不避开这6大误区，吃再多益生菌都没用！
益生菌是什么？
所谓的知识误区都是因为了解的不透彻导致的。
所以，在开始讲误区之前，我决定先简单给大家介绍一下益生菌是什么。
益生菌，是细菌的一类，而细菌就是咱们生活中无处不在的、肉眼看不见的微生物。
再往狭义了讲，我们所说的益生菌指的是：对于人体肠道来说，只有益而无害的活菌。
肠道中有数不清的细菌，一共能分3大类：
有害菌、益生菌（有益菌）以及中性菌。
益生菌和有害菌相互制约，维持着肠道菌群的平衡。
如果因为内在或外在原因导致益生菌减少，打破了这种相互制约的平衡，那么益生菌的保护作用被削弱，有害菌过度滋生，这么一来，人就会生病。
大家打个比方：
你的肠道好比是一座城，益生菌就是这座城里的“警察”，主要作用就是保护这座城的安全稳定，而有害菌就是“坏人”，中性菌就是“居民”，一些吃瓜群众。
正常情况下，因为有足够数量的“警察”在，“坏人”会有所收敛。但是如果因为各种原因让城里原本的“警察”都消失了，那么“坏人”就会猖獗，破坏你的城，破坏肠道内原有的菌群平衡。
当这种破坏达到一定程度时，人就会生病。
好，知道了益生菌大致是怎么回事儿以后，再说说益生菌的生存需要什么特定的条件。
首先，是厌氧环境。
直接点说，就是没有氧气的环境。益生菌只有在无氧的环境下才能茁壮成长，如果接触到氧气，益生菌就会死亡。
当然，对于咱们人类来说，是不太能理解这种特殊需求的。
给大家打个比方，给益生菌接触到了氧气，就好比你被人掐住了脖颈子，你有多难受它就有多难受。
其次，是纤维素。
直接点说，就是益生菌的食物。民以食为天，益生菌也是，即便有了无氧的环境，没有食物照样得死的死蔫儿的蔫儿。
好了，关于益生菌的一些简单介绍就到这里了。
好，接下来大家说说关于补充益生菌，大家都容易陷入什么样的误区。
误区1
益生菌能“治百病”
一个新兴的概念出现时，很容易掀起一阵追捧的热潮。
因为大家对它不是很了解，碎片化的信息很容易拼接出一个被“神化”过的形象。
益生菌算是近几年被“神化”的典型代表。
叔可忍婶儿都不能忍。
消化不良，胃口差，便秘，腹泻，但凡和消化系统沾边儿的，都觉得要吃点益生菌。
甚至不少人认为，虽然孩子现在没生病，但是补点益生菌可以让身体变得更好。
简单来说，有病治病，没病强身啊。
但上面也提到了，城里原本的“警察”（益生菌）要是少了，“坏人”就会猖獗，你只能通过从外界借调“警察”来恢复原先的平衡，它们的职责和功能仅在于此。
你不可能让“警察”去干建筑工人的活儿，指望它们能把你的小瓦房翻成大别墅。
益生菌没那么大的本事，别为难它们。
它只能调节肠道菌群，让其恢复到平衡状态。
只能雪中送炭，不能锦上添花。
误区2
自行随意补充
好，既然益生菌不能强身健体，那孩子肠道平衡被打破了，这个时候补充总没错吧？
所以，大家又陷入另一个误区，那就是觉得腹泻、便秘或等等其他情况，只要吃了益生菌，就一定能起到调节作用。
事实上，这样随意自行补充收效甚微。
因为益生菌是一个总称，它里面还有各种分类，比较常见的有双歧杆菌、乳酸杆菌等。
要通过肠道菌群检测来确定你体内到底是少了哪一种或哪几种益生菌。
缺什么补什么，这才是硬道理。
如果体内缺乏的是双歧杆菌，你补乳酸杆菌就起不到很好的作用。
还是那个比方，就算是“警察”，也有各自的分工，有专门负责出去抓“坏人”的，还有负责内勤的。
你让一个负责内勤的“警察”去抓“坏人”，完了还怪人家没用。人家也很委屈啊。
所以说，补益生菌最好是在做了肠道菌群检测之后在医生的指导下合理补充。
误区3
孩子还小要减量
咱们做家长的都有一个惯性思维：
孩子就是“S”号的成人。
这点在用药上表现的尤为显著。
给孩子补充益生菌的时候，说明书上让一次吃一袋，咱们一想，孩子还小，少吃点吧，一次吃四分之三，或者干脆吃半袋好了。
这么吃，可以说是很没有效果了。
因为人体内的细菌虽然体积微小但是数量是你难以想象的庞大，所以不能用咱们平时用的数量级去衡量它们。
益生菌通常都是以“亿”为单位来衡量的，对于孩子来说，每次吃50~150亿个益生菌是最合适的。
以100亿为例，如果人为减半了，那就直接少了50个亿。
50个亿啊！
误区4
死菌活菌都一样
大家都知道应该补充益生菌，但也有不少人觉得，我哪儿知道什么死菌活菌，只要是益生菌不就行了吗？
从概念上出发，益生菌必须是活菌，也就是说它得在有活性的情况下才能起到作用。
如果补充的是死菌，除了费钱以外，基本没其他作用了。
这个也很好理解。
就好比，你费尽千辛万苦借来了“警察”，但发现这些“警察”跟橱窗里的模特似的，光杵着不能动弹，那要它们干嘛？
当然，大家也会说，道理我都懂，问题是我又没有火眼金睛，我哪知道它是活的还是死的？
在这里告诉大家一个很简单的判断方法。
那就是拿你买的益生菌加鲜牛奶发酸奶。
在无客观主观因素影响下，如果能发出酸奶，那证明这是活菌，如果发不出来，那说明是死菌。
这么简单的方法是不是透露着让人欣喜若狂的神奇？
误区5 不即冲即服
这一点其实也好理解，但也很容易被大家忽略。
毕竟我们和益生菌所处的生存条件是不一样的，所以也体会不到那种厌氧菌被暴露在氧气中的绝望。
但事实上，你把益生菌的包装拆开的那一刻起，就好比一个人被掐住了脖颈子，什么时候益生菌进了无氧的肠道内，这只手才能松开。
你就想想吧，要是换做是你，你能坚持多长时间？
所以啊，在服用益生菌的时候，尽量开了袋后立马温水冲服，开袋即食。
如果一时半会儿还来不及就吃，那就别着急打开包装。
不然暴露在空气中的时间越长，益生菌死亡的就越多，效果就越差。
误区6
和抗生素同服
大家对抗生素可以说是很了解了，但是我打赌，益生菌和抗生素相生相克的关系大家可能并不是很了解。
毕竟，在大家看来，不管是抗生素还是益生菌，都是为了帮助孩子恢复健康的“药物”。
因此，不少人在给孩子喂抗生素的时候顺道就把益生菌就喂了。
如果我说这么做是不对的，大家第一反应可能是：咋了？这俩药会起反应啊？
给你们科普一下，抗生素的主要功能，并不是咱们老百姓常说的所谓“消炎”，官方的说法是杀灭细菌。
在这个功能下，抗生素又被赋予了“盲人杀手”的称号。
也就是说，只要是细菌，不管你是有害菌，还是益生菌，统统杀灭。
所以，益生菌和抗生素同服，其意义等同于“猫鼠同笼”。
一来一回，净白折腾了。
所以建议大家，如果孩子需要吃益生菌和抗生素，那两者之间至少间隔2小时，以便最大限度地减少抗生素对益生菌效果的影响。
以上是关于益生菌知识的简单分享。大家有任何意见或疑问都可以在评论区里给我留言。
下面是我总结的知识点。
好记，不多。
拿走，不谢。
1.益生菌是对于人体肠道来说，只有益而无害的活菌。
2.益生菌不是“万能药”，它的作用是恢复肠道菌群平衡，只能雪中送炭，不能锦上添花。
3.补充益生菌要有针对性，最好是根据肠道菌群检测的结果遵医嘱合理补充。
4.服用时要遵医嘱，不要擅自减量。
5.要现冲现服，益生菌暴露在有氧环境中的时间越长，效果越差。
6.服用益生菌和抗生素时，两者之间最好间隔2个小时，避免“猫鼠同笼”问题。
益生菌是什么？
所谓的知识误区都是因为了解的不透彻导致的。
所以，在开始讲误区之前，我决定先简单给大家介绍一下益生菌是什么。
益生菌，是细菌的一类，而细菌就是咱们生活中无处不在的、肉眼看不见的微生物。
再往狭义了讲，我们所说的益生菌指的是：对于人体肠道来说，只有益而无害的活菌。
肠道中有数不清的细菌，一共能分3大类：
有害菌、益生菌（有益菌）以及中性菌。
益生菌和有害菌相互制约，维持着肠道菌群的平衡。
如果因为内在或外在原因导致益生菌减少，打破了这种相互制约的平衡，那么益生菌的保护作用被削弱，有害菌过度滋生，这么一来，人就会生病。
大家打个比方：
你的肠道好比是一座城，益生菌就是这座城里的“警察”，主要作用就是保护这座城的安全稳定，而有害菌就是“坏人”，中性菌就是“居民”，一些吃瓜群众。
正常情况下，因为有足够数量的“警察”在，“坏人”会有所收敛。但是如果因为各种原因让城里原本的“警察”都消失了，那么“坏人”就会猖獗，破坏你的城，破坏肠道内原有的菌群平衡。
当这种破坏达到一定程度时，人就会生病。
好，知道了益生菌大致是怎么回事儿以后，再说说益生菌的生存需要什么特定的条件。
首先，是厌氧环境。
直接点说，就是没有氧气的环境。益生菌只有在无氧的环境下才能茁壮成长，如果接触到氧气，益生菌就会死亡。
当然，对于咱们人类来说，是不太能理解这种特殊需求的。
给大家打个比方，给益生菌接触到了氧气，就好比你被人掐住了脖颈子，你有多难受它就有多难受。
其次，是纤维素。
直接点说，就是益生菌的食物。民以食为天，益生菌也是，即便有了无氧的环境，没有食物照样得死的死蔫儿的蔫儿。
好了，关于益生菌的一些简单介绍就到这里了。
好，接下来大家说说关于补充益生菌，大家都容易陷入什么样的误区。
误区1
益生菌能“治百病”
一个新兴的概念出现时，很容易掀起一阵追捧的热潮。
因为大家对它不是很了解，碎片化的信息很容易拼接出一个被“神化”过的形象。
益生菌算是近几年被“神化”的典型代表。
叔可忍婶儿都不能忍。
消化不良，胃口差，便秘，腹泻，但凡和消化系统沾边儿的，都觉得要吃点益生菌。
甚至不少人认为，虽然孩子现在没生病，但是补点益生菌可以让身体变得更好。
简单来说，有病治病，没病强身啊。
但上面也提到了，城里原本的“警察”（益生菌）要是少了，“坏人”就会猖獗，你只能通过从外界借调“警察”来恢复原先的平衡，它们的职责和功能仅在于此。
你不可能让“警察”去干建筑工人的活儿，指望它们能把你的小瓦房翻成大别墅。
益生菌没那么大的本事，别为难它们。
它只能调节肠道菌群，让其恢复到平衡状态。
只能雪中送炭，不能锦上添花。
误区2
自行随意补充
好，既然益生菌不能强身健体，那孩子肠道平衡被打破了，这个时候补充总没错吧？
所以，大家又陷入另一个误区，那就是觉得腹泻、便秘或等等其他情况，只要吃了益生菌，就一定能起到调节作用。
事实上，这样随意自行补充收效甚微。
因为益生菌是一个总称，它里面还有各种分类，比较常见的有双歧杆菌、乳酸杆菌等。
要通过肠道菌群检测来确定你体内到底是少了哪一种或哪几种益生菌。
缺什么补什么，这才是硬道理。
如果体内缺乏的是双歧杆菌，你补乳酸杆菌就起不到很好的作用。
还是那个比方，就算是“警察”，也有各自的分工，有专门负责出去抓“坏人”的，还有负责内勤的。
你让一个负责内勤的“警察”去抓“坏人”，完了还怪人家没用。人家也很委屈啊。
所以说，补益生菌最好是在做了肠道菌群检测之后在医生的指导下合理补充。
误区3
孩子还小要减量
咱们做家长的都有一个惯性思维：
孩子就是“S”号的成人。
这点在用药上表现的尤为显著。
给孩子补充益生菌的时候，说明书上让一次吃一袋，咱们一想，孩子还小，少吃点吧，一次吃四分之三，或者干脆吃半袋好了。
这么吃，可以说是很没有效果了。
因为人体内的细菌虽然体积微小但是数量是你难以想象的庞大，所以不能用咱们平时用的数量级去衡量它们。
益生菌通常都是以“亿”为单位来衡量的，对于孩子来说，每次吃50~150亿个益生菌是最合适的。
以100亿为例，如果人为减半了，那就直接少了50个亿。
50个亿啊！
误区4
死菌活菌都一样
大家都知道应该补充益生菌，但也有不少人觉得，我哪儿知道什么死菌活菌，只要是益生菌不就行了吗？
从概念上出发，益生菌必须是活菌，也就是说它得在有活性的情况下才能起到作用。
如果补充的是死菌，除了费钱以外，基本没其他作用了。
这个也很好理解。
就好比，你费尽千辛万苦借来了“警察”，但发现这些“警察”跟橱窗里的模特似的，光杵着不能动弹，那要它们干嘛？
当然，大家也会说，道理我都懂，问题是我又没有火眼金睛，我哪知道它是活的还是死的？
在这里告诉大家一个很简单的判断方法。
那就是拿你买的益生菌加鲜牛奶发酸奶。
在无客观主观因素影响下，如果能发出酸奶，那证明这是活菌，如果发不出来，那说明是死菌。
这么简单的方法是不是透露着让人欣喜若狂的神奇？
误区5 不即冲即服
这一点其实也好理解，但也很容易被大家忽略。
毕竟我们和益生菌所处的生存条件是不一样的，所以也体会不到那种厌氧菌被暴露在氧气中的绝望。
但事实上，你把益生菌的包装拆开的那一刻起，就好比一个人被掐住了脖颈子，什么时候益生菌进了无氧的肠道内，这只手才能松开。
你就想想吧，要是换做是你，你能坚持多长时间？
所以啊，在服用益生菌的时候，尽量开了袋后立马温水冲服，开袋即食。
如果一时半会儿还来不及就吃，那就别着急打开包装。
不然暴露在空气中的时间越长，益生菌死亡的就越多，效果就越差。
误区6
和抗生素同服
大家对抗生素可以说是很了解了，但是我打赌，益生菌和抗生素相生相克的关系大家可能并不是很了解。
毕竟，在大家看来，不管是抗生素还是益生菌，都是为了帮助孩子恢复健康的“药物”。
因此，不少人在给孩子喂抗生素的时候顺道就把益生菌就喂了。
如果我说这么做是不对的，大家第一反应可能是：咋了？这俩药会起反应啊？
给你们科普一下，抗生素的主要功能，并不是咱们老百姓常说的所谓“消炎”，官方的说法是杀灭细菌。
在这个功能下，抗生素又被赋予了“盲人杀手”的称号。
也就是说，只要是细菌，不管你是有害菌，还是益生菌，统统杀灭。
所以，益生菌和抗生素同服，其意义等同于“猫鼠同笼”。
一来一回，净白折腾了。
所以建议大家，如果孩子需要吃益生菌和抗生素，那两者之间至少间隔2小时，以便最大限度地减少抗生素对益生菌效果的影响。
以上是关于益生菌知识的简单分享。大家有任何意见或疑问都可以在评论区里给我留言。
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好记，不多。
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1.益生菌是对于人体肠道来说，只有益而无害的活菌。
2.益生菌不是“万能药”，它的作用是恢复肠道菌群平衡，只能雪中送炭，不能锦上添花。
3.补充益生菌要有针对性，最好是根据肠道菌群检测的结果遵医嘱合理补充。
4.服用时要遵医嘱，不要擅自减量。
5.要现冲现服，益生菌暴露在有氧环境中的时间越长，效果越差。
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☆☆测评项目：佛山皮肤管理
☆☆投稿内容
偏日式的装修简洁明亮，让人觉得很干净，全程下来也让人感觉非常舒心又温柔，我做的是日式精致小颜控，专门为敏感肌设计的低刺激护理项目，用的产品都是院线的，用最专业的仪器进行脸部清理，最娴熟的手法进行按摩，让肌肤深度清理。
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精致小颜抗衰
百分之99的网红都会选择我们家这个项目
日本宙斯仪器不仅有提升紧致打造小v脸的效果 而且还用石膏面膜帮你做面部定型 补充胶原蛋白。像你的皮肤状态 如果一个月坚持做3-4次就相当于做一次热玛吉的效果
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整个过程70分钟，真正做到了高端护理，高级且舒适，店内还有洗发头皮护理跟按摩，下次都会来都试一下，做完以后真的是肉眼可见的白皙透亮，毛孔也变小，皮肤就像剥了壳的鸡蛋一样，素颜出门都无压力，只有选择了对的护理方式才会越来越好！
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店内还能换装拍照哦，店内装修也很好出片，做完护理拍上几张美照，一天的好心情就从这里开始～
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细胞无菌检测
无菌检测 sterility testing----利用方法对细胞中细菌、真菌、支原体和病毒检验的过程。包括是否有污染及确定具体污染
一、一般要求
应根据细胞来源、潜在污染暴露史、细胞预期应用目的及所处环境等方面对细胞进行风险评估。考虑的因素包括但不限于以下几个方面:
a)应考虑细胞样本源。来自不同物种的细胞很可能携带潜在的微生物;
b) 应根据细胞的使用目的进行相关污染检测;
c)考虑细备和细胞培养的全周期所处的环境因素。根据暴露史评估可能的污染，如用于培养细胞的动物血清可能被特定的微生物污染。
依据风险评估判可能性最大的微生物污染类型，评估现有检验方法的话用性为待检测样本选择合适的方法。
二、方法选择
1.总体要求
在选择检测方法时,应了解该方法原理、微生物类型以及灵敏度等。
选择检测方法应依据预期目的、样本特性和处理因素。
选择的方法应经过验证或确认。
2.细菌和真菌
细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米，其形状多样，如球状、杆状和螺旋状等。由于分布广泛、生长迅速和体积大小等特点，细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。
细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到；受感染的培养物通常会变得浑浊，有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。在低倍显微镜下，细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的293细胞被大肠杆菌污染。
(1)依据需要选择适用干细菌和真菌的检测方法,如直接镜检法、膜过滤法、直接接种法、PCR法、MNP标记法、飞行时间质谱等。
(2)初步判断是否有细菌或真菌污染物,宜采用直接镜检法。
(3)若试验样品性质如可行，应首先选择膜过滤法进行检测。
(4)直接接种法对干细胞培养体系中添加抗生素的样品应考虑抗生素对细菌和直菌的抑制效应而影响检测的敏感性。
(5)利用PCR的方法检测细菌16SrRNA高保守区的序列来判断是否有细菌污染。利用PCR的方法检测细菌16SrRNA可变区的序列和MNP标记序列分析污染细菌的种属，利用MNPITS1或ITS2等序列判断感染真菌的种属。
(6)对微生物的组分进行检测可采用飞行时间质谱法等。
3.病毒
病毒是一种微小的感染性病原体，利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小， 难以在培养中被检测到，也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数 病毒对宿主有非常严格的要求，因此，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁， 尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞时。要检测细胞培养物是否被病毒感染，可以使用电子显微镜观察、用抗体组合进行免疫染色、ELISA检测或是使用合适 的病毒引物进行PCR扩增。
(1)依据需要选择适用干病毒检测的方法,如直接镜检法、细胞形态观察及血吸附试验、体外不同细胞接种法、动物检查法、鸡胚接种检查法、PCR法、高通最测序法、基因片技术、荧光免疫法、酶联免疫法和血细胞凝集试验等方法。
(2)可利用光学显微镜观察病毒感染导致的细胞病变合胞体的形成:可通过电子显微镜观察大小和形态来识别病毒;可通过免疫电镜技术识别病毒。
(3)取细胞培养物的上清液或细胞培养物的裂解物，接种已知未污染病毒的相应细胞，检测是否出现细胞病变,或采用血细胞的吸附现象检测待检细胞培养物是否污染病毒。
(4)若采用动物检查法,可通过对普通动物或者含有特定病原体的动物，如小(包括乳鼠和成鼠)
豚鼠、仓鼠、家兔和非人灵长类动物等进行颅内、腹腔、鼻腔和皮下等部位接种,判断是否有病毒感染。
(5)分离黏液病毒、疱疹病毒和痘病毒宜采用鸡胚接种检查法。鸡胚应来自无特定病原(SPF)鸡群。
(6)采用PCR法检测病毒核酸高保守区的序列来判新是否有病毒污染。
(7)可采用高通量测序法鉴定病毒特异性序列。
(8)采用基因芯片技术检测病毒，需要合成与潜在污染的病毒基因组上的特定区域互补的核酸探针。
(9)用病毒抗原特异的抗体，通过荧光免疫反应用荧光显微镜检测细胞内病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(10)运用病毒抗原特异的抗体，通过酶联免疫反应检测细胞内或者上清液中的病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(11)通过凝集血细胞检测上清液中的病毒颗粒，如用鸡红细胞检测流感病毒。
4.支原体
支原体是无细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于支原体非常小（ 通常小于1 µm），因此很难被检测到，除非它们达到了极高的密度，导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可在培养物中持续存活，而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养体系中宿主细胞的行为和代谢。
(1)依据需要选择适用于支原体检测的方法，如培养法、指示细胞培养DNA染色法、PCR法、荧光原位杂交法、腺苷磷酸化酶活性检测法等方法。
(2)若对支原体检测结果报告时间没有急切要求的,宜选择培养法进行检测。
(3)利用DNA热色法,经荧光显微镜下观察看到有附着在细胞表面的大小不等，不规则的荧光着色颗粒则表明存在支原体污染。
(4)通过PCR法检测支原体16SrRNA序列保守区特异性序列来判定是否存在支原体。
(5)利用带光原位杂交法检测支原体,需要设计与支原体rRNA的高度保守区域互补的蒙光探针。
(6)腺苷磷酸化酶活性检测法不适用于本身腺苷磷酸化酶活性高的细胞。
5.过程控制
样品
(1)应根据所选方法,确定足够量的供试样品。
(2)应根据供试样品可能的稳定性考虑其储存条件。
(3)应实行严格微生物规范操作，避免取样讨程中微生物污染。
试剂材料和仪器设备用具
(1)应考虑设备、试剂和耗材对微生物检测的影响。
(2)检测过程中应使用标准物质。
(3)应根据样品尺寸选择适宜的容器，避免蒸发、确保无微生物、无毒、无浸出。
(4)应配备与微生物检测能力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和准确度应符合检测要求。
(5)检测所用试剂应贮存在适的环境中，以确保试剂的稳定性。
(6)用于微生物检测的溶液、稀释剂或冲洗剂以及所使用的耗材若是作为微生物检测测试样品的成分，则不应具有抗微生物活性的特性。
操作
(1)待测样品的收集操作应确保无污染引人。
(2)应依据微生物的最佳生长条件和营养需求选择专门的分离方法进行检测。
(3)应根据微生物的生长速度,以获得足够数量的生物体。
(4)应考虑某些微生物种类和真菌是否形成孢子。
(5)应考虑细胞培养过程中受支原体污染时，支原体可能黏附在细胞膜上仅以最低水平浓度存在于培养上清液中。
#第三方检测机构##细胞无菌检测#
无菌检测 sterility testing----利用方法对细胞中细菌、真菌、支原体和病毒检验的过程。包括是否有污染及确定具体污染
一、一般要求
应根据细胞来源、潜在污染暴露史、细胞预期应用目的及所处环境等方面对细胞进行风险评估。考虑的因素包括但不限于以下几个方面:
a)应考虑细胞样本源。来自不同物种的细胞很可能携带潜在的微生物;
b) 应根据细胞的使用目的进行相关污染检测;
c)考虑细备和细胞培养的全周期所处的环境因素。根据暴露史评估可能的污染，如用于培养细胞的动物血清可能被特定的微生物污染。
依据风险评估判可能性最大的微生物污染类型，评估现有检验方法的话用性为待检测样本选择合适的方法。
二、方法选择
1.总体要求
在选择检测方法时,应了解该方法原理、微生物类型以及灵敏度等。
选择检测方法应依据预期目的、样本特性和处理因素。
选择的方法应经过验证或确认。
2.细菌和真菌
细菌是一大类普遍存在的单细胞微生物。细菌的直径通常只有几微米，其形状多样，如球状、杆状和螺旋状等。由于分布广泛、生长迅速和体积大小等特点，细菌以及酵母和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。
细菌污染在培养物感染后几天内就很容易被肉眼观察到；受感染的培养物通常会变得浑浊，有时表面会有一层薄膜。经常还会出现培养基的pH值突然下降的情况。在低倍显微镜下，细菌以细小颗粒的形式出现在细胞之间，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。下面的模拟图像显示了贴壁培养的293细胞被大肠杆菌污染。
(1)依据需要选择适用干细菌和真菌的检测方法,如直接镜检法、膜过滤法、直接接种法、PCR法、MNP标记法、飞行时间质谱等。
(2)初步判断是否有细菌或真菌污染物,宜采用直接镜检法。
(3)若试验样品性质如可行，应首先选择膜过滤法进行检测。
(4)直接接种法对干细胞培养体系中添加抗生素的样品应考虑抗生素对细菌和直菌的抑制效应而影响检测的敏感性。
(5)利用PCR的方法检测细菌16SrRNA高保守区的序列来判断是否有细菌污染。利用PCR的方法检测细菌16SrRNA可变区的序列和MNP标记序列分析污染细菌的种属，利用MNPITS1或ITS2等序列判断感染真菌的种属。
(6)对微生物的组分进行检测可采用飞行时间质谱法等。
3.病毒
病毒是一种微小的感染性病原体，利用宿主细胞的结构进行繁殖。它们的体积极小， 难以在培养中被检测到，也难以从细胞培养实验室使用的试剂中去除。由于大多数 病毒对宿主有非常严格的要求，因此，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养物产生不良影响。但被病毒感染的细胞培养物会对实验室人员造成严重的健康威胁， 尤其是当实验室培养的是人类或灵长类的细胞时。要检测细胞培养物是否被病毒感染，可以使用电子显微镜观察、用抗体组合进行免疫染色、ELISA检测或是使用合适 的病毒引物进行PCR扩增。
(1)依据需要选择适用干病毒检测的方法,如直接镜检法、细胞形态观察及血吸附试验、体外不同细胞接种法、动物检查法、鸡胚接种检查法、PCR法、高通最测序法、基因片技术、荧光免疫法、酶联免疫法和血细胞凝集试验等方法。
(2)可利用光学显微镜观察病毒感染导致的细胞病变合胞体的形成:可通过电子显微镜观察大小和形态来识别病毒;可通过免疫电镜技术识别病毒。
(3)取细胞培养物的上清液或细胞培养物的裂解物，接种已知未污染病毒的相应细胞，检测是否出现细胞病变,或采用血细胞的吸附现象检测待检细胞培养物是否污染病毒。
(4)若采用动物检查法,可通过对普通动物或者含有特定病原体的动物，如小(包括乳鼠和成鼠)
豚鼠、仓鼠、家兔和非人灵长类动物等进行颅内、腹腔、鼻腔和皮下等部位接种,判断是否有病毒感染。
(5)分离黏液病毒、疱疹病毒和痘病毒宜采用鸡胚接种检查法。鸡胚应来自无特定病原(SPF)鸡群。
(6)采用PCR法检测病毒核酸高保守区的序列来判新是否有病毒污染。
(7)可采用高通量测序法鉴定病毒特异性序列。
(8)采用基因芯片技术检测病毒，需要合成与潜在污染的病毒基因组上的特定区域互补的核酸探针。
(9)用病毒抗原特异的抗体，通过荧光免疫反应用荧光显微镜检测细胞内病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(10)运用病毒抗原特异的抗体，通过酶联免疫反应检测细胞内或者上清液中的病毒蛋白来判断特定的病毒污染。
(11)通过凝集血细胞检测上清液中的病毒颗粒，如用鸡红细胞检测流感病毒。
4.支原体
支原体是无细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于支原体非常小（ 通常小于1 µm），因此很难被检测到，除非它们达到了极高的密度，导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可在培养物中持续存活，而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养体系中宿主细胞的行为和代谢。
(1)依据需要选择适用于支原体检测的方法，如培养法、指示细胞培养DNA染色法、PCR法、荧光原位杂交法、腺苷磷酸化酶活性检测法等方法。
(2)若对支原体检测结果报告时间没有急切要求的,宜选择培养法进行检测。
(3)利用DNA热色法,经荧光显微镜下观察看到有附着在细胞表面的大小不等，不规则的荧光着色颗粒则表明存在支原体污染。
(4)通过PCR法检测支原体16SrRNA序列保守区特异性序列来判定是否存在支原体。
(5)利用带光原位杂交法检测支原体,需要设计与支原体rRNA的高度保守区域互补的蒙光探针。
(6)腺苷磷酸化酶活性检测法不适用于本身腺苷磷酸化酶活性高的细胞。
5.过程控制
样品
(1)应根据所选方法,确定足够量的供试样品。
(2)应根据供试样品可能的稳定性考虑其储存条件。
(3)应实行严格微生物规范操作，避免取样讨程中微生物污染。
试剂材料和仪器设备用具
(1)应考虑设备、试剂和耗材对微生物检测的影响。
(2)检测过程中应使用标准物质。
(3)应根据样品尺寸选择适宜的容器，避免蒸发、确保无微生物、无毒、无浸出。
(4)应配备与微生物检测能力和工作量相适应的仪器设备，其类型、测量范围和准确度应符合检测要求。
(5)检测所用试剂应贮存在适的环境中，以确保试剂的稳定性。
(6)用于微生物检测的溶液、稀释剂或冲洗剂以及所使用的耗材若是作为微生物检测测试样品的成分，则不应具有抗微生物活性的特性。
操作
(1)待测样品的收集操作应确保无污染引人。
(2)应依据微生物的最佳生长条件和营养需求选择专门的分离方法进行检测。
(3)应根据微生物的生长速度,以获得足够数量的生物体。
(4)应考虑某些微生物种类和真菌是否形成孢子。
(5)应考虑细胞培养过程中受支原体污染时，支原体可能黏附在细胞膜上仅以最低水平浓度存在于培养上清液中。
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