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检测仪一直是绿之源的主打品类之一
【全新i系列】
首发新品——空气派
是一款集甲醛、TVOC、二氧化碳监测
包含日历、时间、温湿度的大屏检测仪
具备九大核心优势
是您不可或缺的专业桌面空气管家
搭载高敏度进口传感器+芯片
准确识别甲醛、TVOC等有害物
三面开孔,感受气体自然流动
让传感器更加容易接触到空气
从而是数据精准到0.001千分位
二氧化碳的浓度会对人造成负面影响
数值轻微上升时
会使人出现疲惫、易躁和异常情绪
继续任它上升,甚至会引起昏睡
三色阶段式警示当前二氧化碳数值
一旦超标,自动响铃预警
提示家人勤通风,呼吸新鲜空气
温湿度过高或过低,除了造成体感不适外
大幅度增加了病菌滋生、存活及传播的风险
对婴幼儿、中老年等病症易发群体造成影响
时刻关注室内的温度、湿度变化
让家保持宜居的体感
屏虽大,待机时间不拉胯
内置2000MAH锂电池
充电只需2小时、待机长达38小时
屏幕的亮度可以调节,亮点暗点您随意
屏幕自动进入省电模式后
轻轻一按随时唤醒
大屏幕,大数字
年轻人看着方便,老年人看得清晰
操作也很“傻瓜”式
一共只有四个按钮
通过“+”、“-”按键就能完成简单的设置
用起来十分便捷
简约大方的设计
让它能够融入各种装修风格的家庭
尤其推荐老人众多的养老院
人员密集的办公室、教室
以及孩子独自居住的儿童房
【全新i系列】
首发新品——空气派
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从而是数据精准到0.001千分位
二氧化碳的浓度会对人造成负面影响
数值轻微上升时
会使人出现疲惫、易躁和异常情绪
继续任它上升,甚至会引起昏睡
三色阶段式警示当前二氧化碳数值
一旦超标,自动响铃预警
提示家人勤通风,呼吸新鲜空气
温湿度过高或过低,除了造成体感不适外
大幅度增加了病菌滋生、存活及传播的风险
对婴幼儿、中老年等病症易发群体造成影响
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内置2000MAH锂电池
充电只需2小时、待机长达38小时
屏幕的亮度可以调节,亮点暗点您随意
屏幕自动进入省电模式后
轻轻一按随时唤醒
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一共只有四个按钮
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尤其推荐老人众多的养老院
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以及孩子独自居住的儿童房
关于李记EZ Trans Plus 细胞转染试剂(Ⅱ)使用方法,请签收这份干货哟~~
首先为大家简述一下何为EZ Trans Plus 细胞转染试剂(Ⅱ)
它作为新一代的转染试剂,其转染原理是带正电的聚合物与核酸分 子的带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后,与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用,并通过胞吞作用 进入细胞。
使用方法(24孔板为例)
1. 接种细胞
对于贴壁细胞,转染前 18-24 h 进行铺板(不含抗生素),使其在转染时的密度大约在 80%左右。对于悬浮细胞,转染当天,在配制 EZ Trans-DNA 复合物之前进行铺板,每 500 µL 生长培养基中加入 4~8×10 5cells。
【注】:培养液中的血清不影响转染效率。转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。
2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物
(1)对于每孔细胞,将 1 μg 质粒 DNA 稀释到 40 μL 无血清的高糖 DMEM 培养基(或 OPTI-MEM I 培养基),混匀。
(2)对于每孔细胞,将 3 μL EZ Trans 转染试剂稀释到 40 μL 无血清的高糖 DMEM 培养基(或者 OPTI-MEMI 培养基),轻轻混匀。
【注】:无血清的高糖 DMEM 培养基是稀释液,不能使用含血清的培养基进行 DNA 和 EZ Trans 转染试剂的稀释。因为 EZ Trans-DNA 转染复合物的形成过程不能含有血清。
(3)将稀释好的 EZ Trans 转染试剂尽快全部加入到已稀释好的质粒 DNA 中,轻轻混匀。【注】:此混合的顺序不能反向进行。
(4)室温放置 10-15 min,以形成 EZ Trans-DNA 复合物。
3. 转染细胞
(1)将上述 80 μL EZ Trans-DNA 转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿或轻微振荡,让 EZ Trans-DNA 复合物分散均匀。
(2)在 37℃,5% CO2培养箱培养 6-18 h,去除含 EZ Trans-DNA 复合物的培养液,更换新的培养液,继续培养至对转入基因表达分析。
【注】:筛选稳定转染细胞株,转染细胞 24 h 后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释 10 倍
以上),在 37℃,5% CO2培养箱中孵育 24 h,加入筛选培养基。在有转染抗性基因相匹配的药物筛选条件下,约 1~2 周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域
2. 质粒质量:请务必使用高纯度无内毒素转染级质粒。通过 260 nm 光吸收测定 DNA 浓度,260nm / 280 nm
比值确定 DNA 纯度(比值应该在 1.8~2.0 的范围之内)。如有可能,请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。
3. 细胞条件:使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保细胞没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞
是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。建议使用李记生物的胎牛血清(货号:AC03L055)培养细胞。
4. 细胞培养液要求:EZ Trans 细胞转染试剂可用于有血清培养基的转染,并且转染前不需要换培养基。但是,制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释 DNA 和转染试剂,因为血清会影响复合物的形成。确保细胞培养液没有被细菌、真菌或支原体污染。转染时培养液中不添加抗生素。
5. 试剂用量的优化:DNA 浓度和转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,初次使用应优化 DNA 浓度和转染试剂量以得到最大的转染效率。使用者可尝试每 1 μg DNA 使用 1~4 μL 体积 EZ Trans 细胞转染试剂进行优化。DNA 和转染试剂的比例,通常推荐是 1:2~1:5。
附1:https://t.cn/A60Lzu2i
常见问题:
Q1:李记有3款转染试剂,这3款有什么区别?和Li**对比效果如何?
A1:我司自行测试与收集客户反馈数据,得到类似结论:
效率方面:EZ Trans Plus>Li**2000≈EZ Trans(高效)>Li** 3000>EZ Trans(低毒)
毒性方面:EZ Trans(低毒)≈Li**3000<EZ Trans Plus<EZ Trans(高效)≈Li**2000
Q2:我们传的细胞有抗生素,抗生素是绝对会影响转染效率吗?
A2:能不加尽量不加,理论上抗生素进不到细胞内,但是在转染试剂的作用下,细胞的通透性增加,抗生素可能进到细胞内,对实验结果完成影响。
Q3:protocol提到,要用Opti-MEM稀释质粒和转染试剂。不能用1640稀释么?另外质粒和转染试剂为什么要先稀释然后再混合?不能把转染试剂直接加到质粒溶液中混合,然后再加培养基稀释么?
A3:EZ Trans细胞转染液属于阳离子类型的转染试剂,它与DNA形成复合物需要一定的条件,在合适的浓度下,有利于阳离子包裹DNA形成良好形态的复合物进入细胞。
如果直接把两者直接混合,两者容易很快形成聚合物,聚集相态多样,有可能使DNA暴露在表面,不容易进入细胞,进而降低转染效率。所以EZ Trans和DNA的混合顺序也很重要。 培养细胞大多会用到胎牛血清,血清成分复杂,没有人能说清成分及含量。细胞转染液成分比较明确,但是不能确定是会不会与胎牛血清的不知名成分结合,事实上这种现象在大多数转染试剂中都会造成不良影响,所以在形成EZ Trans-DNA复合物过程中要避免血清的影响。
Q4:protocol提到,“24-48小时内检测转染效率”指的是去除含复合物的培养液换成含血清的培养基之后的24-48h,还是指加入复合物后转染24-48h?
A4:所有时间都是从EZ Trans-DNA复合物与细胞接触开始算。
Q5:我就是问的体内直接转染小鼠。你们现有的protocol是体外实验的方法?
A5:体内直接转染目前最多的是腺病毒,慢病毒,腺相关病毒。转染试剂直接在体内用的报道我们目前没有听过。现有的做法是细胞在体外培养,转染筛选后再打入体内。
#生物技术##转染试剂#
首先为大家简述一下何为EZ Trans Plus 细胞转染试剂(Ⅱ)
它作为新一代的转染试剂,其转染原理是带正电的聚合物与核酸分 子的带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后,与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用,并通过胞吞作用 进入细胞。
使用方法(24孔板为例)
1. 接种细胞
对于贴壁细胞,转染前 18-24 h 进行铺板(不含抗生素),使其在转染时的密度大约在 80%左右。对于悬浮细胞,转染当天,在配制 EZ Trans-DNA 复合物之前进行铺板,每 500 µL 生长培养基中加入 4~8×10 5cells。
【注】:培养液中的血清不影响转染效率。转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,建议初次使用时设置梯度进行优化最佳使用量。
2. 准备 EZ Trans-DNA 复合物
(1)对于每孔细胞,将 1 μg 质粒 DNA 稀释到 40 μL 无血清的高糖 DMEM 培养基(或 OPTI-MEM I 培养基),混匀。
(2)对于每孔细胞,将 3 μL EZ Trans 转染试剂稀释到 40 μL 无血清的高糖 DMEM 培养基(或者 OPTI-MEMI 培养基),轻轻混匀。
【注】:无血清的高糖 DMEM 培养基是稀释液,不能使用含血清的培养基进行 DNA 和 EZ Trans 转染试剂的稀释。因为 EZ Trans-DNA 转染复合物的形成过程不能含有血清。
(3)将稀释好的 EZ Trans 转染试剂尽快全部加入到已稀释好的质粒 DNA 中,轻轻混匀。【注】:此混合的顺序不能反向进行。
(4)室温放置 10-15 min,以形成 EZ Trans-DNA 复合物。
3. 转染细胞
(1)将上述 80 μL EZ Trans-DNA 转染复合物均匀滴入到含细胞的培养皿中。轻轻晃动培养皿或轻微振荡,让 EZ Trans-DNA 复合物分散均匀。
(2)在 37℃,5% CO2培养箱培养 6-18 h,去除含 EZ Trans-DNA 复合物的培养液,更换新的培养液,继续培养至对转入基因表达分析。
【注】:筛选稳定转染细胞株,转染细胞 24 h 后,将细胞传代至新鲜的生长培养基中(将细胞稀释 10 倍
以上),在 37℃,5% CO2培养箱中孵育 24 h,加入筛选培养基。在有转染抗性基因相匹配的药物筛选条件下,约 1~2 周可筛选到耐药性克隆,在这期间需经常更换含筛选药物的生长培养基。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域
2. 质粒质量:请务必使用高纯度无内毒素转染级质粒。通过 260 nm 光吸收测定 DNA 浓度,260nm / 280 nm
比值确定 DNA 纯度(比值应该在 1.8~2.0 的范围之内)。如有可能,请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。
3. 细胞条件:使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保细胞没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞
是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。建议使用李记生物的胎牛血清(货号:AC03L055)培养细胞。
4. 细胞培养液要求:EZ Trans 细胞转染试剂可用于有血清培养基的转染,并且转染前不需要换培养基。但是,制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释 DNA 和转染试剂,因为血清会影响复合物的形成。确保细胞培养液没有被细菌、真菌或支原体污染。转染时培养液中不添加抗生素。
5. 试剂用量的优化:DNA 浓度和转染试剂使用量受细胞类型及其他实验条件影响,初次使用应优化 DNA 浓度和转染试剂量以得到最大的转染效率。使用者可尝试每 1 μg DNA 使用 1~4 μL 体积 EZ Trans 细胞转染试剂进行优化。DNA 和转染试剂的比例,通常推荐是 1:2~1:5。
附1:https://t.cn/A60Lzu2i
常见问题:
Q1:李记有3款转染试剂,这3款有什么区别?和Li**对比效果如何?
A1:我司自行测试与收集客户反馈数据,得到类似结论:
效率方面:EZ Trans Plus>Li**2000≈EZ Trans(高效)>Li** 3000>EZ Trans(低毒)
毒性方面:EZ Trans(低毒)≈Li**3000<EZ Trans Plus<EZ Trans(高效)≈Li**2000
Q2:我们传的细胞有抗生素,抗生素是绝对会影响转染效率吗?
A2:能不加尽量不加,理论上抗生素进不到细胞内,但是在转染试剂的作用下,细胞的通透性增加,抗生素可能进到细胞内,对实验结果完成影响。
Q3:protocol提到,要用Opti-MEM稀释质粒和转染试剂。不能用1640稀释么?另外质粒和转染试剂为什么要先稀释然后再混合?不能把转染试剂直接加到质粒溶液中混合,然后再加培养基稀释么?
A3:EZ Trans细胞转染液属于阳离子类型的转染试剂,它与DNA形成复合物需要一定的条件,在合适的浓度下,有利于阳离子包裹DNA形成良好形态的复合物进入细胞。
如果直接把两者直接混合,两者容易很快形成聚合物,聚集相态多样,有可能使DNA暴露在表面,不容易进入细胞,进而降低转染效率。所以EZ Trans和DNA的混合顺序也很重要。 培养细胞大多会用到胎牛血清,血清成分复杂,没有人能说清成分及含量。细胞转染液成分比较明确,但是不能确定是会不会与胎牛血清的不知名成分结合,事实上这种现象在大多数转染试剂中都会造成不良影响,所以在形成EZ Trans-DNA复合物过程中要避免血清的影响。
Q4:protocol提到,“24-48小时内检测转染效率”指的是去除含复合物的培养液换成含血清的培养基之后的24-48h,还是指加入复合物后转染24-48h?
A4:所有时间都是从EZ Trans-DNA复合物与细胞接触开始算。
Q5:我就是问的体内直接转染小鼠。你们现有的protocol是体外实验的方法?
A5:体内直接转染目前最多的是腺病毒,慢病毒,腺相关病毒。转染试剂直接在体内用的报道我们目前没有听过。现有的做法是细胞在体外培养,转染筛选后再打入体内。
#生物技术##转染试剂#
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