Punk OS 踩坑之 Dart 下的 Unix Socket 通信。
在分布式状态管理器中,之前已经调通:Client(Desktop)成功从 Server(手机)获取到站点列表,尽管目前只录入了一个站点,一切工作正常。
于是继续开发资讯列表,这里踩到坑了。
因为 RSS 下的资讯有很多条,在 Server 上发起请求,转成一个 JSON List,通过 JSON RPC 发送到 Client 上。问题出现了,发不回来。
于是把状态管理层、RPC 层、JSON RPC 库、Socket C/S,捋了一大圈,都没啥问题。
这时候经验发挥作用了,我意识到,传输小数据 OK,数据变大之后就不行了。于是我尝试只返回 Info List 中的第一条,发送成功!(如图)。
问题就明朗了,搜了一下,果然:Dart 的 Socket 实现会拆包,如果数据量大于 1KB,会拆成多个包进行发送。
而我的第三方 JSON RPC 库,它是传输层无关的,也就是说拆包合包是我的工作,而我没有做。于是当数据量大了之后,它收到的是残缺的 JSON,所以无法正确工作。
解决方法也比较简单:在 Socket 传输层上加一个拆包合包机制,再给到 JSON RPC。我需要定制一个终止符,在 Client 发送时,末尾拼接上这个终止符。在 Server 接收时,不断收 package,对包数据缓存拼接,等终止符来到后再一股脑给到上层。
基于 Steam 流的设计模式,这个是很容易实现的,只需要对流加一个操作符即可。
在分布式状态管理器中,之前已经调通:Client(Desktop)成功从 Server(手机)获取到站点列表,尽管目前只录入了一个站点,一切工作正常。
于是继续开发资讯列表,这里踩到坑了。
因为 RSS 下的资讯有很多条,在 Server 上发起请求,转成一个 JSON List,通过 JSON RPC 发送到 Client 上。问题出现了,发不回来。
于是把状态管理层、RPC 层、JSON RPC 库、Socket C/S,捋了一大圈,都没啥问题。
这时候经验发挥作用了,我意识到,传输小数据 OK,数据变大之后就不行了。于是我尝试只返回 Info List 中的第一条,发送成功!(如图)。
问题就明朗了,搜了一下,果然:Dart 的 Socket 实现会拆包,如果数据量大于 1KB,会拆成多个包进行发送。
而我的第三方 JSON RPC 库,它是传输层无关的,也就是说拆包合包是我的工作,而我没有做。于是当数据量大了之后,它收到的是残缺的 JSON,所以无法正确工作。
解决方法也比较简单:在 Socket 传输层上加一个拆包合包机制,再给到 JSON RPC。我需要定制一个终止符,在 Client 发送时,末尾拼接上这个终止符。在 Server 接收时,不断收 package,对包数据缓存拼接,等终止符来到后再一股脑给到上层。
基于 Steam 流的设计模式,这个是很容易实现的,只需要对流加一个操作符即可。
PCR常见的几种方法简介
PCR实验包括三大主要的热循环步骤 整个过程包括:变性、退火、延伸。在这个过程中需要多种必要的反应成分 ,通过对PCR的设置做相应的调整,便可以获得一些特殊的实验结果,如产率提高,特异性增强或反应时间缩短等
热启动PCR:常用于增强PCR扩增的特异性。通过借助一酶的修饰物来抑制某一种基本成分延迟DNA合成,直到PCR仪达到变性温度。这种修饰可避免产生非特异性扩增。由于DNA聚合酶在室温下的活性被抑制,热启动技术为在室温下配制多个PCR反应体系提供了极大的便利,且无需牺牲PCR反应的特异性。
降落PCR:另一种提升PCR反应特异性的方法是调整PCR循环的参数。在降落PCR中,前几个循环的退火温度设定为比引物的最高退火温度(Tm)再高几度,较高的温度有助于避免产生引物二聚体及非特异性引物-模板复合物的形成,因此可减少不希望出现的非目的扩增。在PCR起始阶段用较高的退火温度可减少非特异性PCR产物,促进特异性的扩增。
巢式PCR:巢式PCR是标准PCR的一种演变,其增强了反应特异性和目标扩增子的产量。在此方法中,需要设计两对PCR引物,一对外引物,一对巢式引物。需进行进行2轮PCR扩增,第一轮PCR的产物作为第二轮PCR的模板。
快速PCR:通过缩减PCR反应步骤所需的时间来完成更快的扩增,此条件特别适用于有高扩增能力的DNA聚合酶,这类聚合酶在每个结合中可引入更多的核苷酸。
Taq DNA聚合酶系列产品经过多步纯化精制而得。使用本产品扩增得到的PCR产物3′端带A碱基,可克隆至T载体。操作简单,扩增效果稳定,可实现1kb/30s延伸速度。
PCR实验包括三大主要的热循环步骤 整个过程包括:变性、退火、延伸。在这个过程中需要多种必要的反应成分 ,通过对PCR的设置做相应的调整,便可以获得一些特殊的实验结果,如产率提高,特异性增强或反应时间缩短等
热启动PCR:常用于增强PCR扩增的特异性。通过借助一酶的修饰物来抑制某一种基本成分延迟DNA合成,直到PCR仪达到变性温度。这种修饰可避免产生非特异性扩增。由于DNA聚合酶在室温下的活性被抑制,热启动技术为在室温下配制多个PCR反应体系提供了极大的便利,且无需牺牲PCR反应的特异性。
降落PCR:另一种提升PCR反应特异性的方法是调整PCR循环的参数。在降落PCR中,前几个循环的退火温度设定为比引物的最高退火温度(Tm)再高几度,较高的温度有助于避免产生引物二聚体及非特异性引物-模板复合物的形成,因此可减少不希望出现的非目的扩增。在PCR起始阶段用较高的退火温度可减少非特异性PCR产物,促进特异性的扩增。
巢式PCR:巢式PCR是标准PCR的一种演变,其增强了反应特异性和目标扩增子的产量。在此方法中,需要设计两对PCR引物,一对外引物,一对巢式引物。需进行进行2轮PCR扩增,第一轮PCR的产物作为第二轮PCR的模板。
快速PCR:通过缩减PCR反应步骤所需的时间来完成更快的扩增,此条件特别适用于有高扩增能力的DNA聚合酶,这类聚合酶在每个结合中可引入更多的核苷酸。
Taq DNA聚合酶系列产品经过多步纯化精制而得。使用本产品扩增得到的PCR产物3′端带A碱基,可克隆至T载体。操作简单,扩增效果稳定,可实现1kb/30s延伸速度。
高保真酶和Taq酶,到底用什么好?
DNA聚合酶是PCR反应中的核心,大家欣喜于最初在水生栖热菌中提取出的Taq酶,也逐渐不满足于原有的酶的性能。随着应用领域的扩大,科技水平的不断提升,市场对DNA聚合酶的保真性、特异性、灵敏性都提出了更严苛的要求,而高保真酶的出现恰恰满足了人们的需求。下面小编将为大家简要介绍一下关于高保真酶的那点事儿。
高保真酶是一种说起来也是Taq酶的一种,它的独特之处就在于具有校读功能,可以利用自身3’至5’端的的外切酶活性识别并切除错配的碱基,从而实现进行自我校正,大幅降低错配率。当普通Taq酶错配率较高,不适用于长片段扩增、基因突变研究、测序等高度精确的试验需求时,我们就需要一款可靠的高保真酶帮助我们完成试验。
但是由于高保真酶具有外切酶活性,一边扩,一边切,这就导致它最大的缺点就是扩增效率低,扩增时间长,在日常使用中,我们可以通过延长PCR反应中的延伸时间,以及增加体系中的用量来尽量达到我们的预期目的。所以当实验对保真性要求不高时,我们首选还是高效率、低成本的Taq酶。
相信大家看到这里,对选择普通Taq酶还是高保真酶有了一定的把握。当然,作为用户当然想找到一款又有高保真性,又能快速高效扩增的“全能”酶了,三狮生物利用基因工程改造并研发的2×HIProof 2G PCR Mix(with dye)——含染料的高保真酶预混液,包含了高保真酶,dNTPs、MgCl2、上样染料等多个组分,体系稳定,超高保真。保真度为Pfu酶的8倍,是普通Taq酶的60倍;简单模板扩增速度可以达到1kb/15s,复杂模板可以达到1kb/15-30s,反应又快又好;还具有高灵敏性,耐扩增抑制因子等典型优势;一管式的人性化设计,有效规避污染风险,还更方便快捷,还不快来试一下!
DNA聚合酶是PCR反应中的核心,大家欣喜于最初在水生栖热菌中提取出的Taq酶,也逐渐不满足于原有的酶的性能。随着应用领域的扩大,科技水平的不断提升,市场对DNA聚合酶的保真性、特异性、灵敏性都提出了更严苛的要求,而高保真酶的出现恰恰满足了人们的需求。下面小编将为大家简要介绍一下关于高保真酶的那点事儿。
高保真酶是一种说起来也是Taq酶的一种,它的独特之处就在于具有校读功能,可以利用自身3’至5’端的的外切酶活性识别并切除错配的碱基,从而实现进行自我校正,大幅降低错配率。当普通Taq酶错配率较高,不适用于长片段扩增、基因突变研究、测序等高度精确的试验需求时,我们就需要一款可靠的高保真酶帮助我们完成试验。
但是由于高保真酶具有外切酶活性,一边扩,一边切,这就导致它最大的缺点就是扩增效率低,扩增时间长,在日常使用中,我们可以通过延长PCR反应中的延伸时间,以及增加体系中的用量来尽量达到我们的预期目的。所以当实验对保真性要求不高时,我们首选还是高效率、低成本的Taq酶。
相信大家看到这里,对选择普通Taq酶还是高保真酶有了一定的把握。当然,作为用户当然想找到一款又有高保真性,又能快速高效扩增的“全能”酶了,三狮生物利用基因工程改造并研发的2×HIProof 2G PCR Mix(with dye)——含染料的高保真酶预混液,包含了高保真酶,dNTPs、MgCl2、上样染料等多个组分,体系稳定,超高保真。保真度为Pfu酶的8倍,是普通Taq酶的60倍;简单模板扩增速度可以达到1kb/15s,复杂模板可以达到1kb/15-30s,反应又快又好;还具有高灵敏性,耐扩增抑制因子等典型优势;一管式的人性化设计,有效规避污染风险,还更方便快捷,还不快来试一下!
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