有哪些第一次读到便直击内心的句子?
1、我抓不住这世间的美好,只能装作万事顺遂的模样。
2、人的一生是万里河山,来往无数过客。有人给山河添色,有人使日月无光,有人改他江流,有人塑他梁骨。大限到时,不过是立在山巅,江河回望。
3、你所谓的迷茫,不过是清 地看着自己沉沦。
4、年岁有加并非垂老,理想丢弃方坠暮年。岁月悠悠衰微只及肌肤,热忱抛却颓废必至灵魂。
5、希望我的方向是通往自己想去的地方,而不是所谓对的地方;希望我的力量来自内心,而不是别人的赞扬。
6、碰到一点压力就把自己变成不堪重负的样子,碰到一点不确定性就把前途描摹成黯淡无光的样子,碰到一点不开心就把它搞得似乎是自己这辈子最黑暗的时候,大概都只是为了自己不去走而干脆放弃明天找的最拙劣的借口。
7、我还是得不动声色地走下去,说这天气真好,风又轻柔,还能在斜阳里疲倦的微笑,说人生极平凡也没有什么波折和忧愁。
8、我亦好歌亦好酒,唱与佳人饮与友。
9、既然没温柔,就该留住这点英勇。
10、所谓的花季,就是所有生命没有高低之分,偶然间因缘际会发生了互动关系,可它们又各自离去,它们是知己,它们也是陌路。
11、若能避开猛烈的狂喜,自然也不会有悲痛的来袭。
12、“我们仍需生命的慷慨与繁华相爱,即使岁月以刻薄和荒芜相欺。”
13、我们必须接受失望,因为它是有限的,但千万不可失去希望,因为它是无穷的。——马丁·路德·金
14、所谓现在活着,是鸟儿展翅,是海涛汹涌,是蜗牛爬行,是人在相爱,是你的手温,是生命。——谷川俊太郎《二十亿光年的孤独》
15、每个人一生中都至少应该获得一次全场起立鼓掌的机会,因为我们都胜过这个世界。
16、哀痛和忧伤不是为了倾诉和哭泣,而是为了对抗遗忘。
17、一定要爱着点儿什么,恰似草木对光阴的钟情。
18、任何时候,都有太多东西要学,太多东西要抛弃,太多东西要参与和对抗。
19、杂乱无章的天空下有大片麦田,我没有必要表达悲伤与孤独。——梵高
20、祝这世界继续热闹,祝我仍是我。
21、我步步回头,却也只能往前走。
22、“当你不能够再拥有,你唯一能做的,就是令自己不要忘记。”——《东邪西毒》
23、I like the night,without the dark,we’d never see the stars.
24、向前走吧,沿着你的道路,鲜花将不断开放。——泰戈尔
25、“放弃很可惜,但是有些事坚持下去本就没有意义。”
26、后来,我不再热情似火,也懒得幽默。
27、“迷失的人就迷失了,相遇的人就会再相遇。”——村上春树
28、一腔热血,不知归途。
29、如果有些失去是注定发生的,那就好好走完,这条注定会失去的路。
30、更效清都山水郎,一笑此生开心颜。
31、一样的东西破碎了就是破碎了。我宁愿记住它最好时的模样,而不想把它修补好,然后终生看着那些碎了的地方。——《飘》
32、“你看那天上的云聚了又散,散了又聚,人生离合,亦复如斯,你又何必悲伤。”——金庸
33、可能时光漫长,但旅程的终点还是如约而至,那些与你错开的人群,就像一颗颗流星划过,璀璨了整个回忆。
34、“倘若真的无从避免,倒不如先享受那顽固的欢喜。”
35、永远不要靠得太近 这就是高贵
36、什么事都可以努力,除了喜欢。
37、要单枪匹马的杀出一片光明38、你将用你的余生写一部长诗,只是诗中再不可提及那人一字。——《Lost》
39、“可能时光漫长,但旅程的终点还是如约而至,那些与你错开的人群,就像一颗颗流星划过,璀璨了整个回忆。”
40、顾城先生曾说:你不愿意种花。你说,我不愿看见它,一点点凋落。是的,为了避免结束,你避免了一切开始。
41、“深夜是打开冰箱透出的光亮,是起一罐啤酒清脆的声响,是音响里深沉的嗓音。孤独没有形状,却是无数个你白日的模样。”
42、“我喜爱一切不彻底的事物。细雨中的日光,春天的冷;琥珀里的时间,微暗的火。”
43、我喜欢的少年打天上来,他无意掀翻烛火,点燃我双眸盛满的暮色。
44、你要不顾一切让自己变得漂亮,即使是在那些糟糕的日子里。
45、不是所有人都能功成名就,我们中有些人,注定要在日常生活的点滴中寻找生命的意义。
46、这很寻常,我们相遇,然后分开;兴趣在变化,生活也马不停蹄,于是人群总是匆匆而来再四散而去,就像四季的更迭那般顺理成章。
47、我们这一生,注定看落日多于朝阳,呆在原地多于闯世界。在浑浑噩噩之间,循着一丝光明前行。
48、当你为错过太阳而哭泣的时候,你也要再错过群星了。
49、我在黄昏写下一封书信,载着落日的余辉和银河的浪漫,寄给你,寄给温柔本身。
50、宇宙山河浪漫,生活点滴温暖,都值得你前进。
51、我喜欢田野,而我愚笨。只能植荒十年,换得一时春生。
52、一个人只拥有此生此世是不够的,他还应该拥有诗意的世界。
53、雪沫乳花浮午盏,蓼茸蒿笋试春盘,人间有味是清欢。
54、“我富有天下名山大川,想起来也没什么稀奇的,不过就是一堆烂石头,野河水,浑身上下,大概也就只有这几分真心能上秤卖上二两,你要?拿去。”——Priest《镇魂》
55、“许多夜晚重叠,悄然形成黑暗,玫瑰吸收光芒,大地按捺清香,为了寻找你,我搬进鸟的眼睛,经常盯着路过的风。”
1、我抓不住这世间的美好,只能装作万事顺遂的模样。
2、人的一生是万里河山,来往无数过客。有人给山河添色,有人使日月无光,有人改他江流,有人塑他梁骨。大限到时,不过是立在山巅,江河回望。
3、你所谓的迷茫,不过是清 地看着自己沉沦。
4、年岁有加并非垂老,理想丢弃方坠暮年。岁月悠悠衰微只及肌肤,热忱抛却颓废必至灵魂。
5、希望我的方向是通往自己想去的地方,而不是所谓对的地方;希望我的力量来自内心,而不是别人的赞扬。
6、碰到一点压力就把自己变成不堪重负的样子,碰到一点不确定性就把前途描摹成黯淡无光的样子,碰到一点不开心就把它搞得似乎是自己这辈子最黑暗的时候,大概都只是为了自己不去走而干脆放弃明天找的最拙劣的借口。
7、我还是得不动声色地走下去,说这天气真好,风又轻柔,还能在斜阳里疲倦的微笑,说人生极平凡也没有什么波折和忧愁。
8、我亦好歌亦好酒,唱与佳人饮与友。
9、既然没温柔,就该留住这点英勇。
10、所谓的花季,就是所有生命没有高低之分,偶然间因缘际会发生了互动关系,可它们又各自离去,它们是知己,它们也是陌路。
11、若能避开猛烈的狂喜,自然也不会有悲痛的来袭。
12、“我们仍需生命的慷慨与繁华相爱,即使岁月以刻薄和荒芜相欺。”
13、我们必须接受失望,因为它是有限的,但千万不可失去希望,因为它是无穷的。——马丁·路德·金
14、所谓现在活着,是鸟儿展翅,是海涛汹涌,是蜗牛爬行,是人在相爱,是你的手温,是生命。——谷川俊太郎《二十亿光年的孤独》
15、每个人一生中都至少应该获得一次全场起立鼓掌的机会,因为我们都胜过这个世界。
16、哀痛和忧伤不是为了倾诉和哭泣,而是为了对抗遗忘。
17、一定要爱着点儿什么,恰似草木对光阴的钟情。
18、任何时候,都有太多东西要学,太多东西要抛弃,太多东西要参与和对抗。
19、杂乱无章的天空下有大片麦田,我没有必要表达悲伤与孤独。——梵高
20、祝这世界继续热闹,祝我仍是我。
21、我步步回头,却也只能往前走。
22、“当你不能够再拥有,你唯一能做的,就是令自己不要忘记。”——《东邪西毒》
23、I like the night,without the dark,we’d never see the stars.
24、向前走吧,沿着你的道路,鲜花将不断开放。——泰戈尔
25、“放弃很可惜,但是有些事坚持下去本就没有意义。”
26、后来,我不再热情似火,也懒得幽默。
27、“迷失的人就迷失了,相遇的人就会再相遇。”——村上春树
28、一腔热血,不知归途。
29、如果有些失去是注定发生的,那就好好走完,这条注定会失去的路。
30、更效清都山水郎,一笑此生开心颜。
31、一样的东西破碎了就是破碎了。我宁愿记住它最好时的模样,而不想把它修补好,然后终生看着那些碎了的地方。——《飘》
32、“你看那天上的云聚了又散,散了又聚,人生离合,亦复如斯,你又何必悲伤。”——金庸
33、可能时光漫长,但旅程的终点还是如约而至,那些与你错开的人群,就像一颗颗流星划过,璀璨了整个回忆。
34、“倘若真的无从避免,倒不如先享受那顽固的欢喜。”
35、永远不要靠得太近 这就是高贵
36、什么事都可以努力,除了喜欢。
37、要单枪匹马的杀出一片光明38、你将用你的余生写一部长诗,只是诗中再不可提及那人一字。——《Lost》
39、“可能时光漫长,但旅程的终点还是如约而至,那些与你错开的人群,就像一颗颗流星划过,璀璨了整个回忆。”
40、顾城先生曾说:你不愿意种花。你说,我不愿看见它,一点点凋落。是的,为了避免结束,你避免了一切开始。
41、“深夜是打开冰箱透出的光亮,是起一罐啤酒清脆的声响,是音响里深沉的嗓音。孤独没有形状,却是无数个你白日的模样。”
42、“我喜爱一切不彻底的事物。细雨中的日光,春天的冷;琥珀里的时间,微暗的火。”
43、我喜欢的少年打天上来,他无意掀翻烛火,点燃我双眸盛满的暮色。
44、你要不顾一切让自己变得漂亮,即使是在那些糟糕的日子里。
45、不是所有人都能功成名就,我们中有些人,注定要在日常生活的点滴中寻找生命的意义。
46、这很寻常,我们相遇,然后分开;兴趣在变化,生活也马不停蹄,于是人群总是匆匆而来再四散而去,就像四季的更迭那般顺理成章。
47、我们这一生,注定看落日多于朝阳,呆在原地多于闯世界。在浑浑噩噩之间,循着一丝光明前行。
48、当你为错过太阳而哭泣的时候,你也要再错过群星了。
49、我在黄昏写下一封书信,载着落日的余辉和银河的浪漫,寄给你,寄给温柔本身。
50、宇宙山河浪漫,生活点滴温暖,都值得你前进。
51、我喜欢田野,而我愚笨。只能植荒十年,换得一时春生。
52、一个人只拥有此生此世是不够的,他还应该拥有诗意的世界。
53、雪沫乳花浮午盏,蓼茸蒿笋试春盘,人间有味是清欢。
54、“我富有天下名山大川,想起来也没什么稀奇的,不过就是一堆烂石头,野河水,浑身上下,大概也就只有这几分真心能上秤卖上二两,你要?拿去。”——Priest《镇魂》
55、“许多夜晚重叠,悄然形成黑暗,玫瑰吸收光芒,大地按捺清香,为了寻找你,我搬进鸟的眼睛,经常盯着路过的风。”
PC12高分化 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞 高分化
产品概述
细胞描述:
该细胞系来自能移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤。这些细胞表达神经生长因子(NGF)受体。NGF可诱导产生神经表型。这些细胞不合成肾上腺素。
细胞特性:
1) 来源:大鼠,雄性,肾,肾上腺嗜铬细胞瘤
2) 形态:梭形,多角形,贴壁生长
3) 规格:1×106cells
4) 培养条件:RPMI-1640+10%优质胎牛血清+双抗1%
空气,95%;二氧化碳,5%
37℃
特殊说明:
培养箱湿度:70%-80%。
细胞接收后的处理:
1) 收到细胞后,活细胞首先观察培养瓶是否完好,培养液是否漏液,培养基是否浑浊;冻存细胞是否干冰已挥发完,冻存管盖是否脱落,破碎,若有这类情况,请务必拍照记录,并于收货24h内与我们联系。
2) 细胞处理:
复苏的细胞:如果是T-25培养瓶活细胞,收到后请用75%的酒精对培养瓶表面进行消毒处理,然后转入培养箱中静置2~3h后再进行后续处理。
备注:运输用的培养基不宜再次用来培养细胞,请按照说明书新配置完全培养基来培养细胞。
冻存细胞:如果是干冰运输的冻存细胞,收到后请立即转入液氮存储或者短暂(24h)放置-80度冰箱保存,或者直接进行细胞复苏。
细胞复苏、传代及冻存流程参考:
1、 细胞复苏
1) 配制完全培养基:基础培养基+胎牛血清+双抗(特殊培养基特殊配置);
2) 细胞复苏:取5ml完全培养基于15ml离心管中,37℃水浴锅预热,从液氮管(或者-80度冰箱)中快速取出冻存的细胞,放入37℃水浴锅中,摇晃使快速化冻(1min左右),然后将化冻的细胞和预热的培养基,移入超净工作台中,化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3) 吸弃上清,得到细胞沉淀,用2ml完全培养基轻轻重悬细胞,加入到T25培养瓶中,做好标记,放入37℃,5%CO2饱和适度培养箱中培养(培养皿复苏效果更好);
4) 24h后,观察细胞贴壁情况(未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞),吸弃旧培养基,加入新鲜的预热(室温或37℃)的完全培养基,继续培养。
2、 细胞传代
1) 待细胞生长到80%-90%汇合度时,吸弃旧的培养基,加入1ml无菌PBS润洗一次,以去除残余的培养基及血清(血清含有胰酶的抑制因子),然后加入1ml 0.25%胰酶,37℃培养箱中消化(1~2min左右,不同细胞消化时间不同),取出细胞,镜下观察细胞至细胞皱缩变圆;
2) 加入1ml完全培养基(含FBS)终止消化,轻轻拍打,使细胞脱落下来成单个细胞悬液,收集细胞于15ml无菌离心管中,1000rpm,离心5min;
3) 收集细胞沉淀,完全培养基重悬,一分为二(可根据细胞生长速度调整比例),分别加入到2个新的培养瓶中,做好标记,放入培养箱中培养。
3、细胞冻存
1) 按照细胞传代方法,在超净工作台内消化收集细胞沉淀,取少量细胞用于计数;
2) 用预冷的1ml冻存液(90%完全培养基+10%DMSO)或者无血清细胞冻存液重悬细胞,加入到1.2ml冻存管中,密度为1*106个/ml。
3) 放入程序冻存盒,-80℃过夜后,转入液氮长期保存。
产品概述
细胞描述:
该细胞系来自能移植的雄性大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤。这些细胞表达神经生长因子(NGF)受体。NGF可诱导产生神经表型。这些细胞不合成肾上腺素。
细胞特性:
1) 来源:大鼠,雄性,肾,肾上腺嗜铬细胞瘤
2) 形态:梭形,多角形,贴壁生长
3) 规格:1×106cells
4) 培养条件:RPMI-1640+10%优质胎牛血清+双抗1%
空气,95%;二氧化碳,5%
37℃
特殊说明:
培养箱湿度:70%-80%。
细胞接收后的处理:
1) 收到细胞后,活细胞首先观察培养瓶是否完好,培养液是否漏液,培养基是否浑浊;冻存细胞是否干冰已挥发完,冻存管盖是否脱落,破碎,若有这类情况,请务必拍照记录,并于收货24h内与我们联系。
2) 细胞处理:
复苏的细胞:如果是T-25培养瓶活细胞,收到后请用75%的酒精对培养瓶表面进行消毒处理,然后转入培养箱中静置2~3h后再进行后续处理。
备注:运输用的培养基不宜再次用来培养细胞,请按照说明书新配置完全培养基来培养细胞。
冻存细胞:如果是干冰运输的冻存细胞,收到后请立即转入液氮存储或者短暂(24h)放置-80度冰箱保存,或者直接进行细胞复苏。
细胞复苏、传代及冻存流程参考:
1、 细胞复苏
1) 配制完全培养基:基础培养基+胎牛血清+双抗(特殊培养基特殊配置);
2) 细胞复苏:取5ml完全培养基于15ml离心管中,37℃水浴锅预热,从液氮管(或者-80度冰箱)中快速取出冻存的细胞,放入37℃水浴锅中,摇晃使快速化冻(1min左右),然后将化冻的细胞和预热的培养基,移入超净工作台中,化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3) 吸弃上清,得到细胞沉淀,用2ml完全培养基轻轻重悬细胞,加入到T25培养瓶中,做好标记,放入37℃,5%CO2饱和适度培养箱中培养(培养皿复苏效果更好);
4) 24h后,观察细胞贴壁情况(未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞),吸弃旧培养基,加入新鲜的预热(室温或37℃)的完全培养基,继续培养。
2、 细胞传代
1) 待细胞生长到80%-90%汇合度时,吸弃旧的培养基,加入1ml无菌PBS润洗一次,以去除残余的培养基及血清(血清含有胰酶的抑制因子),然后加入1ml 0.25%胰酶,37℃培养箱中消化(1~2min左右,不同细胞消化时间不同),取出细胞,镜下观察细胞至细胞皱缩变圆;
2) 加入1ml完全培养基(含FBS)终止消化,轻轻拍打,使细胞脱落下来成单个细胞悬液,收集细胞于15ml无菌离心管中,1000rpm,离心5min;
3) 收集细胞沉淀,完全培养基重悬,一分为二(可根据细胞生长速度调整比例),分别加入到2个新的培养瓶中,做好标记,放入培养箱中培养。
3、细胞冻存
1) 按照细胞传代方法,在超净工作台内消化收集细胞沉淀,取少量细胞用于计数;
2) 用预冷的1ml冻存液(90%完全培养基+10%DMSO)或者无血清细胞冻存液重悬细胞,加入到1.2ml冻存管中,密度为1*106个/ml。
3) 放入程序冻存盒,-80℃过夜后,转入液氮长期保存。
热销细胞[打call][打call]:HCT-116 (人结肠癌细胞)[送花花][送花花]
产品概述
细胞描述:
HCT116是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞之一。在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致瘤性,形成上皮样的肿瘤。
细胞特性:
1) 来源:人类,男性,结肠 ,大肠癌
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 规格:1×106cells
4) 培养条件:McCOY's 5A培养基+10%优质胎牛血清+双抗1%
空气,95%;二氧化碳,5%
37℃
细胞接收后的处理:
1) 收到细胞后,活细胞首先观察培养瓶是否完好,培养液是否漏液,培养基是否浑浊;冻存细胞是否干冰已挥发完,冻存管盖是否脱落,破碎,若有这类情况,请务必拍照记录,并于收货24h内与我们联系。
2) 细胞处理:
复苏的细胞:如果是T-25培养瓶活细胞,收到后请用75%的酒精对培养瓶表面进行消毒处理,然后转入培养箱中静置2~3h后再进行后续处理。
备注:运输用的培养基不宜再次用来培养细胞,请按照说明书新配置完全培养基来培养细胞。
冻存细胞:如果是干冰运输的冻存细胞,收到后请立即转入液氮存储或者短暂(24h)放置-80度冰箱保存,或者直接进行细胞复苏。
细胞复苏、传代及冻存流程参考:
1、 细胞复苏
1) 配制完全培养基:基础培养基+胎牛血清+双抗(特殊培养基特殊配置);
2) 细胞复苏:取5ml完全培养基于15ml离心管中,37℃水浴锅预热,从液氮管(或者-80度冰箱)中快速取出冻存的细胞,放入37℃水浴锅中,摇晃使快速化冻(1min左右),然后将化冻的细胞和预热的培养基,移入超净工作台中,化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3) 吸弃上清,得到细胞沉淀,用2ml完全培养基轻轻重悬细胞,加入到T25培养瓶中,做好标记,放入37℃,5%CO2饱和适度培养箱中培养(培养皿复苏效果更好);
4) 24h后,观察细胞贴壁情况(未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞),吸弃旧培养基,加入新鲜的预热(室温或37℃)的完全培养基,继续培养。
2、 细胞传代
1) 待细胞生长到80%-90%汇合度时,吸弃旧的培养基,加入1ml无菌PBS润洗一次,以去除残余的培养基及血清(血清含有胰酶的抑制因子),然后加入1ml 0.25%胰酶,37℃培养箱中消化(1~2min左右,不同细胞消化时间不同),取出细胞,镜下观察细胞至细胞皱缩变圆;
2) 加入1ml完全培养基(含FBS)终止消化,轻轻拍打,使细胞脱落下来成单个细胞悬液,收集细胞于15ml无菌离心管中,1000rpm,离心5min;
3) 收集细胞沉淀,完全培养基重悬,一分为二(可根据细胞生长速度调整比例),分别加入到2个新的培养瓶中,做好标记,放入培养箱中培养。
3、细胞冻存
1) 按照细胞传代方法,在超净工作台内消化收集细胞沉淀,取少量细胞用于计数;
2) 用预冷的1ml冻存液(90%完全培养基+10%DMSO)或者无血清细胞冻存液重悬细胞,加入到1.2ml冻存管中,密度为1*106个/ml。
3) 放入程序冻存盒,-80℃过夜后,转入液氮长期保存。
产品概述
细胞描述:
HCT116是1979年M.Brattain等从患结肠癌的男性病人中分离的三株恶性细胞之一。在半固体琼脂糖培养基中形成克隆。HCT116在无胸腺的裸鼠有致瘤性,形成上皮样的肿瘤。
细胞特性:
1) 来源:人类,男性,结肠 ,大肠癌
2) 形态:上皮细胞样,贴壁生长
3) 规格:1×106cells
4) 培养条件:McCOY's 5A培养基+10%优质胎牛血清+双抗1%
空气,95%;二氧化碳,5%
37℃
细胞接收后的处理:
1) 收到细胞后,活细胞首先观察培养瓶是否完好,培养液是否漏液,培养基是否浑浊;冻存细胞是否干冰已挥发完,冻存管盖是否脱落,破碎,若有这类情况,请务必拍照记录,并于收货24h内与我们联系。
2) 细胞处理:
复苏的细胞:如果是T-25培养瓶活细胞,收到后请用75%的酒精对培养瓶表面进行消毒处理,然后转入培养箱中静置2~3h后再进行后续处理。
备注:运输用的培养基不宜再次用来培养细胞,请按照说明书新配置完全培养基来培养细胞。
冻存细胞:如果是干冰运输的冻存细胞,收到后请立即转入液氮存储或者短暂(24h)放置-80度冰箱保存,或者直接进行细胞复苏。
细胞复苏、传代及冻存流程参考:
1、 细胞复苏
1) 配制完全培养基:基础培养基+胎牛血清+双抗(特殊培养基特殊配置);
2) 细胞复苏:取5ml完全培养基于15ml离心管中,37℃水浴锅预热,从液氮管(或者-80度冰箱)中快速取出冻存的细胞,放入37℃水浴锅中,摇晃使快速化冻(1min左右),然后将化冻的细胞和预热的培养基,移入超净工作台中,化冻的细胞加入到含预热培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3) 吸弃上清,得到细胞沉淀,用2ml完全培养基轻轻重悬细胞,加入到T25培养瓶中,做好标记,放入37℃,5%CO2饱和适度培养箱中培养(培养皿复苏效果更好);
4) 24h后,观察细胞贴壁情况(未贴壁的即为死细胞--针对贴壁细胞),吸弃旧培养基,加入新鲜的预热(室温或37℃)的完全培养基,继续培养。
2、 细胞传代
1) 待细胞生长到80%-90%汇合度时,吸弃旧的培养基,加入1ml无菌PBS润洗一次,以去除残余的培养基及血清(血清含有胰酶的抑制因子),然后加入1ml 0.25%胰酶,37℃培养箱中消化(1~2min左右,不同细胞消化时间不同),取出细胞,镜下观察细胞至细胞皱缩变圆;
2) 加入1ml完全培养基(含FBS)终止消化,轻轻拍打,使细胞脱落下来成单个细胞悬液,收集细胞于15ml无菌离心管中,1000rpm,离心5min;
3) 收集细胞沉淀,完全培养基重悬,一分为二(可根据细胞生长速度调整比例),分别加入到2个新的培养瓶中,做好标记,放入培养箱中培养。
3、细胞冻存
1) 按照细胞传代方法,在超净工作台内消化收集细胞沉淀,取少量细胞用于计数;
2) 用预冷的1ml冻存液(90%完全培养基+10%DMSO)或者无血清细胞冻存液重悬细胞,加入到1.2ml冻存管中,密度为1*106个/ml。
3) 放入程序冻存盒,-80℃过夜后,转入液氮长期保存。
✋热门推荐