【类克隆:鸡体细胞可复原为活禽】自1997年“多莉”克隆羊问世以来,已经有20多种哺乳动物相继实现了体细胞克隆的无性繁殖。然而,由于特殊的卵生生殖模式,体细胞克隆方法无法在禽类动物中使用,因此禽类动物的保种、挽救、濒危复原和生物工程育种等工作遇到了瓶颈,且一直未被突破。

5月20日,《自然—通讯》杂志在线发表了扬州大学动物科学与技术学院教授李碧春和陈国宏研究团队的最新研究文章https://t.cn/A6VCX48Q。该文章介绍了将鸡体细胞(成纤维细胞)逆转为原始生殖细胞繁殖后代的理论研究和方法体系。

【破解禽类动物体细胞克隆难题】

文章共同通讯作者陈国宏告诉《中国科学报》,哺乳动物体细胞克隆技术的原理是将重编程的体细胞移植到去核的卵母细胞中,形成重构胚胎,然后移植入代孕母体中继续发育,产生出克隆动物,例如克隆羊“多莉”。

“但这一技术无法在禽类动物上实施。”文章共同通讯作者李碧春说。主要原因是,“由于禽类受精卵(蛋)排出时已经发育到具有大量细胞的晚期囊胚阶段,且和卵黄密切相连吸取营养。”

图1:隐性白羽白洛克鸡(代孕鸡)及其生产的狼山鸡体细胞“克隆”后代。扬州大学供图
图2:狼山鸡体细胞“克隆”后代中出现羽色表型相似的个体。扬州大学供图

团队成员左其生介绍,禽蛋中除了卵母细胞(未受精卵)、或早期胚胎(受精卵)外,还含有大量胚胎发育需要的营养物质(卵黄);加之,禽类卵母细胞的核大且只被薄薄的一层细胞质包裹,这使得去除和移入细胞核这个过程很难实施。

如果沿用哺乳动物体细胞核移植方式,将重构胚胎植入鸡蛋中,就相当于把已经“着床”在子宫里的胚胎去掉,再换上重构胚胎继续发育。

“这个过程目前在卵生动物上不可能实现。”文章作者张亚妮说,“这就使得禽类动物的克隆遇到了难以逾越的问题,这一瓶颈阻碍了禽类遗传学、发育生物学和家禽业生物工程育种、种质资源保存与濒危禽类恢复,以及遗传分子机制等领域的研究工作进展。”

目前我国拥有非常丰富的畜禽品种资源。陈国宏说,做好畜禽品种资源的保护是将来优良性状利用和生物工程育种的基础,挖掘和建立合适的保种体系就显得尤为必要。

在哺乳动物中,无论是体细胞克隆技术,还是配子和胚胎冻存技术都可以有效的保护当下的品种资源。“但是在禽类动物上,这些方法并不完全适用,因此需要开辟新的方法。”李碧春说。

“我们的研究利用了鸡原始生殖细胞随血液迁移的特点,首先将供体细胞,即成纤维细胞,在体外转分化为原始生殖细胞,再异体移植到受体中,使其借用受体性腺的环境发育成精子或卵子,待受体鸡性成熟后相互交配,产生来源于供体鸡的后代。由于与哺乳动物体细胞克隆有不同之处,因此我们称其为类克隆鸡”。

“类克隆鸡的产生,不仅能为禽类动物的种质资源保护和濒危禽类的恢复提供一种新方法,而且为未来禽类动物的生物工程育种、性状遗传机制解析等基础研究工作提供新途径。”陈国宏说。

【实现体细胞高效逆转为原始生殖细胞】

2010年该团队就启动了类克隆鸡的研究工作。随着对鸡原始生殖细胞生物特性研究的不断深入,他们发现,鸡原始生殖细胞可作为工具细胞进行类克隆鸡的生产,但遇到了如何大量获取原始生殖细胞的难题。

虽然在哺乳动物中已经建立了高效的体外诱导原始生殖细胞的方法体系,但在禽类动物上该方法体系尚未建立。

左其生介绍,该团队前期已建立了原始生殖细胞迁移归巢并生产后代鸡的模型,为鸡的种质资源保护和恢复提供了新思路。

但由于分离鸡体内来源的原始生殖细胞数量少,且需以牺牲早期胚胎为代价,因此该团队一直探寻能够获得大量原始生殖细胞的方法体系。

该团队先建立了胚胎干细胞体外诱导分化为原始生殖细胞的体系,但胚胎干细胞也不容易获得。“体细胞重编程技术给我们的研究提供了一种很好的思路,体细胞经过重编程能够形成与胚胎干细胞类似的有分化潜能的诱导性多能干细胞,且体细胞的分离和冷冻技术相对容易,能够在短时间内大量获取,对个体也不会造成较大伤害。”左其生说。

因此,他们选择鸡成纤维细胞,先将其重编程为诱导性多能干细胞,再进一步诱导分化为原始生殖细胞,这样就可以极大地解决原始生殖细胞无法大量获得且分离培养困难的难题。

经过10多年的探索攻关,该团队将我国黑羽狼山鸡的体细胞逆转成原始生殖细胞,并移植到隐性白羽白洛克受体鸡(代孕鸡)体内,产出了来源于供体黑羽狼山鸡的后代。

【体细胞复原为活禽成为现实】

“该技术是一项全新的将体细胞复原为活体的方法,是一次改变禽类生物工程育种和种质资源保护传统规则的创新,对家禽产业发展具有重要的实践意义。”一位文章评审专家点评称。

“该项研究可利用鸡的体细胞生产后代,这一技术成为生产克隆鸡的游戏规则改变者,对鸡肉研究领域非常有用。”另一位评审专家评价说。

经过探索,李碧春和陈国宏研究团队还系统解析了鸡体细胞重编程和原始生殖细胞发生的调控机制,建立了高效的体细胞重编程、诱导多能性干细胞分化为原始生殖细胞、以及原始生殖细胞异体移植的方法体系。

“将这三项技术结合使用,成功地实现了将体细胞复原为活禽。这项工作突破了禽类遗传工程操作困难的瓶颈,为禽类动物的保护和濒危品种的复原提供了理论依据和技术支持。将来结合基因编辑技术,可有效地获得基因修饰后代,加快禽类动物的生物工程育种进程。” 李碧春介绍。

目前,该团队还建立了快速而有效的鸡皮肤组织冷冻保存的技术体系,且能从解冻复苏后的皮肤组织中获得细胞并将其诱导成为原始生殖细胞,为禽类动物种质资源长期保存提供了技术支撑。https://t.cn/A6VCX48T

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立金推荐阅读-关于《商业银行负债质量管理办法 (征求意见稿)》的政策解读
近日,银保监会发布《商业银行负债质量管理办法(征求意见稿)》(下文简称《办法》),对银行负债管理提出如下要求:
一是强化核心要素管理。在传统的流动性、安全性和盈利性三性经营原则外,对负债质量管理特别提出“六性”要求,即负债来源的稳定性、负债结构的多样性、负债与资产匹配的合理性、负债获取的主动性、负债成本的适当性及负债项目的真实性,这契合当前负债利率市场化加快、负债结构的多样性趋势等特点,指明了负债质量管理的核心要素。
二是强化合规经营。进一步明确商业银行不得采取违规返利吸存、通过第三方中介吸存、延迟支付吸存、以贷转存吸存、提前支取靠档计息等违规手段吸收和虚增存款,而商业银行通过互联网吸收存款的,应当遵守相关监管规定。
三是强化差异化监督管理。《办法》强化了负债质量相关监督检查和监管措施,明确商业银行向监管部门报告负债质量管理情况的要求及负债质量监管评价结果运用的范围等。同时,考虑到我国商业银行种类众多,规模和负债基础存在较大差异,办法明确了商业银行可根据本行业务特征与风险偏好,在已列举定量指标基础上,差异化设置负债管理指标和内部限额。
《办法》整体以定性为主,未新设量化指标,涉及的量化指标均为现有规章制度已有指标,口径及相关限额与现有规制保持一致,并着重强调了质量和数量相对应的原则。就银行负债而言,质量的核心是稳定性、合规性和成本,数量即规模。当前,我国利率市场化进程和部分融资主体债务软约束并存,所以由于主动或者被动原因,我国不少银行存在资产规模冲动惯性,如果没有良性客户和负债基础,资产规模冲动自然会传导为负债竞争压力,进而产生稳定性、合规性和成本提高的问题。本次《办法》从业务和公司治理角度对负债端监管要求进行了梳理和规范,强调事前和过程中监管,有助于提升银行负债监管的全面性和系统性,从而更好的防范和应对银行规模冲动带来的潜在风险。
《办法》执行落地有助于提升整体银行体系负债的稳定性和合规性。某种意义上,前期结构性存款等创新存款治理、互联网存款新规等就是《办法》精神的提前体现。预计随着存款市场规范治理和负债质量提升,未来一段时间银行体系负债成本有望稳中趋降。对于农村金融机构而言,由于在网点布局、客户结构等存在先天不足,负债结构单一度偏高,负债成本偏高、负债稳定性不足等问题,《办法》的出台对于中小银行构建全面、系统的负债业务管理和风险控制体系,实现可持续发展具有重要意义。
附件
商业银行负债质量管理办法(征求意见稿)
第一章 总则
第一条 【制定目的和依据】为加强商业银行负债质量管理,维护银行体系安全稳健运行,根据《中华人民共和国银行业监督管理法》《中华人民共和国商业银行法》等法律法规,制定本办法。
第二条 【适用范围】本办法适用于中华人民共和国境内设立的商业银行所开展的境内外、本外币各项负债业务。
第三条 【定义】本办法所称负债质量管理是指商业银行以确保其经营的安全性、流动性和效益性为目的,按照与其经营战略、风险偏好和总体业务特征相适应的原则,就负债来源、结构、成本等方面所开展的管理活动。
第四条 【监督管理】中国银行保险监督管理委员会(以下简称银保监会)及其派出机构依法对商业银行的负债质量实施监督管理。
第二章 负债质量管理体系
第五条 【管理体系】商业银行应当确立与本行负债规模和复杂程度相适应的负债质量管理体系。
第六条 【治理架构】商业银行应当建立健全负债质量管理组织架构,明确董事会、高级管理层以及相关部门在负债质量管理中的职责和报告路线,建立相应的考核及问责机制。
第七条 【董事会及高管层职责】商业银行的董事会和高级管理层应当对负债质量管理实施有效监控。
董事会承担负债质量管理最终责任。主要职责包括但不限于:审核批准负债质量管理策略和重要的制度、流程、限额和应急计划;监督高级管理层对负债质量进行管理和控制;定期审议相关报告,及时掌握负债质量的重大变化和潜在转变。
高级管理层承担负债质量的具体管理工作。主要职责包括但不限于:制定并执行负债质量管理的策略、制度、流程、限额和应急计划;制定并执行有关负债质量管理的内部控制制度;充分了解并定期评估本行负债质量状况,及时向董事会报告负债质量的重大变化或潜在风险。
第八条 【管理范围】商业银行负债质量管理的策略、制度、程序和应急计划应涵盖本行境内外所有可能对其负债质量产生重大影响的业务部门、分支机构和附属公司的所有负债业务,及相关重要交易对手、合作机构等,并包括正常情况和压力状况下的负债质量管理。
商业银行应每年对相关负债质量管理的策略、制度、流程、限额和应急计划等进行评估,必要时进行修订。
第九条 【内部控制】商业银行应当建立完善的负债质量管理内部控制体系,并作为银行整体内部控制体系的有机组成部分。负债质量管理的内部控制应当有利于促进有效的业务运作,提供可靠的财务和运行报告,督促严格遵守相关法律法规和内部的制度、程序,确保负债质量管理体系的有效运行。
第十条 【业务创新管理机制】商业银行应当建立健全负债业务创新管理机制,在引入新产品、新客户、新流程、新技术手段前,应当充分识别和评估其包含的各类风险以及对整体负债质量的影响,并制定相应风险管理措施。引入并运行后,应加强日常监测,定期评估相应措施的有效性,并根据需要及时进行调整。
商业银行开展负债业务创新活动,应当坚持依法合规和审慎原则,确保创新活动与本行的负债质量管理水平相适应,不得以金融创新为名,变相逃避监管或损害消费者利益。
第十一条 【相关风险管理】商业银行实施负债质量管理,应当充分考虑负债质量管理与各类风险管理的相关性,并协调负债质量管理与各类风险管理的制度和程序。
商业银行负债质量管理体系与流动性风险等相关风险管理体系存在重复的内容,可不再单独确立。
第十二条 【绩效考评】商业银行应将负债质量纳入绩效考评体系,并设定科学合理的考核指标,突出合规经营和风险管理的重要性。不得设定以存款时点规模、市场份额、排名或同业比较为要求的考评指标。分支机构不得层层加码提高考评标准及相关指标要求,防范过度追求业务扩张和短期利润。
第十三条 【内部审计】商业银行应当将负债质量管理纳入内部审计范畴,定期对负债质量管理的重要组成部分和管理环节进行独立的审查。商业银行在引入对负债质量有重大影响的新产品和新业务、负债质量出现重大变动或者负债质量管理存在严重缺陷的情况下,应当采取扩大内部审计范围、增加内部审计频率或启动专项审计等措施。
第十四条 【报告制度】商业银行应当建立规范的负债质量管理报告制度,明确负债质量管理的内容及报送形式、频率和范围,确保董事会、监事会、高级管理层和其他管理人员及时了解负债质量管理情况。
第十五条 【信息披露】商业银行应当至少按年披露负债质量管理体系及负债质量状况等方面信息。
第十六条 【系统建设】商业银行应当建立完备、可靠的信息系统,确保信息系统能够监测负债质量有关指标、限额等情况,为负债质量管理的相关计量、监测和控制提供有效支持。商业银行应当根据需要及时对管理信息系统进行维护和改进,并采取相应措施确保数据的准确、及时和安全。
第三章 负债质量管理要素
第十七条 【管理要素】商业银行应当重点从以下六个方面加强负债质量管理:
(一)负债来源的稳定性;
(二)负债结构的多样性;
(三)负债与资产匹配的合理性;
(四)负债获取的主动性;
(五)负债成本的适当性;
(六)负债项目的真实性。
第十八条 【负债来源稳定性】商业银行应当提高负债来源的稳定性,密切关注影响本行负债来源稳定性的内外部因素,加强对负债规模和结构变动的监测和分析,提高对负债规模和结构变动的管理,防止负债大幅异常变动引发风险。
商业银行应当采用适当的指标和内部限额评估负债来源异动引发的相关风险。包括但不限于:净稳定资金比例(资产规模不小于2000亿元)、核心负债比例、存款偏离度、同业融入比例等。
第十九条 【负债结构多样性】商业银行应当提高负债结构的多样性,形成客户结构多样、资金交易对手分散、业务品种丰富、应急融资渠道多元的负债组合,防止过度集中引发风险。
商业银行应根据本行情况,建立按行业、客户类型、产品种类等不同维度的负债结构指标管理体系,包括但不限于:最大十户存款比例、最大十家同业融入比例等相关参考指标。
第二十条 【负债与资产匹配的合理性】商业银行应当提高负债与资产匹配的合理性,通过多种方式提升负债与资产在期限、币种、利率、汇率等方面的匹配程度,防止过度错配引发风险。
商业银行应当采用适当的指标和内部限额评估负债与资产的错配风险。包括但不限于:流动性覆盖率(资产规模不小于2000亿元)、优质流动性资产充足率(资产规模小于2000亿元)、流动性匹配率、流动性缺口率、重要币种流动性比例、净息差、银行账簿最大经济价值变动比例、累计外汇敞口头寸比例等。
第二十一条 【负债获取主动性】商业银行应当合理提高负债获取的主动性,根据业务发展和管理需要,提高通过各种渠道及时主动获得所需额度、期限和成本资金的能力。
商业银行应当定期开展市场融资能力评估,确保在市场出现不利变动趋势的情况下,具备以合理的价格进行融资和处置资产的应对能力。
第二十二条 【负债成本适当性】商业银行应当提高负债成本的适当性, 建立科学的内外部资金定价机制,加强内部资金转移价格管理,确保以合理的成本吸收资金。采用适当的指标和内部限额,参考市场相关价格变化,及时监测和预警负债成本的变化,防止因负债成本不合理导致过度开展高风险、高收益的资产业务,损害经营的持续性。
第二十三条 【负债项目真实性】商业银行应当确保负债项目的真实性,负债交易、负债会计核算、负债统计等应当符合法律法规和有关监管规定。
各项负债业务应当基于真实的债权债务关系,并符合会计准则的相关要求。禁止通过虚构交易、对做交易以及乱用、错用会计科目或业务不入账等方式调增或调减负债。应确保各项负债的统计数据真实、准确、完整,并与同一业务的会计数据映射一致。
第二十四条 【合规经营】商业银行应当严格执行存款利率和计结息管理及规范吸收存款行为等有关规定,不得采取违规返利吸存、通过第三方中介吸存、延迟支付吸存、以贷转存吸存、提前支取靠档计息等违规手段吸收和虚增存款。商业银行通过互联网吸收存款的,应当遵守相关监管规定。
商业银行应严格遵守同业业务相关规定,审慎选择与管理同业业务交易对手,合理配置同业业务的资金来源与运用。
第二十五条 【负债质量监测与分析】商业银行应当对负债质量进行持续监测和分析, 根据本行业务特征与风险偏好差异化设置负债管理指标和内部限额,并对指标异常和超限额的情况及时报告和处理。
商业银行应当监测可能引发负债业务风险的特定情景或事件,合理预判未来负债业务的变化趋势。
第四章 负债质量管理监督
第二十六条 【年度报告】商业银行应当按照本办法要求,对负债质量管理情况进行年度评估,应于每年3月底前,向银保监会或其派出机构报送上一年度的负债质量管理评估报告。重点内容包括但不限于:
(一)负债质量管理的治理体系是否健全;
(二)负债质量管理策略、政策及应急计划是否与本行经营战略、风险偏好和总体业务特征相适应;
(三)负债质量管理要素是否符合本办法要求;
(四)负债质量的识别、计量、监测及控制体系是否完善,对指标异常和超限额的情况报告和处理是否及时得当;
(五)负债质量管理相关指标和限额是否符合现行规章制度要求,与过往年度及同业可比机构相比是否存在不合理情况。
第二十七条 【重大事项报告】商业银行应当及时向银保监会或其派出机构报告下列可能对其负债质量产生不利影响的重大事项和拟采取的应对措施:
(一)发生挤兑事件;
(二)信用评级大幅下调;
(三)重要融资渠道即将受限或失效;
(四)大规模出售资产以偿还负债;
(五)负债项目被其他监管部门发现重大违规;
(六)负债总量或结构异常变化;
(七)负债成本异常上升;
(八)母公司或集团内其他机构的经营状况、流动性状况和信用评级等发生重大不利变化;
(九)市场流动性状况对本行负债业务产生重大不利影响;
(十)其他对负债质量可能产生重大影响的事项。
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