记小姚第一次独自眼球提蛋白:我以为提取蛋白非常简单,就如protocol里面写的那样。但是操作的时候还是手忙脚乱。能感受到双钟效应的力量,一个师兄说六只眼睛有100到150微升的ripa裂解液而另一个师兄说,用500,这时候我该相信谁呢,于是我想到浓度高了可以稀释,但浓度低了就没有用了,所以我首先还是用150u。但是在超声机超声后,发现最终样品的量非常少,而且看起来浓度很高,因为视网膜的视网膜是具有黑色素的,那么,整个管子看起来就是全黑的像芝麻糊一样,所以我担心最后取到的上清很少,于是又加了200u的裂解液,峰回路转没想到最后得到的样品沉淀非常的少而上清非常多,此时我又担心会不会过于浓度过于低了,所以之后需要用BCA kit来检测蛋白浓度。
这中间还发生了很多的小插曲和问题。
1、我在分离组织的时候,这时候的室温是20多度,有可能会影响提取蛋白的结果,所以我认为在解剖的时候应该在玻璃皿下再放一个玻璃皿中间放冰,这样可以维持解剖时的温度。
2、裂解液的量要通过B CA检测法的浓度来判定,但是这一次算是正式实验摸浓度的过程,其实应该由废鼠来进行
3、到最后来看,超声的效果还不错,所以其实可以不用研磨棒,但是在超声的时候,遇到了一个问题,就是可能位置放的不对或者液体量太大,我在超声的时候明显看到有一部分的液体被震出来了,也就是说损失了一部分的蛋白那这时候应该怎么办,应该减少超声时的液体量吗?
4、幸好四度离心机有一个师兄已经使用过了,所以它的温度当时是在11摄氏度,降到四度的时间并没有很长,如果没有人使用,降到四度,我估计要等待半小时,这样也会影响我实验的进程,所以应该提前准备好4度离心机。
5、最后在离心完之后,上清还是能发现有一些黑色漂浮物,因为我们的组织他分层比较明显,而且组织的质量很轻,所以会有这样的絮状物这个絮状物,他不会影响跑蛋白的结果,但是肯定会影响B C OA检测蛋白浓度的结果,所以要再次离心。
折腾了三个半小时,终于提到了蛋白我的工作效率好低,是第一次,但是在做之前还是做了充足的理论准备,做起来手忙脚乱,很多机器用的也不顺手,尤其是离心机的转速,机器的单位不同,我就看不明白了。而且从一个从病理室到分子室再到细胞房这中间的走动那么多次我是没有预料到的,而且没有提前问师兄拿PMSF,还借了姐妹的试剂。
这中间还发生了很多的小插曲和问题。
1、我在分离组织的时候,这时候的室温是20多度,有可能会影响提取蛋白的结果,所以我认为在解剖的时候应该在玻璃皿下再放一个玻璃皿中间放冰,这样可以维持解剖时的温度。
2、裂解液的量要通过B CA检测法的浓度来判定,但是这一次算是正式实验摸浓度的过程,其实应该由废鼠来进行
3、到最后来看,超声的效果还不错,所以其实可以不用研磨棒,但是在超声的时候,遇到了一个问题,就是可能位置放的不对或者液体量太大,我在超声的时候明显看到有一部分的液体被震出来了,也就是说损失了一部分的蛋白那这时候应该怎么办,应该减少超声时的液体量吗?
4、幸好四度离心机有一个师兄已经使用过了,所以它的温度当时是在11摄氏度,降到四度的时间并没有很长,如果没有人使用,降到四度,我估计要等待半小时,这样也会影响我实验的进程,所以应该提前准备好4度离心机。
5、最后在离心完之后,上清还是能发现有一些黑色漂浮物,因为我们的组织他分层比较明显,而且组织的质量很轻,所以会有这样的絮状物这个絮状物,他不会影响跑蛋白的结果,但是肯定会影响B C OA检测蛋白浓度的结果,所以要再次离心。
折腾了三个半小时,终于提到了蛋白我的工作效率好低,是第一次,但是在做之前还是做了充足的理论准备,做起来手忙脚乱,很多机器用的也不顺手,尤其是离心机的转速,机器的单位不同,我就看不明白了。而且从一个从病理室到分子室再到细胞房这中间的走动那么多次我是没有预料到的,而且没有提前问师兄拿PMSF,还借了姐妹的试剂。
“不知道什么是真正的辛苦 不知道什么是持续努力 不是因为喜欢想要变好呆在这里”
今天正式提交了离职oa 问66 你究竟在为了怎样的愿景而奋斗 她说能看到大家穿着自己做的衣服就很幸福了 对我来说是肤浅且令人失望的回答 快消的衣服难道不是用后即抛的消费品吗 意义真的存在于这样世俗且易逝的东西中吗
又问比我忙得多的熊 被反问意义真的有意义吗 我又问他那你又为了什么忙成这个样子 于是又回到了 或许我们已经成为了一种惯性 每天忙来忙去只是为了获得一张入场券 好大学好工作 最后发现除了这张入场券外什么都没获得 或许能有两者兼得的方法吗
今天正式提交了离职oa 问66 你究竟在为了怎样的愿景而奋斗 她说能看到大家穿着自己做的衣服就很幸福了 对我来说是肤浅且令人失望的回答 快消的衣服难道不是用后即抛的消费品吗 意义真的存在于这样世俗且易逝的东西中吗
又问比我忙得多的熊 被反问意义真的有意义吗 我又问他那你又为了什么忙成这个样子 于是又回到了 或许我们已经成为了一种惯性 每天忙来忙去只是为了获得一张入场券 好大学好工作 最后发现除了这张入场券外什么都没获得 或许能有两者兼得的方法吗
2020.06.28~2022.09.23
人生的第一份工作,两年三个月,在今天告别了!这两年从化妆品小白到现在能够独立完成项目,真的学到了很多很多,我想,如果没有其他考量,我应该会在化妆品行业一直做下去吧……
步入社会的第一步,很幸运,我没有遇到什么职场的阴暗面,相反,周围都是很好很好的同事,他们会在工作上指点我,甚至周末我们会一起去探店,我们Team永远不缺笑声,每天都能发现有意思的点,助理姐姐们总是会帮我干体力活。今天告别的时候,才发现销售们都很喜欢我,会给我送离别礼物,会特意跑过来见我最后一面,会在OA上祝福我,会鼓励我说“和你接触的这段时间,你真的很好”,我们Team的小伙伴还会偷偷给我送惊喜,真的是人生第一次收到,一切都太感动了,以至于不舍的情绪一步步在增加....
感恩在公司遇到的一切,以后大家都会越来越好的!!!
人生的第一份工作,两年三个月,在今天告别了!这两年从化妆品小白到现在能够独立完成项目,真的学到了很多很多,我想,如果没有其他考量,我应该会在化妆品行业一直做下去吧……
步入社会的第一步,很幸运,我没有遇到什么职场的阴暗面,相反,周围都是很好很好的同事,他们会在工作上指点我,甚至周末我们会一起去探店,我们Team永远不缺笑声,每天都能发现有意思的点,助理姐姐们总是会帮我干体力活。今天告别的时候,才发现销售们都很喜欢我,会给我送离别礼物,会特意跑过来见我最后一面,会在OA上祝福我,会鼓励我说“和你接触的这段时间,你真的很好”,我们Team的小伙伴还会偷偷给我送惊喜,真的是人生第一次收到,一切都太感动了,以至于不舍的情绪一步步在增加....
感恩在公司遇到的一切,以后大家都会越来越好的!!!
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