【#春季进入蜱虫叮咬高发期# 如何预防蜱虫叮咬?】
天气转暖,蜱虫也开始活跃,朋友们去户外活动时应注意:
①去野外时,尽量避免在草地、树林等环境中长时间坐卧。应穿长袖衣裤,扎紧裤腿,穿浅色衣服便于查找有无蜱附着,衣物表面应当尽量光滑,不穿凉鞋。
②因为蜱虫常附着在人体的耳后、大腿根、阴囊等隐秘部位,外出归来后,应仔细检查身体有无蜱虫叮咬,最好能洗个澡。
③有蜱叮咬史或野外活动史者,一旦出现发热等疑似症状或体征,应当及早就医,并告知医生,以免误诊漏诊。
④当携带宠物外出到蜱类生活地区旅行时,除要做好个人防护外,离开时要仔细检查宠物体表是否有蜱类附着。
如果发现被蜱虫叮咬,不要生拉硬拽强行拔除,也不要用手指将蜱虫捏碎。应用镊子反向将蜱虫拔出或到医院进行处置。若出现伤口发炎、瘙痒,或有发烧、头疼等不适症状,请尽快到正规医院检查治疗,并告知医生相关情况。[来源:桐庐县卫健局]

#原代细胞是如何培养的?选择组织块还是消化液培养法?

原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官,让它们在体外维持与生长。原代培养的特点是细胞或组织刚离开机体,它们的生物性状尚未发生很大的改变,在一定程度上可反映它们在体内的状态,表现出来源组织或细胞的特性, 因此用于药物实验,尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等,是极好的工具。

那么,原代细胞是如何培养的呢?

常用的原代培养法有组织块培养法和消化培养法。

(一)组织块培养法

许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养,因为方法简单,细胞也较容易生长。尤其是培养心肌,有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后, 即可进行传代。

1. 设备材料

培养箱、冰箱、超净工作台/无菌间、无菌吸管、离心管、酒精灯、试管架、培养瓶、培养皿、消化液、基础培养液、胎牛血清、Hanks 溶液、双抗试液、剪刀、摄子、小烧杯。

2. 操作步骤

(1) 在无菌条件下,取待培养的组织适量,置入小烧杯中, 以适量Hanks 溶液清洗2~3 次,去掉组织块表面的血污。
(2)用眼科剪将组织块反复剪成0.5~ 1mm3的小块。
(3)再用Hanks 溶液反复漂洗, 直至液体不混浊为止。等组织块下沉,将烧杯倾斜,用小吸管尽量吸除Hanks 溶液。
(4)用含20%灭活血清及双抗溶液(200U/ml 青霉素、200μg/ml 链霉素)的培养液再清洗,用吸管吸干后加入5ml 含20%血清的培养液。
(5)用弯头吸管吸取组织小块,均匀地置于培养皿内表面,吸去多余的培养液,各组织小块之间相距0.5cm 为宜。盖好培养皿盖,做好标记, 置37°C 的CO2培养箱内。
(6) 2~4h 后,于超净工作台中,缓缓地向培养皿中加入上述含20%血清及双抗溶液( 100U/ml 青霉素及100μg/ml 链霉素)的培养液少量,以使组织块浸没在培养液中。
(7)轻轻地将培养皿及组织块移至CO2 培养箱, 如无特殊情况,不必观察。1~2 周后,可观察到细胞从组织块边缘长出,形成生长晕。
(9) 一般说来,若培养液无明显改变, 1 周换液1 次即可。待细胞长满整个培养皿内表面,即可进行传代培养。

3. 需要说明及注意的问题

(1) 如果是用培养瓶而不是培养皿,则接种组织块千培养瓶底壁后, 要轻轻地翻转培养瓶,令瓶底在上,盖好瓶盖后轻轻置入37°C 的CO2 培养箱, 2~4h 后,取出培养瓶,在超净工作台内打开瓶盖,仍令组织块在上方。在组织块对面瓶壁加入适量上述培养液。然后,轻轻翻转培养瓶,让组织块浸没于培养液中。盖好瓶盖后放回二氧化碳孵箱,继续培养。
(2) 从培养皿表面游离下来的组织块,弃去即可。
(3) 如果使用玻璃培养瓶,而不是新的塑料培养瓶,则最好在玻璃底表面包被大鼠鼠尾胶原,这样不但有利于组织块的黏附,而且可使细胞生长得更好。
(4)本方法适于各种组织的培养,操作者还可根据自己的实验需要和细胞种类加以修改。

(二)消化培养法

它与上述组织块培养法的主要区别有2 点。一要用酶制剂(最常用的是胰蛋白酶)处理组织块,除去细胞间质,使细胞相互分离,形成细胞悬液;二细胞生长方式多为单层( monolayer ) 。本方法的优点在于单层细胞更易摄取营养、排出代谢产物,因此生长较快,可较快地应用于实验研究;缺点是步骤颇为繁琐,操作不慎易污染。此外,消化处理要恰到好处,不然对细胞会有一定的损伤作用。

1. 操作程序

(1) 在无菌条件下, 取待培养的组织1cm3左右,置入平皿或烧杯中,以适量Hanks 溶液消洗3 次,去掉组织块表面的血污及结缔组织。
(2)以锋利的眼科剪将组织块反复剪碎,得到约0.5mm x 1mm 大小的小块。
(3)以Hanks 溶液冲洗数遍,稍候组织块下沉,吸除Hanks 溶液。
(4)用少量Hanks 溶液,将组织小块吸入预先置有无菌的磁力搅拌子的锥形烧杯中,再加入15~30ml 上述胰蛋白酶消化液。
(5)将锥形烧杯用橡皮塞盖紧,外封以锡箔。然后移至预先置入37°C 培养箱内的电磁搅拌器上。
(6)打开搅拌器的电源开关,使搅拌子旋转, 关好培养箱,让胰蛋白酶进行消化。
(7)在消化过程中,每隔一定时间吸取消化物滴于载片上,于光学显微镜下观察,检查细胞是否分散成单个。若大部分细胞已分散,立即加入适量Hanks 溶液,终止消化。通常需消化10~20min 。
(8)先以100μm 不锈钢筛过滤,滤去未消化的组织块或大细胞团(如获得的细胞量少,这些组织块可继续进行消化,以便取得较多细胞)。继以20μ 不锈钢筛过滤。
(9)将取得的滤液进行低速(每分钟500~ 1000 转)离心5min,吸除上清液。并用Hanks 溶液离心清洗1~2 次,最后加入含血清的培养液,搅匀,制成细胞悬液。
(10)用计数板计数,确定细胞悬液浓度,通常以1×105~3×105个接种于培养瓶或培养皿中。

2. 需要说明及注意的问题

(1) 用何种酶进行消化可视所培养细胞而定,除胰蛋白酶外,常用1 型胶原酶消化睾丸支持细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞;用II 型胶原酶消化大鼠腺垂体细胞等。
(2)如果没有不锈钢筛, 可用4 层纱布代替,但纱布要预先经高温高压灭菌。
(3) 严格地说,原代培养是指未经传代的细胞,但在实际工作中,人们常将10 代以内的细胞用作原代培养细胞,因为此时的细胞基本上保持着原有的生物学特性。
(4) 从原代培养的操作步骤不难看出,原代细胞中含有多种细胞成分,即它们是异质型( heterogeneity) 的群体,因此在设计实验及分析结果时,切勿忘记这一因素。

如何选用药芯焊丝与实心焊丝,太全了
实心焊丝选用

(1)埋弧焊焊丝

埋弧焊时焊剂对焊缝金属起保护和冶金处理作用,焊丝主要作为填充金属,同时向焊缝添加合金元素,并参与冶金反应。

1)低碳钢和低合金钢用焊丝 低碳钢和低合金钢埋弧焊常用焊丝有如下三类。

A、低锰焊丝(如H08A):常配合高锰焊剂用于低碳钢及强度较低的低合金钢焊接。

B、中锰焊丝(如H08MnA,H10MnS):主要用于低合金钢焊接,也可配合低锰焊剂用于低碳钢焊接。

C、高锰焊丝(如H10Mn2 H08Mn2Si):用于低合金钢焊接

2)高强钢用丝

这类焊丝含Mn1%以上,含Mo0.3%~0.8%,如H08MnMoA、H08Mn2MoA,用于强度较高的低合金高强钢焊接。此外,根据高强钢的成分及使用性能要求,还可在焊丝中加入NI、CR、V及Re等元素,提高焊缝性能。抗拉强度590Mpa级的焊缝金属多采用MN-MO系焊丝,如H08MNMOA等。

3)不锈钢用焊丝

采用的焊丝成分要与被焊接的不锈钢分成基本一致,焊接铬不锈钢时,采用HoCr14 H1Cr13 H1Cr17等焊丝;焊接铬-镍不锈钢时,采用H0Cr19Ni9 HoCr19Ni9 HoCr19Ni9Ti等焊丝;焊接超低碳不锈钢时,应采用相应的超低碳焊丝,如HOOCr19Ni9等,焊剂可采用熔炼型或烧结型,要求焊剂的氧化性小,以减少合金元素的烧损。目前国外主要采用烧结焊剂焊接不锈钢、我国仍以熔炼焊剂为主,但正在研制和推广使用烧结焊剂。

(2)气体保护焊用焊丝

气体保护焊分为惰性气体保护焊(TIG焊和MIG焊)、活性气体保护焊(MAG焊)以及自保护焊接。TIG焊接时采用纯Ar,MIG焊接时一般采用Ar+2%O2或Ar+5%CO2。MAG焊接时主要采用CO2气体。为了改善CO2焊接的工艺性能,也可采用CO2+Ar或CO2+Ar+O2混合气体或是采用药芯焊丝。

1)TIG焊焊丝

TIG焊接有时不加填充焊丝,被焊母材加热熔化后直接连接起来,有时加填充焊丝,由于保护气体为纯Ar,无氧化性,焊丝熔化后成分基本不发生变化,所以焊丝成分即为焊缝成分。也有的采用母材成分作为焊丝成分,使焊缝成分与母材一致。TIG焊时焊接能量小,焊缝强度和塑、韧性良好,容易满足使用性能要求。

2)MIG和MAG焊丝

MIG方法主要用于焊接不锈钢等高合金钢。为了改善电弧特性,在Ar气体中加入适量O2或CO2气体,即成为MAG方法。焊接合金钢时,采用Ar+5%CO2可提高焊缝的抗气孔能力。但焊接超低碳不锈钢时不能采用Ar+5%CO2混合气体,只可采用Ar+2%O2混合气体,以防止焊缝增碳。目前低合金钢的MIG焊接正在逐步被Ar+20%CO2的MAG焊接所取代。MAG焊接时由于保护气体有一定的氧化性,应适当提高焊丝中Si、Mn等脱氧元素的含量,其他成分可以与母材一致,也可以有所差别。焊接高强钢时,焊缝中C的含量通常低于母材,Mn含量则应高于母材,这不权为了脱氧,也是焊缝合金成分的要求。为了改善低温韧度,焊缝中的Si的含量不宜过高,

3)CO2焊焊丝

CO2是活性气体,具有较强的氧化性,因此CO2焊所用焊丝必须含有较高的Mn 、Si等脱氧元素。CO2焊通常采用C-Mn-Si系焊丝,如H08MnSiA、H08Mn2SiA、H04Mn2SiA等。CO2焊焊丝直径一般是0.89 1.0 1.2 1.6 2.0mm等。焊丝直径≤1.2mm属于细丝CO2焊,焊丝直径≥1.6mm属于粗丝CO2焊。

H08Mn2SiA焊丝是一种广泛应用的CO2焊焊丝,它有较好的工艺性能,适合于焊接500Mpa级以下的低合金钢。

(3)电渣焊焊丝

电渣焊适用于中板和厚板焊接。电渣焊焊丝主要起填充金属和合金化的作用。

(4)有色金属及铸铁焊丝

牌号前两个字母“HS”表示有色金属及铸铁焊丝;牌号中第一位数字表示焊丝的经学组成类型,牌号中第二、三位数字表示同一类型焊丝的不同牌号。

1)堆焊焊丝

目前生产的堆焊用硬质合金焊丝主要有两类:即高铬合金铸铁(索尔玛依特)和钴基(司太立)合金。高铬合金铸铁具有良好的抗氧化性和耐气蚀性能,硬度高、耐磨性好。而钴基合金则在650度的高温下,亦能保持高的硬度和良好的耐蚀性能。其中低碳、低钨的韧性好;高碳、高钨的硬度高,但抗冲击能力差。

硬质合金堆焊焊丝可采用氧-乙炔、气电焊等方法堆焊,其中氧-乙炔堆焊虽然生产效率低,但设备简单,堆焊时熔深浅,母材熔化量少,堆焊质量高,因为应用较广泛。

2)铜及铜合金焊丝

铜及铜合金焊丝常用于焊接铜及铜合金,其中黄铜焊丝也广泛用于钎焊碳钢、铸铁及硬质合金刀具等。铜及铜合金的焊接,可以采用多种焊接方法,正确地选择填充金属是获得优质焊缝的必要条件。用氧-乙炔气焊时应配合气焊熔剂共同使用。

3)铝及铝合金焊丝

铝及铝合金焊丝用于铝合金氩弧焊及氧-乙炔气焊时作填充材料。焊丝的选择主要根据母材的种类、对接接头抗裂性能、力学性能及耐蚀性等方面的要求综合考虑。一般情况下,焊接铝及铝合金都采用与母材成分相同或相近牌号的焊线,这样可以获得较好的耐蚀性;但焊接热裂倾向大的热处理强化铝合金时,选择焊丝则主要从解决抗裂性入手,这时焊丝的成分与母材差别很大。

4)铸铁焊丝

主要用于气焊焊补铸铁。由于氧-乙炔火焰温度(小于3400℃)比电弧温度(6000℃)低很多,而且热点不集中,较适于灰口铸铁薄壁铸件的焊补。此外,气焊火焰温度低于可减少球化剂的蒸发,有利于保证焊缝获得球墨铸铁组织。目前气焊用球铁焊丝主要有加稀土镁合金和钇基重稀土的两种,由于钇的沸点高,抗球化衰退能力比镁强,更有利于保证焊缝球化,故近年来应用较多。

药芯焊丝的选用

(1)药芯焊丝的种类与特性

根据焊丝的结构,药芯焊丝可分为有缝焊丝和无缝焊丝两种。无缝焊丝可以镀铜,性能好、成本低、已成为今后发展的方向。

根据是否有保护气体,药芯焊丝可分为气体保护焊丝和自保护焊丝;药芯焊丝芯部粉剂的成分与焊条药皮相似,含有稳弧剂、脱氧剂、造渣剂及合金剂等,根据药芯焊丝内层填料粉剂中有无造渣剂,可分为“药粉型”焊丝和“金属粉型”焊丝;按照渣的碱度,可分为钛型、钛钙型和钙型焊丝。

钛型渣系药芯焊丝的焊道成形美观,全位置焊接进工艺性能好、电弧稳定、飞溅小、但焊缝金属的韧性和抗裂性能较差。与此相反,钙型渣系药芯焊丝的焊缝韧性和抗裂性能优良,但焊道成形和焊接工艺性能稍差。钛钙型渣系介于上述二者之间。

“金属粉型”药芯焊丝的焊接工艺性能类似于实芯焊丝,其熔敷效率和抗裂性能优于“药粉型”焊丝。粉芯中大部分是金属粉(铁粉、脱氧剂等),还加入特殊的稳弧剂,可保证焊接时造渣少、效率高、飞溅小、电弧稳定,而且焊缝扩散氢含量低,抗裂性能得到改善。

药芯焊丝的截面形状对焊接工艺性能与冶金性能有很大影响。根据药芯焊丝的截面形状可分为简单的O形和复杂断面的折叠形两类,折叠形又可分为梅花形、T形、E形和中间填丝形等。

药芯焊丝的截面形状越复杂、越对称,电弧越稳定,药芯的冶金反应和保护作用越充分。但是随着焊丝直径的减小,这种差别逐渐缩小,当焊丝直径小于2mm时,截成形状的影响已不明显了。

药芯焊丝的焊接工艺性能好、焊缝质量好、对钢材的适应性强,可用于焊接各种类型的钢结构,包括低碳钢、低合金高强钢、低温钢、耐热钢、不锈钢及耐磨堆焊等。所采用的保护气体有CO2和Ar+CO2两种,前者用于普通结构,后者有于重要结构。药芯焊丝适于自动或地半自动焊接,直流或交流电弧均要。

1)低碳钢及高强钢用药芯焊丝

这类焊丝大多数为钛型渣系,焊接工艺性好、焊接生产率高,主要用于造船、桥梁、建筑、车辆制造等。低碳钢及高强钢用药芯焊丝品种较多,从焊缝强度级别上看抗拉强度490MPa级和590Mpa级的药芯焊丝已普遍使用;从性能上看,有的侧重于工艺性能,有的侧重于焊缝力学性能和抗裂性能,有的适用于包括向下立焊在内的全位置焊,也有的专用于角焊缝。

2)不锈钢用药芯焊丝

不锈钢药芯焊丝的口种已有20余种,除铬镍系不锈钢药芯焊丝外,还有铬系不锈钢药芯焊丝。焊丝直径有0.8、1.2、1.6mm等,可满足不锈钢薄板、中板及厚板的焊接需要。所采用的保护气体多数为CO2,也可采用Ar+(20%~50%)CO2的混合气体。

3)耐磨堆焊用药芯焊丝

为了增加耐磨性或使金属表面获得某些特殊性能,需要从焊丝中过渡一定量的合金元素,但是焊丝因含碳量和合金元素较多,难于加工制造。随着药芯焊丝的问世,这些合金元素可加入药芯中,且加工制造方便,故采用药芯焊丝进行埋弧堆焊耐磨表面是种常用的方法,并已得到广泛应用。此外,在烧结焊剂中加入合金元素,堆焊后也能得到相应成分的堆焊层,它与实芯或药芯焊丝相配合,可满足不同的堆焊要求。

常用药芯焊丝CO2堆焊和药芯焊丝埋弧堆焊方法如下。

细丝CO2药芯焊丝堆焊 该方法焊接效率高,生产效率为手弧焊的3~4倍;焊接工艺性能优良,电弧稳定、飞溅小、脱渣容易、堆焊成形美观。这种方法只能通常药芯焊丝过渡合金元素,多用于合金成分不太高的堆焊层。

药芯焊丝埋弧堆焊 采用大直径(3.2 、4.0mm)的药芯焊丝,焊接电流大,焊接生产率明显提高。当采用烧焊剂时,还可通过焊剂过渡合金元素,使堆焊层得到更高的合金成分,其合金含量可在14%~20%之间变化,以满足不同的使用要求。该法主要用于堆焊轧制辊、送进辊、连铸辊等耐磨耐蚀部件。

(2)自保护药芯焊丝

自保护焊丝是指不需要保护气体或焊剂,就可进行电弧焊,从而获得合格焊缝的焊丝,自保护药芯焊丝是把作为造渣、造气、脱氧作用的粉剂和金属粉置于钢皮之内或涂在焊丝表面,焊接时粉剂在电弧作用下变成熔渣和气体,起到造渣和造气保护作用,不用另加气体保护。

自保护药芯焊丝的熔敷效率明显比焊条高,野外施焊的灵活性和抗风能力优于气体保护焊,通常可在四级风力下施焊。因为不需要保护气体,适于野外或高空作业,故多用于安装现场和建筑工地。

自保护焊丝的焊缝金属塑、韧性一般低于采用保护气体的药芯焊丝。自保护焊丝目前主要用于低碳钢焊接结构,不宜用于焊接高强度钢等重要结构,此外,自保护焊丝施焊时烟尘较大,在狭窄空间作业时要注意加强通风换气。


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