血细胞的吸附现象检测待检细胞培养物是否污染病毒。
(4)若采用动物检查法,可通过对普通动物或者含有特定病原体的动物，如小(包括乳鼠和成鼠)
豚鼠、仓鼠、家兔和非人灵长类动物等进行颅内、腹腔、鼻腔和皮下等部位接种,判断是否有病毒感染。
(5)分离黏液病毒、疱疹病毒和痘病毒宜采用鸡胚接种检查法。鸡胚应来自无特定病原(SPF)鸡群。
(6)采用PCR法检测病毒核酸高保守区的序列来判新是否有病毒污染。
(7)可采用高通量测序法鉴定病毒特异性序列。
(8)采用基因芯片技术检测病毒，需要合成与潜在污染的病毒基因组上的特定区域互补的核酸探针。
(9)用病毒抗原特异的抗体，通过荧光免疫反应用荧光显微镜检测细胞内病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(10)运用病毒抗原特异的抗体，通过酶联免疫反应检测细胞内或者上清液中的病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(11)通过凝集血细胞检测上清液中的病毒颗粒，如用鸡红细胞检测流感病毒。
4.支原体
支原体是无细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于支原体非常小（ 通常小于1 µm），因此很难被检测到，除非它们达到了极高的密度，导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可在培养物中持续存活，而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养体系中宿主细胞的行为和代谢。
(1)依据需要选择适用于支原体检测的方法，如培养法、指示细胞培养DNA染色法、PCR法、荧光原位杂交法、腺苷磷酸化酶活性检测法等方法。
(2)若对支原体检测结果报告时间没有急切要求的,宜选择培养法进行检测。
(3)利用DNA热色法,经荧光显微镜下观察看到有附着在细胞表面的大小不等，不规则的荧光着色颗粒则表明存在支原体污染。
(4)通过PCR法检测支原体16SrRNA序列保守区特异性序列来判定是否存在支原体。
(5)利用带光原位杂交法检测支原体,需要设计与支原体rRNA的高度保守区域互补的蒙光探针。
(6)腺苷磷酸化酶活性检测法不适用于本身腺苷磷酸化酶活性高的细胞。
5.过程控制
样品
(1)应根据所选方法,确定足够量的供试样品。
(2)应根据供试样品可能的稳定性考虑其储存条件。
(3)应实行严格微生物规范操作，避免取样讨程中微生物污染。
试剂材料和仪器设备用具
(1)应考虑设备、试剂和耗材对微生物检测的影响。
(2)检测过程中应使用标准物质。
(3)应根据样品尺寸选择适宜的容器，避免蒸发、确保无微生物、无毒、无浸出。
(4)应配备与微生物检测能力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和准确度应符合检测要求。
(5)检测所用试剂应贮存在适的环境中，以确保试剂的稳定性。
(6)用于微生物检测的溶液、稀释剂或冲洗剂以及所使用的耗材若是作为微生物检测测试样品的成分，则不应具有抗微生物活性的特性。
操作
(1)待测样品的收集操作应确保无污染引人。
(2)应依据微生物的最佳生长条件和营养需求选择专门的分离方法进行检测。
(3)应根据微生物的生长速度,以获得足够数量的生物体。
(4)应考虑某些微生物种类和真菌是否形成孢子。
(5)应考虑细胞培养过程中受支原体污染时，支原体可能黏附在细胞膜上仅以最低水平浓度存在于培养上清液中。
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一、一般要求
应根据细胞来源、潜在污染暴露史、细胞预期应用目的及所处环境等方面对细胞进行风险评估。考虑的因素包括但不限于以下几个方面:
a)应考虑细胞样本源。来自不同物种的细胞很可能携带潜在的微生物;
b) 应根据细胞的使用目的进行相关污染检测;
c)考虑细备和细胞培养的全周期所处的环境因素。根据暴露史评估可能的污染，如用于培养细胞的动物血清可能被特定的微生物污染。
依据风险评估判可能性最大的微生物污染类型，评估现有检验方法的话用性为待检测样本选择合适的方法。
二、方法选择
1.总体要求
在选择检测方法时,应了解该方法原理、微生物类型以及灵敏度等。
选择检测方法应依据预期目的、样本特性和处理因素。
选择的方法应经过验证或确认。
2.细菌和真菌
细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米，其形状多样，如球状、杆状和螺旋状等。由于分布广泛、生长迅速和体积大小等特点，细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。
细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到；受感染的培养物通常会变得浑浊，有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。在低倍显微镜下，细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的293细胞被大肠杆菌污染。
(1)依据需要选择适用干细菌和真菌的检测方法,如直接镜检法、膜过滤法、直接接种法、PCR法、MNP标记法、飞行时间质谱等。
(2)初步判断是否有细菌或真菌污染物,宜采用直接镜检法。
(3)若试验样品性质如可行，应首先选择膜过滤法进行检测。
(4)直接接种法对干细胞培养体系中添加抗生素的样品应考虑抗生素对细菌和直菌的抑制效应而影响检测的敏感性。
(5)利用PCR的方法检测细菌16SrRNA高保守区的序列来判断是否有细菌污染。利用PCR的方法检测细菌16SrRNA可变区的序列和MNP标记序列分析污染细菌的种属，利用MNPITS1或ITS2等序列判断感染真菌的种属。
(6)对微生物的组分进行检测可采用飞行时间质谱法等。
3.病毒
病毒是一种微小的感染性病原体，利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小， 难以在培养中被检测到，也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数 病毒对宿主有非常严格的要求，因此，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁， 尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞时。要检测细胞培养物是否被病毒感染，可以使用电子显微镜观察、用抗体组合进行免疫染色、ELISA检测或是使用合适 的病毒引物进行PCR扩增。
(1)依据需要选择适用干病毒检测的方法,如直接镜检法、细胞形态观察及血吸附试验、体外不同细胞接种法、动物检查法、鸡胚接种检查法、PCR法、高通最测序法、基因片技术、荧光免疫法、酶联免疫法和血细胞凝集试验等方法。
(2)可利用光学显微镜观察病毒感染导致的细胞病变合胞体的形成:可通过电子显微镜观察大小和形态来识别病毒;可通过免疫电镜技术识别病毒。
(3)取细胞培养物的上清液或细胞培养物的裂解物，接种已知未污染病毒的相应细胞，检测是否出现细胞病变,或采用血细胞的吸附现象检测待检细胞培养物是否污染病毒。
(4)若采用动物检查法,可通过对普通动物或者含有特定病原体的动物，如小(包括乳鼠和成鼠)
豚鼠、仓鼠、家兔和非人灵长类动物等进行颅内、腹腔、鼻腔和皮下等部位接种,判断是否有病毒感染。
(5)分离黏液病毒、疱疹病毒和痘病毒宜采用鸡胚接种检查法。鸡胚应来自无特定病原(SPF)鸡群。
(6)采用PCR法检测病毒核酸高保守区的序列来判新是否有病毒污染。
(7)可采用高通量测序法鉴定病毒特异性序列。
(8)采用基因芯片技术检测病毒，需要合成与潜在污染的病毒基因组上的特定区域互补的核酸探针。
(9)用病毒抗原特异的抗体，通过荧光免疫反应用荧光显微镜检测细胞内病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(10)运用病毒抗原特异的抗体，通过酶联免疫反应检测细胞内或者上清液中的病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(11)通过凝集血细胞检测上清液中的病毒颗粒，如用鸡红细胞检测流感病毒。
4.支原体
支原体是无细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于支原体非常小（ 通常小于1 µm），因此很难被检测到，除非它们达到了极高的密度，导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可在培养物中持续存活，而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养体系中宿主细胞的行为和代谢。
(1)依据需要选择适用于支原体检测的方法，如培养法、指示细胞培养DNA染色法、PCR法、荧光原位杂交法、腺苷磷酸化酶活性检测法等方法。
(2)若对支原体检测结果报告时间没有急切要求的,宜选择培养法进行检测。
(3)利用DNA热色法,经荧光显微镜下观察看到有附着在细胞表面的大小不等，不规则的荧光着色颗粒则表明存在支原体污染。
(4)通过PCR法检测支原体16SrRNA序列保守区特异性序列来判定是否存在支原体。
(5)利用带光原位杂交法检测支原体,需要设计与支原体rRNA的高度保守区域互补的蒙光探针。
(6)腺苷磷酸化酶活性检测法不适用于本身腺苷磷酸化酶活性高的细胞。
5.过程控制
样品
(1)应根据所选方法,确定足够量的供试样品。
(2)应根据供试样品可能的稳定性考虑其储存条件。
(3)应实行严格微生物规范操作，避免取样讨程中微生物污染。
试剂材料和仪器设备用具
(1)应考虑设备、试剂和耗材对微生物检测的影响。
(2)检测过程中应使用标准物质。
(3)应根据样品尺寸选择适宜的容器，避免蒸发、确保无微生物、无毒、无浸出。
(4)应配备与微生物检测能力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和准确度应符合检测要求。
(5)检测所用试剂应贮存在适的环境中，以确保试剂的稳定性。
(6)用于微生物检测的溶液、稀释剂或冲洗剂以及所使用的耗材若是作为微生物检测测试样品的成分，则不应具有抗微生物活性的特性。
操作
(1)待测样品的收集操作应确保无污染引人。
(2)应依据微生物的最佳生长条件和营养需求选择专门的分离方法进行检测。
(3)应根据微生物的生长速度,以获得足够数量的生物体。
(4)应考虑某些微生物种类和真菌是否形成孢子。
(5)应考虑细胞培养过程中受支原体污染时，支原体可能黏附在细胞膜上仅以最低水平浓度存在于培养上清液中。
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【水痘和带状疱疹有何联系？最专业的科普在这里】水痘和带状疱疹是由水痘-带状疱疹病毒感染引起两种不同临床表现的疾病。
水痘-带状疱疹病毒的初次感染多发生在儿童，表现为水痘，特征是面部、躯干及四肢出现疱疹。
而带状疱疹是由感觉神经节中潜伏水痘-带状疱疹病毒感染的再活化所致。
水痘具有高度传染性。传播方式是易感宿主接触感染者鼻咽分泌物的飞沫，或经皮肤直接接触患者皮损处的水疱液。
水痘的临床表现通常在接触病毒后15日内出现，一般包括发热、不适或咽炎等前驱症状，随后出现全身性水疱疹。
对于免疫功能正常的儿童，水痘通常呈良性自限性。但对于任何年龄有免疫抑制或免疫功能受损者而言，水痘可为十分严重的疾病。
水痘潜伏期1～2周，临床症状，包括发热、不适、或咽炎、食欲缺乏等前驱症状，随后(通常在24小时内)出现全身性水疱疹。
这些疱疹即水痘，通常有瘙痒，在数日内连续成批出现。病损一开始表现为斑疹，然后迅速变成丘疹，接着是特征性水疱；然后这些疱疹可发展为脓疱疹，随后形成结痂
(图片 1)。
水痘患者的面部、躯干和四肢通常有处于不同发展阶段的皮损。新的水疱形成通常在4日内停止，在正常宿主中，大多数病损到第6日已完全结痂。痂皮往往在1-2周内脱落，在皮肤上留下暂时性色素沉着。
接种疫苗对易感者有你护作用，但仍有20%接种一剂水痘疫苗的儿童可能发生“突破性感染”。1-14岁已接种疫苗的水痘患儿症状相对更轻微和缓和(如，发热较轻和皮损数量较少)。
在已接种疫苗的儿童中，伴随的皮疹明显更有可能表现出非典型性(如斑丘疹)。
相较于未接种疫苗的儿童，已接种的儿童报告并发症的可能性更低。
神经系统并发症(如脑炎)更罕见。
水痘有哪些并发症？
儿童最常见的并发症为细菌性继发性感染，
包括皮肤和软组织感染(42%)、脱水(11%)及神经系统并发症(9%)。
皮肤/软组织感染 ，儿童原发性水痘感染与侵袭性A组链球菌软组织感染发生率增加有关。感染性并发症包括蜂窝织炎、肌炎、坏死性筋膜炎和中毒性休克综合征。
神经系统并发症，有 脑炎和Reye综合征，虽不常见，但这是最严重的并发症。
罕见的神经系统并发症还包括：短暂的局灶性神经功能缺损、无菌性脑膜炎、横贯性脊髓炎、血管炎以及偏瘫。
脑炎 ，占水痘相关性住院的20%。有两种不同形式的脑炎：
1急性小脑性共济失调；
2.弥漫性脑炎
这些疾病通常在皮疹出现的第1周临近结束时发生，但也有中枢神经系统受累先于皮疹发生的病例。
急性小脑性共济失调最常发生于儿童，每4000例水痘感染中约有1例。其病程时间有限，病后通常完全恢复。刚刚不久前本博主就接诊过一例急性小脑性共济失调患儿，是一位3岁女孩，主要表现为走路步态不稳。
弥漫性脑炎最常在成人中发生，但幼儿的风险也增加。其临床表现包括谵妄、癫痫发作和局灶性神经系统表现。病理学检查已发现3种主要形式；尽管通常以一种形式为主，但在很多病例中可同时出现多种特征：
1.中等至大血管病变伴非出血或出血性梗死；
2.小血管病变伴缺血性和脱髓鞘性混合病变；
3脑室炎或周围脑室炎。
报告的脑炎死亡率接近10%，多达15%的存活者报告有长期神经系统后遗症。
Reye综合征，是一种在儿童水痘感染病程期间发生的疾病，通常表现为一组独特的症状，包括恶心、呕吐、头痛、亢奋、谵妄以及攻击性并常常进展为昏迷。人们认识到使用阿斯匹林是Reye综合征的主要诱发因素，该并发症现几乎已经消失。
肺炎 ，仍是较少见的并发症；接种疫苗后，肺炎已很少见。但水痘肺炎可在成人中发病比儿童更常见。
肝炎 ，在水痘患者中并不常见，但当其发生时，通常累及免疫抑制的宿主，包括移植受者和AIDS患者；其结局常致命。
初次发生水痘后，病毒可以在感觉神经节内长期驻留。带状疱疹的发病与宿主免疫状态、年龄相关的免疫衰老、疾病相关的免疫功能低下或医源性免疫抑制的影响，年龄是90%成人带状疱疹病例的主要危险因素。
带状疱疹患者可以将病毒传播给没有感染过水痘并且从未接种过水痘疫苗的个体。病毒可通过直接接触带状疱疹病灶(病灶在干燥和结痂之前被认为具有传染性)传播。局部带状疱疹患者也可通过空气传播。
带状疱疹的主要临床表现常为皮疹及急性神经炎(图片2 )。胸、腰段皮区最常受累(图3)，但任何皮区均可受累。
带状疱疹最常见的并发症为带状疱疹后神经痛，其他并发症包括眼带状疱疹、耳带状疱疹，以及较少见的急性视网膜坏死、无菌性脑膜炎及脑炎。
带状疱疹的诊断通常基于临床表现，即单侧、通常为疼痛性、具有明确皮区分布的水疱性皮疹。
急性神经炎 ，疼痛是带状疱疹最常见的症状。大多数患者自述存在深处“烧灼痛”、“跳痛”或“刺痛”感。
18%的患者皮疹区域疼痛≥30日，且年龄越大，疼痛持续时间越长。
约75%的患者在受累皮区出疹之前有前驱疼痛。前驱疼痛可呈持续性或间歇性，通常在出疹前2-3日出现，但也可更早出现。在出疹前，前驱疼痛常被误认为另一种疾病，如心绞痛、胆囊炎、阑尾炎、椎间盘疾病或肾绞痛，具体取决于所累及的皮区。
并发症 — 带状疱疹后神经痛（PHN）是带状疱疹最常见的并发症是。其他并发症包括眼部、神经系统病变和皮肤的继发细菌感染。
带状疱疹后神经痛 ，为出疹后显著疼痛持续超过90日。在1-10级的疼痛量表上，≥3级为显著疼痛（图4）。感觉症状还可包括受累皮区的麻木、感觉倒错、瘙痒和触诱发痛。
带状疱疹患者的发生PHN发生率为10%-15%，而50%的PHN患者为60岁以上。一项研究发现，在60岁以下带状疱疹患者中PHN发生率为5%，≥80岁患者中为20%。相比之下，接受带状疱疹减毒活疫苗的患者，即使发生带状疱疹，也不太可能出现PHN。
【水痘和带状疱疹有何联系？最专业的科普在这里】水痘和带状疱疹是由水痘-带状疱疹病毒感染引起两种不同临床表现的疾病。
水痘-带状疱疹病毒的初次感染多发生在儿童，表现为水痘，特征是面部、躯干及四肢出现疱疹。
而带状疱疹是由感觉神经节中潜伏水痘-带状疱疹病毒感染的再活化所致。
水痘具有高度传染性。传播方式是易感宿主接触感染者鼻咽分泌物的飞沫，或经皮肤直接接触患者皮损处的水疱液。
水痘的临床表现通常在接触病毒后15日内出现，一般包括发热、不适或咽炎等前驱症状，随后出现全身性水疱疹。
对于免疫功能正常的儿童，水痘通常呈良性自限性。但对于任何年龄有免疫抑制或免疫功能受损者而言，水痘可为十分严重的疾病。
水痘潜伏期1～2周，临床症状，包括发热、不适、或咽炎、食欲缺乏等前驱症状，随后(通常在24小时内)出现全身性水疱疹。
这些疱疹即水痘，通常有瘙痒，在数日内连续成批出现。病损一开始表现为斑疹，然后迅速变成丘疹，接着是特征性水疱；然后这些疱疹可发展为脓疱疹，随后形成结痂
(图片 1)。
水痘患者的面部、躯干和四肢通常有处于不同发展阶段的皮损。新的水疱形成通常在4日内停止，在正常宿主中，大多数病损到第6日已完全结痂。痂皮往往在1-2周内脱落，在皮肤上留下暂时性色素沉着。
接种疫苗对易感者有你护作用，但仍有20%接种一剂水痘疫苗的儿童可能发生“突破性感染”。1-14岁已接种疫苗的水痘患儿症状相对更轻微和缓和(如，发热较轻和皮损数量较少)。
在已接种疫苗的儿童中，伴随的皮疹明显更有可能表现出非典型性(如斑丘疹)。
相较于未接种疫苗的儿童，已接种的儿童报告并发症的可能性更低。
神经系统并发症(如脑炎)更罕见。
水痘有哪些并发症？
儿童最常见的并发症为细菌性继发性感染，
包括皮肤和软组织感染(42%)、脱水(11%)及神经系统并发症(9%)。
皮肤/软组织感染 ，儿童原发性水痘感染与侵袭性A组链球菌软组织感染发生率增加有关。感染性并发症包括蜂窝织炎、肌炎、坏死性筋膜炎和中毒性休克综合征。
神经系统并发症，有 脑炎和Reye综合征，虽不常见，但这是最严重的并发症。
罕见的神经系统并发症还包括：短暂的局灶性神经功能缺损、无菌性脑膜炎、横贯性脊髓炎、血管炎以及偏瘫。
脑炎 ，占水痘相关性住院的20%。有两种不同形式的脑炎：
1急性小脑性共济失调；
2.弥漫性脑炎
这些疾病通常在皮疹出现的第1周临近结束时发生，但也有中枢神经系统受累先于皮疹发生的病例。
急性小脑性共济失调最常发生于儿童，每4000例水痘感染中约有1例。其病程时间有限，病后通常完全恢复。刚刚不久前本博主就接诊过一例急性小脑性共济失调患儿，是一位3岁女孩，主要表现为走路步态不稳。
弥漫性脑炎最常在成人中发生，但幼儿的风险也增加。其临床表现包括谵妄、癫痫发作和局灶性神经系统表现。病理学检查已发现3种主要形式；尽管通常以一种形式为主，但在很多病例中可同时出现多种特征：
1.中等至大血管病变伴非出血或出血性梗死；
2.小血管病变伴缺血性和脱髓鞘性混合病变；
3脑室炎或周围脑室炎。
报告的脑炎死亡率接近10%，多达15%的存活者报告有长期神经系统后遗症。
Reye综合征，是一种在儿童水痘感染病程期间发生的疾病，通常表现为一组独特的症状，包括恶心、呕吐、头痛、亢奋、谵妄以及攻击性并常常进展为昏迷。人们认识到使用阿斯匹林是Reye综合征的主要诱发因素，该并发症现几乎已经消失。
肺炎 ，仍是较少见的并发症；接种疫苗后，肺炎已很少见。但水痘肺炎可在成人中发病比儿童更常见。
肝炎 ，在水痘患者中并不常见，但当其发生时，通常累及免疫抑制的宿主，包括移植受者和AIDS患者；其结局常致命。
初次发生水痘后，病毒可以在感觉神经节内长期驻留。带状疱疹的发病与宿主免疫状态、年龄相关的免疫衰老、疾病相关的免疫功能低下或医源性免疫抑制的影响，年龄是90%成人带状疱疹病例的主要危险因素。
带状疱疹患者可以将病毒传播给没有感染过水痘并且从未接种过水痘疫苗的个体。病毒可通过直接接触带状疱疹病灶(病灶在干燥和结痂之前被认为具有传染性)传播。局部带状疱疹患者也可通过空气传播。
带状疱疹的主要临床表现常为皮疹及急性神经炎(图片2 )。胸、腰段皮区最常受累(图3)，但任何皮区均可受累。
带状疱疹最常见的并发症为带状疱疹后神经痛，其他并发症包括眼带状疱疹、耳带状疱疹，以及较少见的急性视网膜坏死、无菌性脑膜炎及脑炎。
带状疱疹的诊断通常基于临床表现，即单侧、通常为疼痛性、具有明确皮区分布的水疱性皮疹。
急性神经炎 ，疼痛是带状疱疹最常见的症状。大多数患者自述存在深处“烧灼痛”、“跳痛”或“刺痛”感。
18%的患者皮疹区域疼痛≥30日，且年龄越大，疼痛持续时间越长。
约75%的患者在受累皮区出疹之前有前驱疼痛。前驱疼痛可呈持续性或间歇性，通常在出疹前2-3日出现，但也可更早出现。在出疹前，前驱疼痛常被误认为另一种疾病，如心绞痛、胆囊炎、阑尾炎、椎间盘疾病或肾绞痛，具体取决于所累及的皮区。
并发症 — 带状疱疹后神经痛（PHN）是带状疱疹最常见的并发症是。其他并发症包括眼部、神经系统病变和皮肤的继发细菌感染。
带状疱疹后神经痛 ，为出疹后显著疼痛持续超过90日。在1-10级的疼痛量表上，≥3级为显著疼痛（图4）。感觉症状还可包括受累皮区的麻木、感觉倒错、瘙痒和触诱发痛。
带状疱疹患者的发生PHN发生率为10%-15%，而50%的PHN患者为60岁以上。一项研究发现，在60岁以下带状疱疹患者中PHN发生率为5%，≥80岁患者中为20%。相比之下，接受带状疱疹减毒活疫苗的患者，即使发生带状疱疹，也不太可能出现PHN。
佛教名词浅释[蜡烛]南无阿弥陀佛[蜡烛]
[蜡烛]三世：指过去、现在、未来，统指一切时间。
[蜡烛]三施：财布施、法布施、无畏布施。
[蜡烛]三慧：闻慧、思慧、修慧。
（为证入解脱境界所必须具备的三种宗教智慧。分别是由听闻、思惟、修禅定所形成的。）
[蜡烛]六度：布施波罗蜜、持戒波罗蜜、忍辱波罗蜜、精进波罗蜜、禅定波罗蜜、般若波罗蜜。
（就是六个从烦恼此岸到觉悟彼岸的方法。）
[蜡烛]十二因缘：1）无明；2）行；3）识；4）名色；5）六入；6）触；7）受；8）爱；9）取；10）有；11）生；12）老死。
（也称十二缘起支，佛教重要基础理论之一，是释迦牟尼佛陀自修自证得到的真理，其指从“无明”到“老死”这一过程的十二个环节。）
[蜡烛]四圣谛：苦、集、灭、道。
（释迦牟尼佛体悟的苦、集、灭、道四条人生真理，四谛告诉人们人生的本质是苦，以及之所以苦的原因、消除苦的方法和达到涅槃的最终目的。）
[蜡烛]三毒：贪、瞋、痴。
（指一切痛苦的根源——贪为饿鬼之源，瞋为地狱之源，痴为畜生之源。）
[蜡烛]五毒心（五毒）：贪、瞋、痴、慢、疑。
（这五种心会使我们造作恶业，就像毒药会妨碍我们修行，故称为五毒。）
[蜡烛]八苦：生苦、老苦、病苦、死苦、爱别离苦、怨憎会苦、求不得苦、五取蕴苦。
（佛教称人生八苦。）
[蜡烛]三皈依：也作皈依三宝。一皈依佛，二皈依法，三皈依僧。
（也可说为皈依：觉、正、净。一皈依觉，觉而不迷；二皈依正，正而不邪；三皈依净，净而不染。）
[蜡烛]三宝：在佛教中，称“佛、法、僧”为三宝。
信、愿、行：净土法门之宗要。
[蜡烛]四大：佛教所讲的四大皆空是指“地、水、火、风”的四大物质因素。
[蜡烛]六道：天道、阿修罗道、人道、畜生道、饿鬼道、地狱道。
[蜡烛]三善道：佛教认为六道中，天道、阿修罗道、人道为三善道。
[蜡烛]三恶道：佛教认为六道中，地狱道、饿鬼道、畜生道为三恶道。
[蜡烛]五行：金、木、水、火、土。
（是中国自古以来道学的一种系统观，五行的意义包涵借着阴阳演变过程的五种基本动态。）
[蜡烛]三学：戒、定、慧。
（学佛者必须修持的三种基本学业。）
[蜡烛]四圣道：即声闻道、缘觉道、菩萨道、佛道。
[蜡烛]十法界：地狱法界、饿鬼法界、畜生法界、阿修罗法界、人法界、天法界、声闻法界、缘觉法界、菩萨法界和佛法界。
（佛教术语，将佛和众生分为十大法界。分别是前六项称为六凡，后四项称为四圣，合称为六凡四圣。）
[蜡烛]五欲：佛教中指财、色、名、食、睡等五种欲望。
[蜡烛]六尘：佛教中指色、声、香、味、触、法等六种境界。
[蜡烛]六根：眼、耳、鼻、舌、身、意。
（指六种感觉器官或认识能力。眼是视根，耳是听根，鼻是嗅根，舌是味根，身是触根，意是念虑之根。）
[蜡烛]六触：指眼触、耳触、鼻触、舌触、身触、意触等六种作用。
[蜡烛]六识：眼识、耳识、鼻识、舌识、身识、意识。
（其与六根、六尘，合称为十八界。）
[蜡烛]五蕴：色蕴、受蕴、想蕴、行蕴、识蕴五种。
[蜡烛]十善业：一、不杀生；二、不偷盗；三、不邪淫；四、不恶口；五、不两舌；六、不妄语；七、不绮语；八、不贪；九、不瞋；十、不痴。或称十善业道。
[蜡烛]三法印：诸行无常、诸法无我、涅槃寂静。
[蜡烛]四无量心：慈无量心、悲无量心、喜无量心、舍无量心。
（佛教四种广大的利他心。即为令无量众生离苦得乐，而起的四种心，又称四无量、四等心、四等、四梵住、四梵行、无量心解脱。）
[蜡烛]佛学四德：常、乐、我、净。
（指大涅槃的果德，又称涅槃四德。）
[蜡烛]四弘誓愿：众生无边誓愿度，烦恼无尽誓愿断，法门无量誓愿学，佛道无上誓愿成。
[蜡烛]四念住：又称四念处。一、身念处，观身不净；二、受念处，观受是苦；三、心念处，观心无常；四、法念处，观法无我。
（指四个安顿心念的处所，又称为四念处观。）
[蜡烛]五种观想法：一、不净观；二、慈悲观；三、因缘观；四、界分别观；五、数息观。
[蜡烛]西方三圣：又称阿弥陀三尊。中间是阿弥陀佛，左边观世音菩萨，右边大势至菩萨。
（此处的左和右是按照阿弥陀佛的左手边和右手边。）
[蜡烛]佛教中四大菩萨：文殊菩萨、观世音菩萨、普贤菩萨、地藏菩萨。
[蜡烛]三世诸佛：即过去、现在、未来等三世的一切诸佛。又作一切诸佛、十方佛、三世佛。一般以燃灯佛代表过去诸佛，释迦牟尼佛代表现在诸佛，弥勒尊佛代表未来诸佛。
[蜡烛]六通：佛教名词，指天眼通、天耳通、他心通、宿命通、神足通、漏尽通。
[蜡烛]三界：欲界、色界、无色界。
[蜡烛]五浊：劫浊、众生浊、命浊、烦恼浊、见浊。
[蜡烛]三业：身业、口业、意业。（①身之孽业，杀、盗、淫；②口之孽业，两舌、恶口、妄言、绮语；③意之孽业，贪、瞋、痴。）
[蜡烛]如来十号：佛有十种名号，即应供、正遍知、明行足、善逝、世间解、无上士、调御丈夫、天人师、佛、世尊。
[蜡烛]正法、像法、末法：佛虽然已不在这世间了，但是佛的法运还没有结束。释迦牟尼佛的法运是一万二千年，从佛入灭算起，佛灭度第一个一千年是“正法”；第二个一千年是“像法”；第三个一千年以后，共有一万年的时间叫“末法”。现在是属于末法时期的第一个一千年，往后还有九千年。
[蜡烛]五力：信力、进力、念力、定力、慧力。
[蜡烛]带业往生：修行改变之后，带业往生讲的是这个人曾经造过业障，或者犯过罪。现在修行忏悔罪业，还有留下的业障痕迹，是一些很轻的业，而不是带着重业往生。
带业往生带的是你过去的已经抹去的旧业的痕迹，不是带新业，如果带新业能够到天上、到西方极乐世界去的话，那就是乱因果。
[蜡烛]四种觉：始觉、相似觉、随分觉、究竟觉。
[蜡烛]无我：无我，就是没有我自己。无我有两种：人无我、法无我。
[蜡烛]念佛的四种方法：持名、观像、观想、实相。
（1）持名：念佛的时候先要持名，在念经之前，一定要先讲请南无大慈大悲观世音菩萨保佑我如何如何。
（2）观像：看着观世音菩萨的像念经，心里会纯洁。
（3）观想：脑子里观想观世音菩萨，但是观想很难，刚开始学佛念经的人，稍不留神很容易走火入魔。
（4）实相：实实在在看到的东西，也就是实实在在的，我不想任何东西，看到什么就是什么，什么都不往脑子想。实相的意思就是自然的，不往心里去的东西，不要用心去执著地想，我要看到观世音菩萨。
[蜡烛]十大行愿：①礼敬诸佛；②称赞如来；③广修供养；④忏悔业障；⑤随喜功德；⑥法物常转；⑦请佛住世；⑧常随佛学；⑨恒顺众生；⑩普皆回向。
[蜡烛]执著：我执、他执、法执。
[蜡烛]三身：法身、化身、报身。#大乘佛教[超话]#
[蜡烛]三世：指过去、现在、未来，统指一切时间。
[蜡烛]三施：财布施、法布施、无畏布施。
[蜡烛]三慧：闻慧、思慧、修慧。
（为证入解脱境界所必须具备的三种宗教智慧。分别是由听闻、思惟、修禅定所形成的。）
[蜡烛]六度：布施波罗蜜、持戒波罗蜜、忍辱波罗蜜、精进波罗蜜、禅定波罗蜜、般若波罗蜜。
（就是六个从烦恼此岸到觉悟彼岸的方法。）
[蜡烛]十二因缘：1）无明；2）行；3）识；4）名色；5）六入；6）触；7）受；8）爱；9）取；10）有；11）生；12）老死。
（也称十二缘起支，佛教重要基础理论之一，是释迦牟尼佛陀自修自证得到的真理，其指从“无明”到“老死”这一过程的十二个环节。）
[蜡烛]四圣谛：苦、集、灭、道。
（释迦牟尼佛体悟的苦、集、灭、道四条人生真理，四谛告诉人们人生的本质是苦，以及之所以苦的原因、消除苦的方法和达到涅槃的最终目的。）
[蜡烛]三毒：贪、瞋、痴。
（指一切痛苦的根源——贪为饿鬼之源，瞋为地狱之源，痴为畜生之源。）
[蜡烛]五毒心（五毒）：贪、瞋、痴、慢、疑。
（这五种心会使我们造作恶业，就像毒药会妨碍我们修行，故称为五毒。）
[蜡烛]八苦：生苦、老苦、病苦、死苦、爱别离苦、怨憎会苦、求不得苦、五取蕴苦。
（佛教称人生八苦。）
[蜡烛]三皈依：也作皈依三宝。一皈依佛，二皈依法，三皈依僧。
（也可说为皈依：觉、正、净。一皈依觉，觉而不迷；二皈依正，正而不邪；三皈依净，净而不染。）
[蜡烛]三宝：在佛教中，称“佛、法、僧”为三宝。
信、愿、行：净土法门之宗要。
[蜡烛]四大：佛教所讲的四大皆空是指“地、水、火、风”的四大物质因素。
[蜡烛]六道：天道、阿修罗道、人道、畜生道、饿鬼道、地狱道。
[蜡烛]三善道：佛教认为六道中，天道、阿修罗道、人道为三善道。
[蜡烛]三恶道：佛教认为六道中，地狱道、饿鬼道、畜生道为三恶道。
[蜡烛]五行：金、木、水、火、土。
（是中国自古以来道学的一种系统观，五行的意义包涵借着阴阳演变过程的五种基本动态。）
[蜡烛]三学：戒、定、慧。
（学佛者必须修持的三种基本学业。）
[蜡烛]四圣道：即声闻道、缘觉道、菩萨道、佛道。
[蜡烛]十法界：地狱法界、饿鬼法界、畜生法界、阿修罗法界、人法界、天法界、声闻法界、缘觉法界、菩萨法界和佛法界。
（佛教术语，将佛和众生分为十大法界。分别是前六项称为六凡，后四项称为四圣，合称为六凡四圣。）
[蜡烛]五欲：佛教中指财、色、名、食、睡等五种欲望。
[蜡烛]六尘：佛教中指色、声、香、味、触、法等六种境界。
[蜡烛]六根：眼、耳、鼻、舌、身、意。
（指六种感觉器官或认识能力。眼是视根，耳是听根，鼻是嗅根，舌是味根，身是触根，意是念虑之根。）
[蜡烛]六触：指眼触、耳触、鼻触、舌触、身触、意触等六种作用。
[蜡烛]六识：眼识、耳识、鼻识、舌识、身识、意识。
（其与六根、六尘，合称为十八界。）
[蜡烛]五蕴：色蕴、受蕴、想蕴、行蕴、识蕴五种。
[蜡烛]十善业：一、不杀生；二、不偷盗；三、不邪淫；四、不恶口；五、不两舌；六、不妄语；七、不绮语；八、不贪；九、不瞋；十、不痴。或称十善业道。
[蜡烛]三法印：诸行无常、诸法无我、涅槃寂静。
[蜡烛]四无量心：慈无量心、悲无量心、喜无量心、舍无量心。
（佛教四种广大的利他心。即为令无量众生离苦得乐，而起的四种心，又称四无量、四等心、四等、四梵住、四梵行、无量心解脱。）
[蜡烛]佛学四德：常、乐、我、净。
（指大涅槃的果德，又称涅槃四德。）
[蜡烛]四弘誓愿：众生无边誓愿度，烦恼无尽誓愿断，法门无量誓愿学，佛道无上誓愿成。
[蜡烛]四念住：又称四念处。一、身念处，观身不净；二、受念处，观受是苦；三、心念处，观心无常；四、法念处，观法无我。
（指四个安顿心念的处所，又称为四念处观。）
[蜡烛]五种观想法：一、不净观；二、慈悲观；三、因缘观；四、界分别观；五、数息观。
[蜡烛]西方三圣：又称阿弥陀三尊。中间是阿弥陀佛，左边观世音菩萨，右边大势至菩萨。
（此处的左和右是按照阿弥陀佛的左手边和右手边。）
[蜡烛]佛教中四大菩萨：文殊菩萨、观世音菩萨、普贤菩萨、地藏菩萨。
[蜡烛]三世诸佛：即过去、现在、未来等三世的一切诸佛。又作一切诸佛、十方佛、三世佛。一般以燃灯佛代表过去诸佛，释迦牟尼佛代表现在诸佛，弥勒尊佛代表未来诸佛。
[蜡烛]六通：佛教名词，指天眼通、天耳通、他心通、宿命通、神足通、漏尽通。
[蜡烛]三界：欲界、色界、无色界。
[蜡烛]五浊：劫浊、众生浊、命浊、烦恼浊、见浊。
[蜡烛]三业：身业、口业、意业。（①身之孽业，杀、盗、淫；②口之孽业，两舌、恶口、妄言、绮语；③意之孽业，贪、瞋、痴。）
[蜡烛]如来十号：佛有十种名号，即应供、正遍知、明行足、善逝、世间解、无上士、调御丈夫、天人师、佛、世尊。
[蜡烛]正法、像法、末法：佛虽然已不在这世间了，但是佛的法运还没有结束。释迦牟尼佛的法运是一万二千年，从佛入灭算起，佛灭度第一个一千年是“正法”；第二个一千年是“像法”；第三个一千年以后，共有一万年的时间叫“末法”。现在是属于末法时期的第一个一千年，往后还有九千年。
[蜡烛]五力：信力、进力、念力、定力、慧力。
[蜡烛]带业往生：修行改变之后，带业往生讲的是这个人曾经造过业障，或者犯过罪。现在修行忏悔罪业，还有留下的业障痕迹，是一些很轻的业，而不是带着重业往生。
带业往生带的是你过去的已经抹去的旧业的痕迹，不是带新业，如果带新业能够到天上、到西方极乐世界去的话，那就是乱因果。
[蜡烛]四种觉：始觉、相似觉、随分觉、究竟觉。
[蜡烛]无我：无我，就是没有我自己。无我有两种：人无我、法无我。
[蜡烛]念佛的四种方法：持名、观像、观想、实相。
（1）持名：念佛的时候先要持名，在念经之前，一定要先讲请南无大慈大悲观世音菩萨保佑我如何如何。
（2）观像：看着观世音菩萨的像念经，心里会纯洁。
（3）观想：脑子里观想观世音菩萨，但是观想很难，刚开始学佛念经的人，稍不留神很容易走火入魔。
（4）实相：实实在在看到的东西，也就是实实在在的，我不想任何东西，看到什么就是什么，什么都不往脑子想。实相的意思就是自然的，不往心里去的东西，不要用心去执著地想，我要看到观世音菩萨。
[蜡烛]十大行愿：①礼敬诸佛；②称赞如来；③广修供养；④忏悔业障；⑤随喜功德；⑥法物常转；⑦请佛住世；⑧常随佛学；⑨恒顺众生；⑩普皆回向。
[蜡烛]执著：我执、他执、法执。
[蜡烛]三身：法身、化身、报身。#大乘佛教[超话]#
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