购买电动车前的一些建议和个人感想
电动车自行车的优缺点
⚡优点:
1、轻便好停放(这用得说嘛),不容易堵车。当你堵车时;当你买菜找了大半天没有车位时;当你找不到车位停车,想着没事,我就买个东西一会儿就行,结果一回来,看到心碎的一幕时;嗯,这个优点无限放大。
2、价格相对摩托来讲,比较便宜(其实我问过的,燃油摩托车和电动摩托车的价格相差不大)
3、节能环保
4、不会太笨重,女孩子也有力气挪动
⚡缺点:
1、充电时间长,一般充满电要7到8小时,可使用时间却不长(我48v的电动车充满电大概可以用2小时多一点点)
2、充电问题复杂,有充电点的小区还好,没有充电点的充电也是个问题
3、安全隐患较高,电动车是有可能自燃的,虽然可能性不高,但是这些年来电动车自燃、过充造成的火灾也不少(在各类火灾发生原因中,电气火灾高居不下),所以充电、停放都要注意
4、速度比较慢,新国标电动自行车最快25km/h
5、后续有更换电池的烦恼,电池用久就会蓄电力减弱,车子续航力越来越弱,上坡和速度受影响,这时候要换电池,嗯,好几百元没了。基本上是2年一换,久一点3年吧,不要听买家吹什么5年一换,你受得了骑2、30分钟左右就要充电吗,不能就只能换电池了。
铅酸电动自行车和锂电动自行车的差别
1、价格上的差别:铅酸比锂电要便宜。
以48v的为例:⚡铅酸电动自行车一般1200—1800左右的可以买到;⚡锂电动自行车可能要2000元起价吧(我曾经问过,车行老板开价2600,就算砍价,2000元左右应该跑不了)。
还有后续的电池更换,每次最少也差个2、300元左右吧(我还没有换电池,价格不怎么了解)
2、重量上的差别:铅酸比锂电要重很多,锂电力气小的女生也不难挪动,铅酸就重了不少(铅酸一般整车近100斤左右),同48v的铅酸电池比锂电池要重个3、40斤左右。
3、充电上的差别:铅酸基本上都是直充,而锂电大部分可以把电池拿出来单独充电,充电十分方便;当然也有可以把电池拿出充电的铅酸电动车,拎着4、50斤的铅酸电池和拎着5、6斤的锂电池去充电,这差别可大了
个人在购买电动车和使用时的一些建议:
1、如果觉得大品牌的电动车价格太高,可以选择有一定知名度但知名度不如大品牌的牌子,这些中等的牌子质量上也是可以的(我自己就买了这种),实际上很多大品牌的电动车也是组装的,只是他们在品控和组件选购上更严格、更有保障。买电动车其实也看运气,同牌子同款式有些人几年不出问题、有些人新车就问题多多
2、尽量选择售后服务态度好的大车行,比较有保障(即使全国连锁店统一保修,你不是那家连锁店买的,服务态度也会不一样的),老牌的小车行也可以,要确保小车行不会开着开着就倒闭和转手呀。(我选择的是一家规模较大的车行,售后服务好,只要车子在县城内任何一个地点出问题,都可以过来帮我把车拉过去修,速度也快。我骑电动车基本上都不会跑太远,这个范围够够的)
3、买电动车可以讲价的,敲重点,管它是不是大品牌,是不是连锁店、专营店,就是可以讲,不要觉得丢脸,讲讲价最少也能少个一两百元,一两百元它不香吗(讲价就看你们自己的本事了)
4、如果是实在讲不来价,那就电池,弄清楚电池的牌子和品质,如果是普通的电池,就跟老板要更好牌子的电池,这点很重要,毕竟电池对车的影响也蛮大的。
5、买车前要沟通好:
⚡(1)保修时间、保修范围,电动车车身和电池是分开保修;距离车行多远可以去把车子拉过去修理(有些车行是有规定几公里内的距离)
⚡(2)问好能给你使用什么电池,虽然后期要更换电池,但是最开始你问了,也许跟老板商量几句,在同一个价位上,可以给你换好一点。
⚡(3)问清楚可不可以试骑,有些车行他是有同款可以试骑的;有的车行在交钱装电池之后,如果当天不满意,可以更换款式的,但基本上装上电池,无质量问题的话是不会给换的;同时问清楚,大约使用多长的时间,发生怎么样程度的质量问题,是可以更换新车或更换新款式。
6、款式上的选择
电动自行车的造型款式基本上都是大同小异的,选自己喜欢的,像东西放置这种功能,有电动车专用的储物小袋子和挂钩可以使用,这些都是可以填补的。
7、以速度来选择的电动车
⚡(1)一种是现在的新国标,就是带脚踏板的那种,时速最大25km/h,我买的时候,车子超过15km/h就会出现提示声音,我让车行帮我剪掉了这个提示声链接,这个问题不大。
⚡(2)一种是时速最大40km/h,不带脚踏板,这种它不算电动自行车,应该被称之为轻摩。(车行的老板跟我说的,也不知道正不正确),这两者的款式大小都差不多。
8、头盔的选择
透明镜片和茶色防晒镜片:
⚡(1)夜间使用比较多的话,个人建议使用透明镜片,不妨碍视线;
⚡(2)在太阳猛烈情况下,如夏季正午使用时间多的人,选择茶色镜片,不用担心妨碍视线,阳光下茶色镜片看东西就像多云的阴天差不多,太阳照射眼睛会让眼睛发疼,视线反而受阻。
9、骑行注意
⚡(1)戴头盔,一定要带头盔,不要戴防晒帽不带头盔,安全很重要
⚡(2)经过路口要慢一点,避免行人突然出现后的急刹车,虽然电动自行车的最大速度不快,但是车身比较轻,急刹车还是有可能翻车和漂移的(有一次,在路口突然间冒出一个行人,我一急刹,整个车就直接漂移了)
⚡(3)停车下车时要小心一点,注意踏板的位置。(我曾经因为没有注意踏板,又穿着高跟鞋骑小电动,高跟鞋鞋跟跟踏板勾上,直接把我摔了,磕破了好大一块皮)
个人感受: 在预售充足和城市政策允许的情况下,又是长期使用,还是买燃油摩托车好,现在摩托车也有做得十分小巧可爱适合女孩子的,普通一些的价格大概在3000—4000元就可以买到(身边有人买过3400元,还有买过2800元的,别问我2800怎么买,我不清楚)
ps:所有建议都是根据我个人购买电动自行车,以及我自己在使用自行车所得到的,有什么问题的话,大家就体谅一下吧。
图片来源于淘宝,如果侵权的话请联系我删除,图片是给大家参考一下,一些电动自行车的款式。
电动车自行车的优缺点
⚡优点:
1、轻便好停放(这用得说嘛),不容易堵车。当你堵车时;当你买菜找了大半天没有车位时;当你找不到车位停车,想着没事,我就买个东西一会儿就行,结果一回来,看到心碎的一幕时;嗯,这个优点无限放大。
2、价格相对摩托来讲,比较便宜(其实我问过的,燃油摩托车和电动摩托车的价格相差不大)
3、节能环保
4、不会太笨重,女孩子也有力气挪动
⚡缺点:
1、充电时间长,一般充满电要7到8小时,可使用时间却不长(我48v的电动车充满电大概可以用2小时多一点点)
2、充电问题复杂,有充电点的小区还好,没有充电点的充电也是个问题
3、安全隐患较高,电动车是有可能自燃的,虽然可能性不高,但是这些年来电动车自燃、过充造成的火灾也不少(在各类火灾发生原因中,电气火灾高居不下),所以充电、停放都要注意
4、速度比较慢,新国标电动自行车最快25km/h
5、后续有更换电池的烦恼,电池用久就会蓄电力减弱,车子续航力越来越弱,上坡和速度受影响,这时候要换电池,嗯,好几百元没了。基本上是2年一换,久一点3年吧,不要听买家吹什么5年一换,你受得了骑2、30分钟左右就要充电吗,不能就只能换电池了。
铅酸电动自行车和锂电动自行车的差别
1、价格上的差别:铅酸比锂电要便宜。
以48v的为例:⚡铅酸电动自行车一般1200—1800左右的可以买到;⚡锂电动自行车可能要2000元起价吧(我曾经问过,车行老板开价2600,就算砍价,2000元左右应该跑不了)。
还有后续的电池更换,每次最少也差个2、300元左右吧(我还没有换电池,价格不怎么了解)
2、重量上的差别:铅酸比锂电要重很多,锂电力气小的女生也不难挪动,铅酸就重了不少(铅酸一般整车近100斤左右),同48v的铅酸电池比锂电池要重个3、40斤左右。
3、充电上的差别:铅酸基本上都是直充,而锂电大部分可以把电池拿出来单独充电,充电十分方便;当然也有可以把电池拿出充电的铅酸电动车,拎着4、50斤的铅酸电池和拎着5、6斤的锂电池去充电,这差别可大了
个人在购买电动车和使用时的一些建议:
1、如果觉得大品牌的电动车价格太高,可以选择有一定知名度但知名度不如大品牌的牌子,这些中等的牌子质量上也是可以的(我自己就买了这种),实际上很多大品牌的电动车也是组装的,只是他们在品控和组件选购上更严格、更有保障。买电动车其实也看运气,同牌子同款式有些人几年不出问题、有些人新车就问题多多
2、尽量选择售后服务态度好的大车行,比较有保障(即使全国连锁店统一保修,你不是那家连锁店买的,服务态度也会不一样的),老牌的小车行也可以,要确保小车行不会开着开着就倒闭和转手呀。(我选择的是一家规模较大的车行,售后服务好,只要车子在县城内任何一个地点出问题,都可以过来帮我把车拉过去修,速度也快。我骑电动车基本上都不会跑太远,这个范围够够的)
3、买电动车可以讲价的,敲重点,管它是不是大品牌,是不是连锁店、专营店,就是可以讲,不要觉得丢脸,讲讲价最少也能少个一两百元,一两百元它不香吗(讲价就看你们自己的本事了)
4、如果是实在讲不来价,那就电池,弄清楚电池的牌子和品质,如果是普通的电池,就跟老板要更好牌子的电池,这点很重要,毕竟电池对车的影响也蛮大的。
5、买车前要沟通好:
⚡(1)保修时间、保修范围,电动车车身和电池是分开保修;距离车行多远可以去把车子拉过去修理(有些车行是有规定几公里内的距离)
⚡(2)问好能给你使用什么电池,虽然后期要更换电池,但是最开始你问了,也许跟老板商量几句,在同一个价位上,可以给你换好一点。
⚡(3)问清楚可不可以试骑,有些车行他是有同款可以试骑的;有的车行在交钱装电池之后,如果当天不满意,可以更换款式的,但基本上装上电池,无质量问题的话是不会给换的;同时问清楚,大约使用多长的时间,发生怎么样程度的质量问题,是可以更换新车或更换新款式。
6、款式上的选择
电动自行车的造型款式基本上都是大同小异的,选自己喜欢的,像东西放置这种功能,有电动车专用的储物小袋子和挂钩可以使用,这些都是可以填补的。
7、以速度来选择的电动车
⚡(1)一种是现在的新国标,就是带脚踏板的那种,时速最大25km/h,我买的时候,车子超过15km/h就会出现提示声音,我让车行帮我剪掉了这个提示声链接,这个问题不大。
⚡(2)一种是时速最大40km/h,不带脚踏板,这种它不算电动自行车,应该被称之为轻摩。(车行的老板跟我说的,也不知道正不正确),这两者的款式大小都差不多。
8、头盔的选择
透明镜片和茶色防晒镜片:
⚡(1)夜间使用比较多的话,个人建议使用透明镜片,不妨碍视线;
⚡(2)在太阳猛烈情况下,如夏季正午使用时间多的人,选择茶色镜片,不用担心妨碍视线,阳光下茶色镜片看东西就像多云的阴天差不多,太阳照射眼睛会让眼睛发疼,视线反而受阻。
9、骑行注意
⚡(1)戴头盔,一定要带头盔,不要戴防晒帽不带头盔,安全很重要
⚡(2)经过路口要慢一点,避免行人突然出现后的急刹车,虽然电动自行车的最大速度不快,但是车身比较轻,急刹车还是有可能翻车和漂移的(有一次,在路口突然间冒出一个行人,我一急刹,整个车就直接漂移了)
⚡(3)停车下车时要小心一点,注意踏板的位置。(我曾经因为没有注意踏板,又穿着高跟鞋骑小电动,高跟鞋鞋跟跟踏板勾上,直接把我摔了,磕破了好大一块皮)
个人感受: 在预售充足和城市政策允许的情况下,又是长期使用,还是买燃油摩托车好,现在摩托车也有做得十分小巧可爱适合女孩子的,普通一些的价格大概在3000—4000元就可以买到(身边有人买过3400元,还有买过2800元的,别问我2800怎么买,我不清楚)
ps:所有建议都是根据我个人购买电动自行车,以及我自己在使用自行车所得到的,有什么问题的话,大家就体谅一下吧。
图片来源于淘宝,如果侵权的话请联系我删除,图片是给大家参考一下,一些电动自行车的款式。
赶紧翻出你手头的哑光白色眼影!信我 拿来当高光效果不是一般的好。
如果你恰好 还没买muf h100 那刚好不用买了,效果一样一样的。
前提是找块粉质好点的!
我用到是pf这盘里的左下色,真的闲置蛮久了这盘,忘记是哪天 突然这么试了一下 效果对比 真的有把我惊到!然后我差不多只要有化妆 就每次都会用这块。
大概的 提亮的位置我p4圈出来了已经,下次化妆一定要去实践一下!
如果你恰好 还没买muf h100 那刚好不用买了,效果一样一样的。
前提是找块粉质好点的!
我用到是pf这盘里的左下色,真的闲置蛮久了这盘,忘记是哪天 突然这么试了一下 效果对比 真的有把我惊到!然后我差不多只要有化妆 就每次都会用这块。
大概的 提亮的位置我p4圈出来了已经,下次化妆一定要去实践一下!
"NCI-H2342 人非小细胞肺癌贴壁细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-157细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞
NFHIOSE-29细胞;细胞背景资料:卵巢;上皮细胞;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:NCM356细胞、NCI-H2029细胞、NCIH1341细胞
ABC1细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:每周换液2次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;相关细胞有:Hs-852-T细胞、Sci-1细胞、R1800[RA]细胞
MHH-CALL2细胞;细胞背景资料:急性B淋巴细胞白血病;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:D-283MED细胞、W133细胞、BE(2)-C细胞
MMAc-Serum Free细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:OCI-Ly18细胞、TE-4细胞、KTCTL140细胞
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:6传代
NCI-H2342 人非小细胞肺癌贴壁细胞系
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
YD15细胞;细胞背景资料:舌鳞癌;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Hs940T细胞、Emory University-2细胞、SKNO-1细胞
MTEC1细胞;细胞背景资料:胸腺;上皮细胞;自发永生;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:HCC-1833细胞、Vero 76 clone E6细胞、HS-294细胞
HUT-125细胞;细胞背景资料:腺鳞状肺癌;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:HEL-92_1_7细胞、hTERT-RPE-1细胞、VeroE6细胞
CF-PAC1细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3-10传代;2-3天换液1次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞
NCI-BL6细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:3-4天换液1次。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样 ;相关细胞有:HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
细胞生长特性:贴壁生长
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞形态特性:上皮样
NCI-BL6细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:3-4天换液1次。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样 ;相关细胞有:HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
IPLB-SF 21AE细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SKO3细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、HCC-2108细胞
RL952细胞;细胞背景资料:这些细胞有α角蛋白,定义明确的连接复合体,张力丝和表面微绒毛。;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:MV-4:11细胞、IA-LM细胞、Sf-21细胞
DH 82细胞;细胞背景资料:肾;Golden Retrieve;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞
TK-10细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3-1:6传代;2-3天换液1次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞
U-343MG细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞
Detroit 562细胞;细胞背景资料:器官:咽头 疾病:癌 取材转移灶:胸水;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:SUDHL6细胞、PaTu 8988s细胞、Hs746T细胞
NCI-H2342 人非小细胞肺癌贴壁细胞系
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水;2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素;3)超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染;4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的喷洒中和,约几小时即可进入操作。
NH-6细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;每周换液2-3次;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;相关细胞有:SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞
MV(4;11)细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:PC12(高分化)细胞、WISH细胞、451-LU细胞
NIH3T3细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞
CMT-93细胞;细胞背景资料:结肠癌;C57BL/ICRF;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
OCI-Ly8细胞;细胞背景资料:弥漫大B淋巴瘤;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:FRTL5细胞、LCMS细胞、NCI-H69细胞
HIMEC细胞;细胞背景资料:肠微血管内皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:NCI-157细胞、2V6.11细胞、SCL-2细胞
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细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-157细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞
NFHIOSE-29细胞;细胞背景资料:卵巢;上皮细胞;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:NCM356细胞、NCI-H2029细胞、NCIH1341细胞
ABC1细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:每周换液2次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;相关细胞有:Hs-852-T细胞、Sci-1细胞、R1800[RA]细胞
MHH-CALL2细胞;细胞背景资料:急性B淋巴细胞白血病;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:D-283MED细胞、W133细胞、BE(2)-C细胞
MMAc-Serum Free细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:OCI-Ly18细胞、TE-4细胞、KTCTL140细胞
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:6传代
NCI-H2342 人非小细胞肺癌贴壁细胞系
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
YD15细胞;细胞背景资料:舌鳞癌;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Hs940T细胞、Emory University-2细胞、SKNO-1细胞
MTEC1细胞;细胞背景资料:胸腺;上皮细胞;自发永生;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:HCC-1833细胞、Vero 76 clone E6细胞、HS-294细胞
HUT-125细胞;细胞背景资料:腺鳞状肺癌;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:HEL-92_1_7细胞、hTERT-RPE-1细胞、VeroE6细胞
CF-PAC1细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3-10传代;2-3天换液1次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞
NCI-BL6细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:3-4天换液1次。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样 ;相关细胞有:HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
细胞生长特性:贴壁生长
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞形态特性:上皮样
NCI-BL6细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:3-4天换液1次。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样 ;相关细胞有:HEC251细胞、TE15细胞、BJ1细胞
IPLB-SF 21AE细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SKO3细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2细胞、HCC-2108细胞
RL952细胞;细胞背景资料:这些细胞有α角蛋白,定义明确的连接复合体,张力丝和表面微绒毛。;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:MV-4:11细胞、IA-LM细胞、Sf-21细胞
DH 82细胞;细胞背景资料:肾;Golden Retrieve;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞
TK-10细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3-1:6传代;2-3天换液1次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞
U-343MG细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:NCI-SNU-601细胞、SW480E细胞、DB细胞
Detroit 562细胞;细胞背景资料:器官:咽头 疾病:癌 取材转移灶:胸水;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:SUDHL6细胞、PaTu 8988s细胞、Hs746T细胞
NCI-H2342 人非小细胞肺癌贴壁细胞系
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水;2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素;3)超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染;4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的喷洒中和,约几小时即可进入操作。
NH-6细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;每周换液2-3次;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;相关细胞有:SKNBE-2细胞、HS0578T细胞、SK-MES1细胞
MV(4;11)细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:PC12(高分化)细胞、WISH细胞、451-LU细胞
NIH3T3细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞
CMT-93细胞;细胞背景资料:结肠癌;C57BL/ICRF;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
OCI-Ly8细胞;细胞背景资料:弥漫大B淋巴瘤;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:FRTL5细胞、LCMS细胞、NCI-H69细胞
HIMEC细胞;细胞背景资料:肠微血管内皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:NCI-157细胞、2V6.11细胞、SCL-2细胞
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