工业软件产业研究：CAX类工业软件趋势/空间/格局与投资主线
核心观点：
基于对CAX产业的分析与判断，对标国外主流的达索、西门子、Autodesk等工业软件巨头发展路径的分析，我们归纳出如下三个推荐逻辑:
核心逻辑一:当前中国制造业从粗放式向精细化管理模式转变，百亿级全球市场看空间，中国CAX类工业软件市场增速明显高于全球。
从市场空间看，全球CAD/CAE/CAM市场空间分别为20亿美元级(2028年)、130亿美元级(2025年)和40亿美元级(2025年)。
从行业增速看，中国CAD/CAE/CAM市场复合增速均明显高于全球水平，中国市场对工业软件的需求持续加大。
核心逻辑二:无论是全球还是中国CAX软件市场，海外巨头几乎都占据垄断。在CAX细分市场中，国产替代进程由高到底分别为:2D CAD>3D CAD>CAE/CAM。
从国产替代程度看，当前国产2D CAD逐步国产替代，3D CAD实现基本可用，CAE和CAM仍处于核心技术亟待突破阶段。从应用场景来看，国产CAD/CAE/CAM较多应用于建筑、工业工程等中低端场景，航空航天、精密制造等高端场景尚待突破。
核心逻辑三:CAX三大产品一体化发展是大势所趋，数据交互是产品无缝衔接的关键，工业软件的演进史就是行业巨头发展的并购史。
欧美已经诞生了众多综合性的工业巨头，包括西门子(1149亿欧元)、达索(501亿欧元)、Autodesk(645亿美元)、ANSYS(294亿 美元)、PTC(155亿美元)，中国CAD龙头厂商中望软件(349亿元)长期成长空间巨大。
01 综述：CAX一体化趋势，数据交互是关键
1.1 CAX三大产品一体化发展是大势所趋，数据交互是关键
CAD/CAE / CAM 一体化发展大势所趋：一般来说，产品生产过程可分为初步设计、详细设计、生产准备和生产制造 4 个阶段。
初步设计和详细设计流程环节：利用CAD进行产品几何实体建模，为CAE所用；利用 CAE 对产品几何实体模型进行性能、强度、动力 学等方面的数值模拟计算，根据CAE计算结果不断利用 CAD 修改几何实体模型， 最终设计出符合性能和经济性要求的最优化产品。
生产准备和生产制造流程环节：利用 CAD 输出产品三维图形、工程图纸等，并保存所有产品数据信息为CAM所用；利用 CAM 完成 产品生产制造所需的工艺设计、NC 编程、机器人编程等工作以及实际制造工作。
1.2 CAD/CAE/CAM通过建模和分析，编程成为自动化一条龙
CAD,CAE,CAM建模分析自动编程一条龙
技术层面：CAD和CAE是两大技术方向，CAD的核心是基于 集合模型的造型建模，CAE是基于物理模型的数值 拟合求解，而CAM是将CAD建模转化为数控加工程 序的功能。
应用层面：CAD、CAE、CAM三者环环相扣，由CAE软件读 取CAD的初步建模，进行工程分析（仿真模拟）， 再将结果反馈给CAD继续优化产品设计，最后由 CAM进行自动化数控编程。该流程结束后，与生产 管控和管理运营软件结合起来进行生产作业，由生 产控制系统进行加工制造。
CAM与CAD的高度集成是大趋势：CAM与CAD的集成将极大的提高设计生产效率， 主流CAD/CAM软件多会集成CAE模块，满足轻度 仿真分析需求。
02 分述：CAX三大品类的空间、格局与差距
2.1 中国CAD市场增速明显高于全球，呈巨头垄断行业格局
中国CAD市场增速明显高于全球：根未来几年全球CAD市场规模增速预计保持6.5%，2028年将达到138.3亿美元。其中，同期中国CAD市场规模增速明显高于全球。
无论是中国还是全球，四大CAD巨头垄断行业：全球CAD市场仍然由海外巨头主导，四大巨头占据全球CAD市场的80%，包括达索 （ 31% ）、 Autodesk（28% ）、西门子（ 21% ）、PTC（8%）。
2.2 国产2D CAD可基本实现国产替代，非高端领域逐步国产替代
2D CAD 方面：国产软件（以中望软件为例）已可基本实现国产替代 ，国产化率约11%。已有国产2D CAD产品采用多核处理器，运行速度 基本赶上AutoCAD。兼容性方面国产软件较海外软件有一定差距。
行业分布：海外主流2D CAD产品可适用于高端设备，如精密机械、电 脑软硬件、医疗企业、汽车等的生产。国内主流2D CAD产品主要适用 于基础机械制造和建筑行业等相对中低端场景。
2.3 国产3D CAD基本实现可用，主要应用相对中低端工业场景
国产3D CAD在非高端领域已基本可用，未来3-5年有望逐步替代达索 Solid Works，但与海外高端产品还有明显差距。国产三维几何建模能力，国产软件较海外软件有一定差距，不能运用 于高端的航空航天、精密制造行业。海外主流3D CAD产品广泛应用于 该类行业，而国内主流3D CAD产品主要用于工业工程、汽车机械等行 业，预计追赶CATIA还需要较长时间。
2.4 中望3D CAD掌握核心自主技术，实力比肩国际第三阵营
针对不同复杂场景及曲面设计需求，体量装配数量，3D CAD 产品满足各层次需求：3D CAD 主要分第一阵营平均技术指标、第二阵营平均技术指标、第三阵营平均技术指标，分别对应三维几何建模能力自由曲面建模质 量、大体量装配设计能力、行业应用模块、典型应用领域等技术特征。三维几何建模能力场景主要划分为：简单场景建模质量可用，一般复杂场景建模质量可靠，超复杂场景建模质量高稳定好。
2.5 CAE三巨头主导全球市场，中国CAE市场国产化率不足5%
中国CAE市场增速高于全球6.6个百分点：2020年预计全球CAE市场规模达到81亿美元，预计2025年达到 128亿美元，年均复合增速9.6%。
全球CAE市场基本被海外企业主导，中国CAE市场国产化率不足5%：2020年排名前三厂商占据全球CAE市场的47%，分别是西门子、 ANSYS和达索。在中国市场，全球CAE三巨头的市占率超过95.7%，国产化率不足5%。
2.6 中国CAM市场增速26.8%，国产CAM厂商核心技术亟待突破
中国CAM市场增速26.8%，明显高于全球7%的增速水平：2017年全球CAM市场规模为20.9亿美元，预计 2025年将达到35.7亿美元，对应2017-2025年均增速为7%。根据中国研发类工业软件类型占比中CAM软件占比11%，乘上中国研发设计 类工业软件市场规模，估算出的中国CAM市场规模来看，2012-2017年均增速26.8%，远远超过全球CAM市场增速。
竞争格局：无论是全球还是中国CAM市场，达索、西门子、PTC三巨头几乎占据了大部分市场，国产CAM厂商仅山大华天SINOVATION相 对成熟，国产CAM厂商核心技术亟待突破。
2.7 CAM软件存在三种解决方案，功能特点各有侧重
与CAD套件一起打包的CAM工具：
优点：具有相关性，由于刀具路径链接回CAD设计，因 此所有更改都会立即反映在刀具路径中，不必手动将 CAD文件重新导入外部CAM软件，然后从头开始重新编 程刀具路径。
缺点：功能不够强大，无法为具有许多特征的高度复杂零 件创建刀具路径。
独立的CAM程序：
优点：专用CAM软件具有强大的CAM操作功能，可以创 建复杂的几何图形，如涡轮机。
缺点：CAD软件本地不能导入，丧失结合性。
需要CAM软件和CAD程序支持相同的文件格式，因此独 立的CAM程序在处理行业标准格式的文件时比较方便， 否则操作将会变得十分复杂。
用于CAD程序的CAM插件：上述两种解决方案之间有一个中间地带，它具有前两种方案所有 优点。既为原生CAD软件提供全面的CAM功能，使得相关性得以 保留，又可以让用户从专用CAM软件中找到的大量工具获益。
03 风险提示
疫情导致全球经济的下行的风险：疫情蔓延全球，宏观经济下滑导致企业IT支出增长放缓，下游客户对工业软件的需求下降的风险。
制造业升级进展过慢的风险：中国制造业产业升级过程中，技术和产品迭代过慢，升级进程低于预期。
行业竞争加剧导致盈利水平下降：国外工业软件巨头扩张进一步加剧行业竞争格局，导致行业盈利水平下降。
核心技术突破进程低于预期的风险：核心技术突破困难，进程低于预期导致的产品性能更新放缓，竞争力下降。
报告节选：…
核心观点：
基于对CAX产业的分析与判断，对标国外主流的达索、西门子、Autodesk等工业软件巨头发展路径的分析，我们归纳出如下三个推荐逻辑:
核心逻辑一:当前中国制造业从粗放式向精细化管理模式转变，百亿级全球市场看空间，中国CAX类工业软件市场增速明显高于全球。
从市场空间看，全球CAD/CAE/CAM市场空间分别为20亿美元级(2028年)、130亿美元级(2025年)和40亿美元级(2025年)。
从行业增速看，中国CAD/CAE/CAM市场复合增速均明显高于全球水平，中国市场对工业软件的需求持续加大。
核心逻辑二:无论是全球还是中国CAX软件市场，海外巨头几乎都占据垄断。在CAX细分市场中，国产替代进程由高到底分别为:2D CAD>3D CAD>CAE/CAM。
从国产替代程度看，当前国产2D CAD逐步国产替代，3D CAD实现基本可用，CAE和CAM仍处于核心技术亟待突破阶段。从应用场景来看，国产CAD/CAE/CAM较多应用于建筑、工业工程等中低端场景，航空航天、精密制造等高端场景尚待突破。
核心逻辑三:CAX三大产品一体化发展是大势所趋，数据交互是产品无缝衔接的关键，工业软件的演进史就是行业巨头发展的并购史。
欧美已经诞生了众多综合性的工业巨头，包括西门子(1149亿欧元)、达索(501亿欧元)、Autodesk(645亿美元)、ANSYS(294亿 美元)、PTC(155亿美元)，中国CAD龙头厂商中望软件(349亿元)长期成长空间巨大。
01 综述：CAX一体化趋势，数据交互是关键
1.1 CAX三大产品一体化发展是大势所趋，数据交互是关键
CAD/CAE / CAM 一体化发展大势所趋：一般来说，产品生产过程可分为初步设计、详细设计、生产准备和生产制造 4 个阶段。
初步设计和详细设计流程环节：利用CAD进行产品几何实体建模，为CAE所用；利用 CAE 对产品几何实体模型进行性能、强度、动力 学等方面的数值模拟计算，根据CAE计算结果不断利用 CAD 修改几何实体模型， 最终设计出符合性能和经济性要求的最优化产品。
生产准备和生产制造流程环节：利用 CAD 输出产品三维图形、工程图纸等，并保存所有产品数据信息为CAM所用；利用 CAM 完成 产品生产制造所需的工艺设计、NC 编程、机器人编程等工作以及实际制造工作。
1.2 CAD/CAE/CAM通过建模和分析，编程成为自动化一条龙
CAD,CAE,CAM建模分析自动编程一条龙
技术层面：CAD和CAE是两大技术方向，CAD的核心是基于 集合模型的造型建模，CAE是基于物理模型的数值 拟合求解，而CAM是将CAD建模转化为数控加工程 序的功能。
应用层面：CAD、CAE、CAM三者环环相扣，由CAE软件读 取CAD的初步建模，进行工程分析（仿真模拟）， 再将结果反馈给CAD继续优化产品设计，最后由 CAM进行自动化数控编程。该流程结束后，与生产 管控和管理运营软件结合起来进行生产作业，由生 产控制系统进行加工制造。
CAM与CAD的高度集成是大趋势：CAM与CAD的集成将极大的提高设计生产效率， 主流CAD/CAM软件多会集成CAE模块，满足轻度 仿真分析需求。
02 分述：CAX三大品类的空间、格局与差距
2.1 中国CAD市场增速明显高于全球，呈巨头垄断行业格局
中国CAD市场增速明显高于全球：根未来几年全球CAD市场规模增速预计保持6.5%，2028年将达到138.3亿美元。其中，同期中国CAD市场规模增速明显高于全球。
无论是中国还是全球，四大CAD巨头垄断行业：全球CAD市场仍然由海外巨头主导，四大巨头占据全球CAD市场的80%，包括达索 （ 31% ）、 Autodesk（28% ）、西门子（ 21% ）、PTC（8%）。
2.2 国产2D CAD可基本实现国产替代，非高端领域逐步国产替代
2D CAD 方面：国产软件（以中望软件为例）已可基本实现国产替代 ，国产化率约11%。已有国产2D CAD产品采用多核处理器，运行速度 基本赶上AutoCAD。兼容性方面国产软件较海外软件有一定差距。
行业分布：海外主流2D CAD产品可适用于高端设备，如精密机械、电 脑软硬件、医疗企业、汽车等的生产。国内主流2D CAD产品主要适用 于基础机械制造和建筑行业等相对中低端场景。
2.3 国产3D CAD基本实现可用，主要应用相对中低端工业场景
国产3D CAD在非高端领域已基本可用，未来3-5年有望逐步替代达索 Solid Works，但与海外高端产品还有明显差距。国产三维几何建模能力，国产软件较海外软件有一定差距，不能运用 于高端的航空航天、精密制造行业。海外主流3D CAD产品广泛应用于 该类行业，而国内主流3D CAD产品主要用于工业工程、汽车机械等行 业，预计追赶CATIA还需要较长时间。
2.4 中望3D CAD掌握核心自主技术，实力比肩国际第三阵营
针对不同复杂场景及曲面设计需求，体量装配数量，3D CAD 产品满足各层次需求：3D CAD 主要分第一阵营平均技术指标、第二阵营平均技术指标、第三阵营平均技术指标，分别对应三维几何建模能力自由曲面建模质 量、大体量装配设计能力、行业应用模块、典型应用领域等技术特征。三维几何建模能力场景主要划分为：简单场景建模质量可用，一般复杂场景建模质量可靠，超复杂场景建模质量高稳定好。
2.5 CAE三巨头主导全球市场，中国CAE市场国产化率不足5%
中国CAE市场增速高于全球6.6个百分点：2020年预计全球CAE市场规模达到81亿美元，预计2025年达到 128亿美元，年均复合增速9.6%。
全球CAE市场基本被海外企业主导，中国CAE市场国产化率不足5%：2020年排名前三厂商占据全球CAE市场的47%，分别是西门子、 ANSYS和达索。在中国市场，全球CAE三巨头的市占率超过95.7%，国产化率不足5%。
2.6 中国CAM市场增速26.8%，国产CAM厂商核心技术亟待突破
中国CAM市场增速26.8%，明显高于全球7%的增速水平：2017年全球CAM市场规模为20.9亿美元，预计 2025年将达到35.7亿美元，对应2017-2025年均增速为7%。根据中国研发类工业软件类型占比中CAM软件占比11%，乘上中国研发设计 类工业软件市场规模，估算出的中国CAM市场规模来看，2012-2017年均增速26.8%，远远超过全球CAM市场增速。
竞争格局：无论是全球还是中国CAM市场，达索、西门子、PTC三巨头几乎占据了大部分市场，国产CAM厂商仅山大华天SINOVATION相 对成熟，国产CAM厂商核心技术亟待突破。
2.7 CAM软件存在三种解决方案，功能特点各有侧重
与CAD套件一起打包的CAM工具：
优点：具有相关性，由于刀具路径链接回CAD设计，因 此所有更改都会立即反映在刀具路径中，不必手动将 CAD文件重新导入外部CAM软件，然后从头开始重新编 程刀具路径。
缺点：功能不够强大，无法为具有许多特征的高度复杂零 件创建刀具路径。
独立的CAM程序：
优点：专用CAM软件具有强大的CAM操作功能，可以创 建复杂的几何图形，如涡轮机。
缺点：CAD软件本地不能导入，丧失结合性。
需要CAM软件和CAD程序支持相同的文件格式，因此独 立的CAM程序在处理行业标准格式的文件时比较方便， 否则操作将会变得十分复杂。
用于CAD程序的CAM插件：上述两种解决方案之间有一个中间地带，它具有前两种方案所有 优点。既为原生CAD软件提供全面的CAM功能，使得相关性得以 保留，又可以让用户从专用CAM软件中找到的大量工具获益。
03 风险提示
疫情导致全球经济的下行的风险：疫情蔓延全球，宏观经济下滑导致企业IT支出增长放缓，下游客户对工业软件的需求下降的风险。
制造业升级进展过慢的风险：中国制造业产业升级过程中，技术和产品迭代过慢，升级进程低于预期。
行业竞争加剧导致盈利水平下降：国外工业软件巨头扩张进一步加剧行业竞争格局，导致行业盈利水平下降。
核心技术突破进程低于预期的风险：核心技术突破困难，进程低于预期导致的产品性能更新放缓，竞争力下降。
报告节选：…
【方案参考 | 微生物蛋白纯化实验室搭建模版】
一级学科：生物学
二级学科：生物化学、微生物学
简述：方案包含重组载体构建、蛋白纯化、蛋白性质分析等3大部分3个流程，涉及21种设备。
核心设备：高压破碎仪、蛋白纯化仪、高速冷冻离心机、紫外可见分光光度计、高效液相色谱
关键词：重组载体构建、蛋白纯化、亲和层析、疏水层析、离子交换层析、尺寸排阻层析、生理生化性质鉴定。
基本概念：重组载体构建、蛋白纯化、亲和层析、疏水层析、离子交换层析、尺寸排阻层析、蛋白性质分析。
实验流程：
蛋白纯化主要包括三个步骤：1）重组载体的构建；2）蛋白的上柱纯化；3）蛋白性质分析。
1、重组载体的构建
蛋白纯化主要分为异源表达纯化和野生菌纯化。其中异源表达纯化在蛋白上柱纯化之前需要构建目的基因的重组载体，并且在载体构建过程中给目的基因添加特殊的标签，如His-Tag、GST、Strep等，最终通过相应的亲和层析柱获得目的蛋白.此方法为蛋白纯化最常用的方法。
而野生菌纯化则是通过离子交换层析、疏水层析、尺寸排阻层析（凝胶过滤）等方法原理，从野生菌中直接获得某种蛋白的蛋白纯化方法。
其中重组载体的构建主要由分为三个步骤：1）目的基因片段的获得；2）酶切及切胶回收；3）酶连、转化及保存等
1.1目的基因片段的获得（对应编号1-1）
选用合适的质粒作为载体，并选择合适的双酶切位点。
以相应菌株的基因组为模板，设计相应引物，利用PCR仪对目的基因进行扩增，获得大量的目的基因片段。
1.2酶切及切胶回收（对应编号1-2）
将PCR获得的目的基因片段和提取的质粒同时进行双酶切处理，该过程需要在恒温水浴槽中37℃中酶切40 min。
对酶切之后的反应液利用水平电泳仪进行TAE琼脂糖凝胶电泳，在凝胶成像系统下切下目的片段及酶切后的载体片段，用DNA纯化回收试剂盒进行纯化回收，该回收过程需要多次用到小型高速离心机。
1.3酶连、转化及保存（对应编号1-3、1-4）
用T4 DNA Ligase对切胶回收后的目的片段和载体质粒进行酶连实验，该过程需要在恒温水浴槽中25℃中酶连30 min左右，最终将酶连产物通过转化转入克隆宿主。
转化的方法有两种，第一种方法是通过电转化法，直接通过电转仪将重组后的质粒转入克隆宿主，省时高效；另一种方法是将连接液加入到感受态细胞中，冰浴30 min，之后37℃水浴5 min，冰上放置3 min，之后超净台中加入500 μL LB培养基，37℃振荡培养箱振荡培养约1 h。
将上述培养液在超净工作台进行平板涂布，过夜培养观察平板菌落生长情况。
通过PCR验证与测序挑选正确的转化子，并将正确的转化子转入到表达宿主中，经PCR验证后将含有重组质粒的表达宿主甘油处理，并保存在超低温冰箱的-80℃环境中。
2、蛋白的上柱纯化
蛋白的上柱纯化主要分为四个步骤组成：1）目的细胞的培养；2）目的细胞的破碎及离心；3）目的蛋白上柱纯化及浓缩脱盐等。
2.1 目的细胞的培养（对应编号2-1）
对于异源表达纯化来说，需对上述含有重组质粒的表达宿主进行诱导表达。
一般方法如下（假设表达宿主为BL21（DE3），载体为pET28b(+)）：将测序成功的含有重组质粒的表达宿主在超净工作台接种至LB培养基，在大容量恒温振荡器中37℃、170 rpm培养至OD值达到0.8-1.0时，加入诱导剂IPTG（终浓度一般为0.5 mM），降低温度和转速至30℃、130 rpm，过夜诱导后利用大容量高速冷冻离心机收菌，并用pH 7.0的50 mM磷酸钠清洗两遍，-20℃保存细胞。
而对于野生菌纯化来说，只需在该菌株最适生长条件之下培养获得大量菌体，以备下一步试验所需。
该过程中培养基以及以下步骤所需的缓冲液均需要pH计来调剂pH。如果所需目的细胞为厌氧细胞，需用厌氧手套箱进行培养基的配制。
2.2 目的细胞的破碎及离心（对应编号2-2、2-3）
将目的细胞用缓冲液重悬，并用高压细胞破碎仪破碎目的细胞，如果是革兰氏染色阳性的细胞，需在菌悬液中添加溶菌酶，并在37℃下恒温水浴30 min。
细胞破碎液用高速冷冻离心机在35000 ×g、4℃下离心30 min，将上清用0.22 μm滤头过滤，最终获得上清粗酶液。
对于膜蛋白组分，需用超速离心机进行离心。
2.3 目的蛋白上柱纯化（对应编号2-4、2-5）
对于异源表达纯化来说，将上述步骤制备的粗酶液通过蠕动泵上样到以亲和层析为主的蛋白纯化柱上（此处以常用的His-Tag和Ni柱为例）。
将上样完成的Ni柱利用蛋白纯化仪进行咪唑梯度蛋白洗脱，并将每个梯度的样品分别收取，并利用浓缩管和高速冷冻离心机对蛋白进行浓缩脱盐，用于目的蛋白的验证和表征。
相比异源表达纯化，野生菌纯化要复杂得多。首先需知道所要纯化蛋白的基本性质，比如所催化的基础反应。
利用此反应，依据不同的纯化原理来进一步捕获和纯化蛋白，该过程需要蛋白纯化仪的支持。
如首先通过蠕动泵上样离子交换层析柱（通常用Q柱或DEAE柱），该层析柱通过逐步提高盐浓度洗脱蛋白，依据目的蛋白所催化的基础反应捕获蛋白，该过程通常需要用到电脑实时监测的双光束紫外可见分光光度计。
当监测到目的蛋白所在梯度后，对该梯度进行蛋白浓缩，并将缓冲液换成疏水层析柱（一般为苯基柱）的缓冲液。
将上述样品通过蠕动泵上样苯基柱，该层析柱需要逐步降低盐浓度来洗脱蛋白，依据目的蛋白所催化的基础反应进一步蛋白，并将目的蛋白梯度浓缩脱盐。
再将上一步样品利用尺寸排阻层析柱（分子筛）进一步纯化蛋白样品，最终获得较纯的蛋白样品，用于蛋白生理生化性质的分析，还可通过分子筛测定蛋白的分子量，并预测蛋白亚基的聚合形式。
3、蛋白性质分析
对于蛋白的生理生化性质的测定，主要包括以下几个方面：1）蛋白浓度测定及SDS-PAGE电泳；2）催化性质及其产物测定；3）辅基测定；4）蛋白结构解析等。
3.1 蛋白浓度测定及SDS-PAGE电泳（对应编号3-1）
对于蛋白浓度的测定，一般以牛血清白蛋白为标准品，用Bradford法进行测定，该测定须使用紫外可见分光光度计。
SDS-PAGE电泳首先对蛋白样品进行处理，选择合适浓度的蛋白样品，加入蛋白loading，100℃金属浴10 min，经小型高速离心机离心后，在垂直电泳槽中点样，最终完成蛋白电泳。
3.2 催化性质及其产物测定（对应编号3-2、3-4）
对于目的蛋白催化性质的测定，一般可使用电脑实时监测的双光束紫外可见分光光度计来完成，通过监测底物的消耗或产物的生成监测反应进行，并可通过计算酶活曲线的斜率计算比酶活。
有的反应因底物产物较为相似，无法用紫外可见分光光度计分开，这时需要高效液相色谱（HPLC）来监测反应的进行，一般通过监测单位时间内产物的生成来计算比酶活。
3.3 辅基测定（对应编号3-3）
对于蛋白辅基的测定，测定方法多种多样。
如Fe含量的测定，通常使用 Ferene法，该方法需用到紫外可见分光光度计和金属浴。
对于蛋白中其他离子的鉴定与定量如Zn、Mo、W和S等，其最便捷高效的方法就是使用原子吸收光谱进行测定。
而对于其他辅基如FAD、FMN等，其最简便的鉴别定量方法是利用HPLC进行监测。
3.3 蛋白结构解析（对应编号3-5、3-6）
目前对于蛋白质二级结构的研究，其主要手段之一是利用圆二色光谱进行鉴定，该方法广泛应用于蛋白质的构象研究中。
而对于蛋白质三级结构的解析，主要的方法包括X-射线衍射法、核磁共振和冷冻电镜。
其中X-射线衍射法需要先对蛋白进行结晶，然后利用X-射线衍射仪进行结构分析，因此适用于较小分子蛋白质的结构解析，因为大分子蛋白很难结晶，该方法同样很难捕捉蛋白质动态变化过程；
核磁共振依据强磁场中原子和对射频辐射的吸收作用，需要用到核磁共振波谱仪进行研究，该方法可以捕捉蛋白质分子动力学，但是仅适用于小分子蛋白；
冷冻电镜是近年来兴起的蛋白质结构测定方法，难以结晶的膜蛋白以及生物大分子复合体可用此方法进行解析。#木木西里# #实验方案# #微生物蛋白#
一级学科：生物学
二级学科：生物化学、微生物学
简述：方案包含重组载体构建、蛋白纯化、蛋白性质分析等3大部分3个流程，涉及21种设备。
核心设备：高压破碎仪、蛋白纯化仪、高速冷冻离心机、紫外可见分光光度计、高效液相色谱
关键词：重组载体构建、蛋白纯化、亲和层析、疏水层析、离子交换层析、尺寸排阻层析、生理生化性质鉴定。
基本概念：重组载体构建、蛋白纯化、亲和层析、疏水层析、离子交换层析、尺寸排阻层析、蛋白性质分析。
实验流程：
蛋白纯化主要包括三个步骤：1）重组载体的构建；2）蛋白的上柱纯化；3）蛋白性质分析。
1、重组载体的构建
蛋白纯化主要分为异源表达纯化和野生菌纯化。其中异源表达纯化在蛋白上柱纯化之前需要构建目的基因的重组载体，并且在载体构建过程中给目的基因添加特殊的标签，如His-Tag、GST、Strep等，最终通过相应的亲和层析柱获得目的蛋白.此方法为蛋白纯化最常用的方法。
而野生菌纯化则是通过离子交换层析、疏水层析、尺寸排阻层析（凝胶过滤）等方法原理，从野生菌中直接获得某种蛋白的蛋白纯化方法。
其中重组载体的构建主要由分为三个步骤：1）目的基因片段的获得；2）酶切及切胶回收；3）酶连、转化及保存等
1.1目的基因片段的获得（对应编号1-1）
选用合适的质粒作为载体，并选择合适的双酶切位点。
以相应菌株的基因组为模板，设计相应引物，利用PCR仪对目的基因进行扩增，获得大量的目的基因片段。
1.2酶切及切胶回收（对应编号1-2）
将PCR获得的目的基因片段和提取的质粒同时进行双酶切处理，该过程需要在恒温水浴槽中37℃中酶切40 min。
对酶切之后的反应液利用水平电泳仪进行TAE琼脂糖凝胶电泳，在凝胶成像系统下切下目的片段及酶切后的载体片段，用DNA纯化回收试剂盒进行纯化回收，该回收过程需要多次用到小型高速离心机。
1.3酶连、转化及保存（对应编号1-3、1-4）
用T4 DNA Ligase对切胶回收后的目的片段和载体质粒进行酶连实验，该过程需要在恒温水浴槽中25℃中酶连30 min左右，最终将酶连产物通过转化转入克隆宿主。
转化的方法有两种，第一种方法是通过电转化法，直接通过电转仪将重组后的质粒转入克隆宿主，省时高效；另一种方法是将连接液加入到感受态细胞中，冰浴30 min，之后37℃水浴5 min，冰上放置3 min，之后超净台中加入500 μL LB培养基，37℃振荡培养箱振荡培养约1 h。
将上述培养液在超净工作台进行平板涂布，过夜培养观察平板菌落生长情况。
通过PCR验证与测序挑选正确的转化子，并将正确的转化子转入到表达宿主中，经PCR验证后将含有重组质粒的表达宿主甘油处理，并保存在超低温冰箱的-80℃环境中。
2、蛋白的上柱纯化
蛋白的上柱纯化主要分为四个步骤组成：1）目的细胞的培养；2）目的细胞的破碎及离心；3）目的蛋白上柱纯化及浓缩脱盐等。
2.1 目的细胞的培养（对应编号2-1）
对于异源表达纯化来说，需对上述含有重组质粒的表达宿主进行诱导表达。
一般方法如下（假设表达宿主为BL21（DE3），载体为pET28b(+)）：将测序成功的含有重组质粒的表达宿主在超净工作台接种至LB培养基，在大容量恒温振荡器中37℃、170 rpm培养至OD值达到0.8-1.0时，加入诱导剂IPTG（终浓度一般为0.5 mM），降低温度和转速至30℃、130 rpm，过夜诱导后利用大容量高速冷冻离心机收菌，并用pH 7.0的50 mM磷酸钠清洗两遍，-20℃保存细胞。
而对于野生菌纯化来说，只需在该菌株最适生长条件之下培养获得大量菌体，以备下一步试验所需。
该过程中培养基以及以下步骤所需的缓冲液均需要pH计来调剂pH。如果所需目的细胞为厌氧细胞，需用厌氧手套箱进行培养基的配制。
2.2 目的细胞的破碎及离心（对应编号2-2、2-3）
将目的细胞用缓冲液重悬，并用高压细胞破碎仪破碎目的细胞，如果是革兰氏染色阳性的细胞，需在菌悬液中添加溶菌酶，并在37℃下恒温水浴30 min。
细胞破碎液用高速冷冻离心机在35000 ×g、4℃下离心30 min，将上清用0.22 μm滤头过滤，最终获得上清粗酶液。
对于膜蛋白组分，需用超速离心机进行离心。
2.3 目的蛋白上柱纯化（对应编号2-4、2-5）
对于异源表达纯化来说，将上述步骤制备的粗酶液通过蠕动泵上样到以亲和层析为主的蛋白纯化柱上（此处以常用的His-Tag和Ni柱为例）。
将上样完成的Ni柱利用蛋白纯化仪进行咪唑梯度蛋白洗脱，并将每个梯度的样品分别收取，并利用浓缩管和高速冷冻离心机对蛋白进行浓缩脱盐，用于目的蛋白的验证和表征。
相比异源表达纯化，野生菌纯化要复杂得多。首先需知道所要纯化蛋白的基本性质，比如所催化的基础反应。
利用此反应，依据不同的纯化原理来进一步捕获和纯化蛋白，该过程需要蛋白纯化仪的支持。
如首先通过蠕动泵上样离子交换层析柱（通常用Q柱或DEAE柱），该层析柱通过逐步提高盐浓度洗脱蛋白，依据目的蛋白所催化的基础反应捕获蛋白，该过程通常需要用到电脑实时监测的双光束紫外可见分光光度计。
当监测到目的蛋白所在梯度后，对该梯度进行蛋白浓缩，并将缓冲液换成疏水层析柱（一般为苯基柱）的缓冲液。
将上述样品通过蠕动泵上样苯基柱，该层析柱需要逐步降低盐浓度来洗脱蛋白，依据目的蛋白所催化的基础反应进一步蛋白，并将目的蛋白梯度浓缩脱盐。
再将上一步样品利用尺寸排阻层析柱（分子筛）进一步纯化蛋白样品，最终获得较纯的蛋白样品，用于蛋白生理生化性质的分析，还可通过分子筛测定蛋白的分子量，并预测蛋白亚基的聚合形式。
3、蛋白性质分析
对于蛋白的生理生化性质的测定，主要包括以下几个方面：1）蛋白浓度测定及SDS-PAGE电泳；2）催化性质及其产物测定；3）辅基测定；4）蛋白结构解析等。
3.1 蛋白浓度测定及SDS-PAGE电泳（对应编号3-1）
对于蛋白浓度的测定，一般以牛血清白蛋白为标准品，用Bradford法进行测定，该测定须使用紫外可见分光光度计。
SDS-PAGE电泳首先对蛋白样品进行处理，选择合适浓度的蛋白样品，加入蛋白loading，100℃金属浴10 min，经小型高速离心机离心后，在垂直电泳槽中点样，最终完成蛋白电泳。
3.2 催化性质及其产物测定（对应编号3-2、3-4）
对于目的蛋白催化性质的测定，一般可使用电脑实时监测的双光束紫外可见分光光度计来完成，通过监测底物的消耗或产物的生成监测反应进行，并可通过计算酶活曲线的斜率计算比酶活。
有的反应因底物产物较为相似，无法用紫外可见分光光度计分开，这时需要高效液相色谱（HPLC）来监测反应的进行，一般通过监测单位时间内产物的生成来计算比酶活。
3.3 辅基测定（对应编号3-3）
对于蛋白辅基的测定，测定方法多种多样。
如Fe含量的测定，通常使用 Ferene法，该方法需用到紫外可见分光光度计和金属浴。
对于蛋白中其他离子的鉴定与定量如Zn、Mo、W和S等，其最便捷高效的方法就是使用原子吸收光谱进行测定。
而对于其他辅基如FAD、FMN等，其最简便的鉴别定量方法是利用HPLC进行监测。
3.3 蛋白结构解析（对应编号3-5、3-6）
目前对于蛋白质二级结构的研究，其主要手段之一是利用圆二色光谱进行鉴定，该方法广泛应用于蛋白质的构象研究中。
而对于蛋白质三级结构的解析，主要的方法包括X-射线衍射法、核磁共振和冷冻电镜。
其中X-射线衍射法需要先对蛋白进行结晶，然后利用X-射线衍射仪进行结构分析，因此适用于较小分子蛋白质的结构解析，因为大分子蛋白很难结晶，该方法同样很难捕捉蛋白质动态变化过程；
核磁共振依据强磁场中原子和对射频辐射的吸收作用，需要用到核磁共振波谱仪进行研究，该方法可以捕捉蛋白质分子动力学，但是仅适用于小分子蛋白；
冷冻电镜是近年来兴起的蛋白质结构测定方法，难以结晶的膜蛋白以及生物大分子复合体可用此方法进行解析。#木木西里# #实验方案# #微生物蛋白#
9.8万元一针 “干细胞治疗”黑市日渐猖獗
经济参考报 2021-04-14
为逐暴利 诊所“偷着干” 美容“忽悠干” 患者“血亏干”
9.8万元一针 “干细胞治疗”黑市日渐猖獗
时下，上网搜索“干细胞治疗”，相关结果比比皆是；联系一些私人诊所、保健品店、海外中介……自称能“做干细胞”的多如牛毛；疗效从抗衰、美容、壮阳，到控糖、复能、抗癌，神通广大、包治百病。
这些市面上价格动辄“9.8万元一针”乃至开价几十上百万的“干细胞治疗”靠谱吗？《经济参考报》记者了解到，干细胞医疗在我国并没有被批准上市，只有数量很少的医疗机构和科研院所获国家备案开展研究。市面上收费“干细胞治疗”，严格意义上均属非法。
《经济参考报》记者深入调查发现，不法“干细胞治疗”很多通过“忽悠式营销”，肆意夸大疗效，刻意隐瞒风险，骗取患者特别是老年人钱财；有“地下实验室”，其疗法就是从患者自身提取细胞或组织，然后再回输患者体内……从“精英人士”到寻常百姓，掉进虚假“干细胞治疗”陷阱的人很多。一些专家呼吁，当前“干细胞黑市”乱象丛生，“疗效炒作”严重误导公众。要让“干细胞治疗”不因为“一粒老鼠屎坏了一锅汤”，亟待“重构”监管机制，改变“守规矩的管得‘死’、不守规矩的管得‘虚’”的现状。
“干细胞治疗”我国迄今无项目获批应用
医界专家介绍，干细胞存在于每个人的体内，每个人从受精卵时期开始，就由干细胞不断地自我复制、分化，进而成长为人。理论上，任何组织器官损伤都可以通过干细胞修复。
中国科学院大学附属肿瘤医院血液科主任谭亚敏介绍，干细胞治疗包括一个广义范畴，造血干细胞移植、间充质干细胞输注术等都属于干细胞疗法。干细胞治疗在血液系统疾病领域运用趋于成熟，此外，在自身免疫系统疾病及部分实体肿瘤等其他系统疾病中，也有使用干细胞疗法的研究。
记者从多个医疗机构了解到，自新冠肺炎（COVID-19）疫情发生以来，我国在抗疫一线开展了干细胞治疗重型、危重型新冠肺炎的临床应用研究，在运用间充质干细胞（MSC）治疗新冠肺炎特别是修复患者肺损伤等方面，取得了一定临床疗效，相关成果令中国科学家备受鼓舞。
在一个中型干细胞治疗研究中心，记者经过严格消杀程序，获准穿上防护服进入一个与外界严密隔离的实验室。医学专家向记者展示了保存干细胞的液氮装置，演示了观察造血干细胞培养的相关操作。实验室负责人说，干细胞研究技术门槛很高，实验室基础设施投入动辄几千万，还需要很多专业人才配备，管理也要极为严格规范。
同济大学附属东方医院院长、干细胞转化医学产业基地主任刘中民教授告诉记者，目前美国在ClinicalTrials（临床试验数据库）注册干细胞临床试验3400多项，是全球开展干细胞临床试验最多的国家；欧洲在ClinicalTrials注册干细胞临床试验1500多项，居其次；我国在ClinicalTrials注册干细胞临床试验467项，可能还有一些干细胞研究没有注册，但全国迄今没有一款干细胞产品或干细胞疗法获批正式应用。
据了解，目前我国对于“干细胞治疗”研究和试验性临床应用，均采取极为审慎的态度。国内获得国家备案的机构，只有120多个，其中有项目的只有100多个。这些机构开展的干细胞临床应用研究，对治疗对象均实行免费（治疗前各类检测费用除外）。只有极少数地方，地方性政策允许收取一点成本费用。
“黑应用”泛滥背后有暴利驱动“推手”
但令人奇怪的是，在线上、线下，“干细胞治疗”似乎已经进入了人们的生活，变得和打羊胎素、用玻尿酸一般司空见惯。通过一些搜索引擎输入“干细胞治疗”，数以万计的搜索结果在电脑和手机上刷屏。走访一些民间医疗机构，干细胞美容、干细胞修复、干细胞整形、干细胞康养……打着“干细胞治疗”旗号的机构比比皆是。
谭亚敏告诉记者，现在，社会上出现了一些命名为“干细胞治疗”的保健方法，以恢复年轻状态、延年益寿等作为宣传，事实上，目前我国并没有批准任何用于保健功能的干细胞产品。
——虚假宣传“干细胞疗法”，欺骗老年人。记者调查发现，社会在进步，人们对健康的关注与需求日益增长，随之也出现了一些关于干细胞及免疫细胞治疗的虚假保健宣传。近年来，湖南、江苏等地查处过多起针对老年人的“干细胞治疗”骗局。
近期，湖南岳阳市市场监管部门查处了一个以“干细胞疗法”为噱头欺骗多名老年人钱财的案子。有群众举报，岳阳楼区一家保健品店违法向老人推销“干细胞疗法”，执法人员调查发现，该店经营范围不具备“干细胞疗法”的任何经营资质，但是为了牟利却向老年人推荐免费进行“干细胞疗法”的试验体验行为。
据办案人员介绍，经调查，2020年12月2日，涉事保健品店负责人赵某某组织岳阳15位老人以游玩、体检等名义参观位于长沙的湖南泰和未来公司。其中受骗人苏奶奶和丈夫听了“工作人员”的宣传介绍，同意进行“干细胞”受试和唾液等方面的体检，并认缴83600元费用，“经过这次试验我觉得身体没有任何好转，后来觉得受骗了，就打了12345热线求助，请岳阳楼区东茅岭市场监管所的工作人员帮忙调查。”
执法人员介绍，目前该案已经立案调查，下一步市场监管部门将联合卫健、公安部门联合查处。执法人员还在走访调查其他受骗老人的情况。
一位执法人员告诉记者，由于干细胞治疗临床应用至今未获得国家相关部门批准，而且存在法律盲区，一些公司和个人往往进行“夹带推销”，就是把“干细胞治疗”宣传放在保健品推销类别里，主要瞄准老年人群体。
——黑实验室里的“干细胞治疗”往往暗藏风险。业内人士指出，一些中介会联系一些医疗实验室进行相关操作，而所谓的“干细胞治疗”，存在着很大风险。
谭亚敏等告诉记者，干细胞及免疫细胞属于血制品，这些产品途径来历不明，输注后存在获得性疾病和免疫排斥反应的风险。
一位知情人士透露，干细胞治疗行业还存在较为严重的质控问题，现在一些机构在开展这个项目的时候普遍是与一些公司合作，而这类公司进行癌症免疫治疗既没有准入标准，也缺乏卫生行政主管部门的有效监管。
“早些年LAK细胞（淋巴因子激活的杀伤细胞）免疫治疗盛行的年代，免疫治疗就是抽点血、加点细胞因子就回输体内，这是非常不规范的。现在一些黑实验室开展这项技术，难免有这样的情况出现。”一位深谙行业“潜规则”的人士告诉记者。
——求长寿、爱虚荣、保权力、搞攀比，盲目追求干细胞治疗成风。记者在浙江、湖南了解到，一些生意人形成了攀比有无打干细胞的风气，彼此间还会相互传递信息，推荐打干细胞“靠谱”、疗效显著的地方，甚至结伴在一些非法机构或者到港澳、国外注射干细胞，彼此交流时也会“比拼”，上个月打了多少万的干细胞，以此宣扬自己的经济实力。
企业老板唯利是图“闷头干”，非法诊所铤而走险“偷着干”，美容机构信口雌黄“忽悠干”，患者群众不明就里“花钱干”……一位临床医生告诉记者，还有一些“达官贵人”前来咨询干细胞疗法提升免疫力，在被正规医疗机构拒绝后，还有人热衷于通过非正常渠道注射干细胞，希望更加年轻有活力，以保证自己对权力和财富的掌控。
“还有些女士为了求美容和青春永驻进行干细胞治疗，这种想法有些幼稚。”谭亚敏特别提醒，现阶段我国没有批准免疫细胞产品用于健康人群。健康人不要迷恋干细胞治疗，如果盲目进行干细胞治疗，可能打乱正常人群生理稳态，导致免疫功能紊乱。
“细胞疗法克癌”小心是贻误治疗的“噱头”
湖南一位肿瘤科医生告诉记者：“有的肿瘤患者子女出于尽孝的观念，帮其寻求干细胞治疗的途径，近年来前来咨询癌症免疫疗法的患者及家属激增。”
记者调研发现，在网络上搜索“癌症免疫疗法”，有高达4200多万条相关信息，各类癌症免疫治疗的广告，更是通过各种渠道进入肿瘤患者及家属的视野。
北京协和医学院基础学院生理学系教授张宏冰告诉记者，目前临床上所用的免疫疗法有细胞疗法和体液疗法，如嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞免疫疗法和免疫检查点抑制剂，通过激活自身免疫系统，杀死癌细胞。
谭亚敏说，免疫疗法是医疗领域里的热点研究方向，例如CAR-T细胞疗法在血液肿瘤里取得了突破性的疗效。在我国，免疫细胞疗法仍属于临床研究项目，患者参与的临床研究需要经过严格的伦理审批和知情同意，并且为免费使用。
记者调查了解到，癌症免疫治疗在20世纪80年代就开始慢慢热起来，中间冷了一段时间，现在又火起来了。免疫疗法普遍费用较高。
一位业内人士说，现在不仅三甲医院，连二级医院甚至县级医院都在做癌症免疫疗法，不少是出于赚钱的考虑。一些地下实验室推出的免疫疗法一个疗程需要3万元左右，有时需要三四个疗程，动辄十多万元。
一些肿瘤患者告诉记者，他们觉得免疫疗法可以提升免疫力，甚至可以治愈癌症。湖南一位肿瘤科医生介绍，一些癌症病人主动要求医生为自己进行治疗，但这种疗法的有效率还待临床研究论证，就现有的临床资料来看仅对部分患者有效。
“目前临床结果表明其效果不一定比化疗、放疗、靶向治疗要好。部分人迷信了所谓干细胞治疗，真正有病的时候不愿去正规医院治疗，贻误治疗时机。”张宏冰认为，癌症免疫疗法可以作为癌症综合治疗和个性化治疗的一种补充手段，提高缓解甚至治愈癌症的可能性。
张宏冰教授提醒，实施癌症免疫疗法后，患者可能出现不同程度的副作用，严重的不良反应可能危及生命，亟待引起警惕。（记者 帅才 苏晓洲 黄筱 长沙）
（责任编辑：杨奕)
经济参考报 2021-04-14
为逐暴利 诊所“偷着干” 美容“忽悠干” 患者“血亏干”
9.8万元一针 “干细胞治疗”黑市日渐猖獗
时下，上网搜索“干细胞治疗”，相关结果比比皆是；联系一些私人诊所、保健品店、海外中介……自称能“做干细胞”的多如牛毛；疗效从抗衰、美容、壮阳，到控糖、复能、抗癌，神通广大、包治百病。
这些市面上价格动辄“9.8万元一针”乃至开价几十上百万的“干细胞治疗”靠谱吗？《经济参考报》记者了解到，干细胞医疗在我国并没有被批准上市，只有数量很少的医疗机构和科研院所获国家备案开展研究。市面上收费“干细胞治疗”，严格意义上均属非法。
《经济参考报》记者深入调查发现，不法“干细胞治疗”很多通过“忽悠式营销”，肆意夸大疗效，刻意隐瞒风险，骗取患者特别是老年人钱财；有“地下实验室”，其疗法就是从患者自身提取细胞或组织，然后再回输患者体内……从“精英人士”到寻常百姓，掉进虚假“干细胞治疗”陷阱的人很多。一些专家呼吁，当前“干细胞黑市”乱象丛生，“疗效炒作”严重误导公众。要让“干细胞治疗”不因为“一粒老鼠屎坏了一锅汤”，亟待“重构”监管机制，改变“守规矩的管得‘死’、不守规矩的管得‘虚’”的现状。
“干细胞治疗”我国迄今无项目获批应用
医界专家介绍，干细胞存在于每个人的体内，每个人从受精卵时期开始，就由干细胞不断地自我复制、分化，进而成长为人。理论上，任何组织器官损伤都可以通过干细胞修复。
中国科学院大学附属肿瘤医院血液科主任谭亚敏介绍，干细胞治疗包括一个广义范畴，造血干细胞移植、间充质干细胞输注术等都属于干细胞疗法。干细胞治疗在血液系统疾病领域运用趋于成熟，此外，在自身免疫系统疾病及部分实体肿瘤等其他系统疾病中，也有使用干细胞疗法的研究。
记者从多个医疗机构了解到，自新冠肺炎（COVID-19）疫情发生以来，我国在抗疫一线开展了干细胞治疗重型、危重型新冠肺炎的临床应用研究，在运用间充质干细胞（MSC）治疗新冠肺炎特别是修复患者肺损伤等方面，取得了一定临床疗效，相关成果令中国科学家备受鼓舞。
在一个中型干细胞治疗研究中心，记者经过严格消杀程序，获准穿上防护服进入一个与外界严密隔离的实验室。医学专家向记者展示了保存干细胞的液氮装置，演示了观察造血干细胞培养的相关操作。实验室负责人说，干细胞研究技术门槛很高，实验室基础设施投入动辄几千万，还需要很多专业人才配备，管理也要极为严格规范。
同济大学附属东方医院院长、干细胞转化医学产业基地主任刘中民教授告诉记者，目前美国在ClinicalTrials（临床试验数据库）注册干细胞临床试验3400多项，是全球开展干细胞临床试验最多的国家；欧洲在ClinicalTrials注册干细胞临床试验1500多项，居其次；我国在ClinicalTrials注册干细胞临床试验467项，可能还有一些干细胞研究没有注册，但全国迄今没有一款干细胞产品或干细胞疗法获批正式应用。
据了解，目前我国对于“干细胞治疗”研究和试验性临床应用，均采取极为审慎的态度。国内获得国家备案的机构，只有120多个，其中有项目的只有100多个。这些机构开展的干细胞临床应用研究，对治疗对象均实行免费（治疗前各类检测费用除外）。只有极少数地方，地方性政策允许收取一点成本费用。
“黑应用”泛滥背后有暴利驱动“推手”
但令人奇怪的是，在线上、线下，“干细胞治疗”似乎已经进入了人们的生活，变得和打羊胎素、用玻尿酸一般司空见惯。通过一些搜索引擎输入“干细胞治疗”，数以万计的搜索结果在电脑和手机上刷屏。走访一些民间医疗机构，干细胞美容、干细胞修复、干细胞整形、干细胞康养……打着“干细胞治疗”旗号的机构比比皆是。
谭亚敏告诉记者，现在，社会上出现了一些命名为“干细胞治疗”的保健方法，以恢复年轻状态、延年益寿等作为宣传，事实上，目前我国并没有批准任何用于保健功能的干细胞产品。
——虚假宣传“干细胞疗法”，欺骗老年人。记者调查发现，社会在进步，人们对健康的关注与需求日益增长，随之也出现了一些关于干细胞及免疫细胞治疗的虚假保健宣传。近年来，湖南、江苏等地查处过多起针对老年人的“干细胞治疗”骗局。
近期，湖南岳阳市市场监管部门查处了一个以“干细胞疗法”为噱头欺骗多名老年人钱财的案子。有群众举报，岳阳楼区一家保健品店违法向老人推销“干细胞疗法”，执法人员调查发现，该店经营范围不具备“干细胞疗法”的任何经营资质，但是为了牟利却向老年人推荐免费进行“干细胞疗法”的试验体验行为。
据办案人员介绍，经调查，2020年12月2日，涉事保健品店负责人赵某某组织岳阳15位老人以游玩、体检等名义参观位于长沙的湖南泰和未来公司。其中受骗人苏奶奶和丈夫听了“工作人员”的宣传介绍，同意进行“干细胞”受试和唾液等方面的体检，并认缴83600元费用，“经过这次试验我觉得身体没有任何好转，后来觉得受骗了，就打了12345热线求助，请岳阳楼区东茅岭市场监管所的工作人员帮忙调查。”
执法人员介绍，目前该案已经立案调查，下一步市场监管部门将联合卫健、公安部门联合查处。执法人员还在走访调查其他受骗老人的情况。
一位执法人员告诉记者，由于干细胞治疗临床应用至今未获得国家相关部门批准，而且存在法律盲区，一些公司和个人往往进行“夹带推销”，就是把“干细胞治疗”宣传放在保健品推销类别里，主要瞄准老年人群体。
——黑实验室里的“干细胞治疗”往往暗藏风险。业内人士指出，一些中介会联系一些医疗实验室进行相关操作，而所谓的“干细胞治疗”，存在着很大风险。
谭亚敏等告诉记者，干细胞及免疫细胞属于血制品，这些产品途径来历不明，输注后存在获得性疾病和免疫排斥反应的风险。
一位知情人士透露，干细胞治疗行业还存在较为严重的质控问题，现在一些机构在开展这个项目的时候普遍是与一些公司合作，而这类公司进行癌症免疫治疗既没有准入标准，也缺乏卫生行政主管部门的有效监管。
“早些年LAK细胞（淋巴因子激活的杀伤细胞）免疫治疗盛行的年代，免疫治疗就是抽点血、加点细胞因子就回输体内，这是非常不规范的。现在一些黑实验室开展这项技术，难免有这样的情况出现。”一位深谙行业“潜规则”的人士告诉记者。
——求长寿、爱虚荣、保权力、搞攀比，盲目追求干细胞治疗成风。记者在浙江、湖南了解到，一些生意人形成了攀比有无打干细胞的风气，彼此间还会相互传递信息，推荐打干细胞“靠谱”、疗效显著的地方，甚至结伴在一些非法机构或者到港澳、国外注射干细胞，彼此交流时也会“比拼”，上个月打了多少万的干细胞，以此宣扬自己的经济实力。
企业老板唯利是图“闷头干”，非法诊所铤而走险“偷着干”，美容机构信口雌黄“忽悠干”，患者群众不明就里“花钱干”……一位临床医生告诉记者，还有一些“达官贵人”前来咨询干细胞疗法提升免疫力，在被正规医疗机构拒绝后，还有人热衷于通过非正常渠道注射干细胞，希望更加年轻有活力，以保证自己对权力和财富的掌控。
“还有些女士为了求美容和青春永驻进行干细胞治疗，这种想法有些幼稚。”谭亚敏特别提醒，现阶段我国没有批准免疫细胞产品用于健康人群。健康人不要迷恋干细胞治疗，如果盲目进行干细胞治疗，可能打乱正常人群生理稳态，导致免疫功能紊乱。
“细胞疗法克癌”小心是贻误治疗的“噱头”
湖南一位肿瘤科医生告诉记者：“有的肿瘤患者子女出于尽孝的观念，帮其寻求干细胞治疗的途径，近年来前来咨询癌症免疫疗法的患者及家属激增。”
记者调研发现，在网络上搜索“癌症免疫疗法”，有高达4200多万条相关信息，各类癌症免疫治疗的广告，更是通过各种渠道进入肿瘤患者及家属的视野。
北京协和医学院基础学院生理学系教授张宏冰告诉记者，目前临床上所用的免疫疗法有细胞疗法和体液疗法，如嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞免疫疗法和免疫检查点抑制剂，通过激活自身免疫系统，杀死癌细胞。
谭亚敏说，免疫疗法是医疗领域里的热点研究方向，例如CAR-T细胞疗法在血液肿瘤里取得了突破性的疗效。在我国，免疫细胞疗法仍属于临床研究项目，患者参与的临床研究需要经过严格的伦理审批和知情同意，并且为免费使用。
记者调查了解到，癌症免疫治疗在20世纪80年代就开始慢慢热起来，中间冷了一段时间，现在又火起来了。免疫疗法普遍费用较高。
一位业内人士说，现在不仅三甲医院，连二级医院甚至县级医院都在做癌症免疫疗法，不少是出于赚钱的考虑。一些地下实验室推出的免疫疗法一个疗程需要3万元左右，有时需要三四个疗程，动辄十多万元。
一些肿瘤患者告诉记者，他们觉得免疫疗法可以提升免疫力，甚至可以治愈癌症。湖南一位肿瘤科医生介绍，一些癌症病人主动要求医生为自己进行治疗，但这种疗法的有效率还待临床研究论证，就现有的临床资料来看仅对部分患者有效。
“目前临床结果表明其效果不一定比化疗、放疗、靶向治疗要好。部分人迷信了所谓干细胞治疗，真正有病的时候不愿去正规医院治疗，贻误治疗时机。”张宏冰认为，癌症免疫疗法可以作为癌症综合治疗和个性化治疗的一种补充手段，提高缓解甚至治愈癌症的可能性。
张宏冰教授提醒，实施癌症免疫疗法后，患者可能出现不同程度的副作用，严重的不良反应可能危及生命，亟待引起警惕。（记者 帅才 苏晓洲 黄筱 长沙）
（责任编辑：杨奕)
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