中华人民共和国国家标准
农业农村部公告第627号-2-2022
饲料中二羟丙茶碱的测定 液相色谱-串联质谱法
Determination of diprophylline in feeds-
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry
(转载:https://t.cn/A6WpCx8y)

1范围

本文件规定了饲料中二羟丙茶碱的液相色谱-串联质谱测定方法。

本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料和添加剂预混合饲料中二羟丙茶碱的测定。

本文件的检出限为0.01 mg/kg,定量限为0.05 mg/kg。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法

GB/T 20195动物饲料、试样的制备

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义

4原理

试样中的二羟丙茶碱用酸溶被提取,经固相萃取柱净化,用液相色谱-串联质谱仪测定,基质匹配标准溶液校准,外标法定量。

5试剂或材料

除非另有规定,仅使用分析纯试剂。

5.1 水:GB/T 6682,一级。

5.2甲醇:色谱纯。

5.3甲酸:色谱纯。

5.4乙酸铵:色谱纯。

5.5 25%甲醇溶液:取甲醇250 mL,加水稀释至1L,混匀。

5.6 0.2%甲酸溶液:取甲酸2mL加水稀释至上1L,混匀。

5.7乙酸铵溶液(200mmol/L):称取乙酸铵3.1g加水溶解并稀释至200mL,混匀。

5.8乙酸铵-甲酸溶液:移取乙酸铵溶液(5.7)12.5 mL和甲酸1 mL,加水定容至500 mL,混匀。

5.9标准储备溶液(1mg/mL):准确称取二羟丙茶碱标准品(CAS号:479-18-5,纯度不低于98%)50 mg(精确至0.01 mg)于50 mL容量瓶中,用25%甲醇溶液(5.5)溶解定容。于2℃~8℃保存,有效期为3个月。

5.10标准中间溶液(10μg/mL):准确移取二羟丙茶碱标准储备溶液(5.9)1 mL于100 mL容量瓶中,用甲醇(5.2)稀释至刻度,混匀。于2℃~8℃保存,有效期为1个月。

5.11 固相萃取柱:混合型阳离子交换柱,60 mg/3 mL,或性能相当者。

5.12 微孔滤膜:0.22μm,水系。

6仪器设备

6.1液相色谱-串联质谱仪:配电喷雾离子源。

6.2分析天平:感量0.1 mg和0.01 mg。

6.3离心机:转速不低于 8 000 r/min。

6.4往复式振荡器。

6.5固相萃取装置。

6.6涡旋混合器。

6.7氮吹仪。

7样品

按GB/T 20195的规定制备试样,至少200g,粉碎后通过0.425mm孔筛,充分混匀,装入容器,密闭保存,备用。选取类型相同,均匀一致、且在待测物保留时间处,仪器响应值小于方法定量限30%的饲料样品,作为空白试样。

8试验步骤

8.1提取

平行做2份试验。称取试样2 g(精确至0.000 1 g),于50 mL离心管中,准确加入20 mL 0.2%甲酸溶液(5.6),播匀,振荡20 min,以8 000 r/min离心5 min, 移取上清液作为备用液。

8.2 净化

8.2. 1配合饲料、浓缩饲料和精料补充料:将固相萃取柱依次用3 mL甲醇(5.2)、3 mL水活化。准确移取5mI备用液(8.1)过柱,用3mL水淋洗,抽干,再用3mL甲醇(5.2)洗脱,收集洗脱液,于50℃氮吹至干,准确加入1 mL 0.2%甲酸溶液(5.6)溶解,涡旋混匀,过0.22μm微孔滤膜(5.12),备用。

8.2.2添加剂预混合饲料:取适量备用液(8.1)过0.22μm微孔滤膜(5.12)2次,备用。

8.3基质匹配标准系列溶液的制备

取空白试样,按8.1和8.2处理得到空白基质溶液,取适量标准中间溶液(5.10),用甲醇配制成浓度分别为2.0 ng/mL、5.0 ng/mL、25.0 ng/mL、50.0 ngmL、100.0 ng/mL、200.0 ng/mL、 500.0 ng/mL的标准系列溶液,各取1mL于50℃氦吹至干,准确加入1mL空白基质溶液,涡旋混匀,待测。

8.4 测定

8.4.1液相色谱参考条件

色谱柱:C18柱,柱长50mm,内径2.1mm,粒径1.8μm,或性能相当者。

流动相A:甲醇(5.2);流动相B:乙酸铵-甲酸溶液(5.8)。梯度洗脱条件见表1。

image.png

流速:0.3 mL/min。

柱温:30℃。

进样量:2μL。

8.4.2质谱参考条件

电离方式:电喷雾电离,正离子模式(ESI+ )。

检测方式:多反应监测(MRM)。

毛细管电压:3.5 kV。

干燥气温度:300℃。

干燥气流速:5L/min。

雾化器压力:45 psi。

多反应监测(MRM)离子对、碎裂电压和碰撞能量参考值见表2。

image.png​

8.4.3基质匹配标准系列溶液和试样溶液测定

在仪器的最佳条件下,分别取基质匹配标准系列溶液和试样溶液上机测定。基质匹配标准溶液多反应监测色谱图见附录A。

8.4.4 定性

在相同试验条件下,试样溶液与基质匹配标准系列溶液中待测物的保留时间相对偏差在±2.5%以内,且试样谱图中二羟丙茶碱定性离子的相对离子丰度与浓度接近的标准系列溶液中对应的定性离子相对离子丰度进行比较,若偏差不超过表3规定的范围,则可判定为试样中存在对应的待测物。

image.png

8.4.5定量

分别取适量试样溶液和基质匹配标准系列溶液,以浓度为横坐标、色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,标准山线的相关系数应不低于0.99。试样溶液与基质匹配标准溶液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范围内,如超出线性范围,应重新试验或将试样溶液和基质匹配标准溶液用0.2%甲酸溶液稀释后重新测定。单点校准定量时,试样溶液中待测物的浓度与基质匹配标准溶液浓度相差不超过30%。

9试验数据处理

试样中二羟丙茶碱的含量以质量分数计。标准曲线校准按公式(1)计算;单点校准按公式(2)计算。

image.png

式中:

ω——试样中二羟丙茶碱含量的数值,单位为毫克/千克(mg/kg);

ρ——由标准曲线得到的试样溶液中二羟丙茶碱质量浓度的数值,单位为纳克每毫升(ng/mL);

V——最终定容体积的数值,单位为毫升(mL);

n——稀释倍数;

m——试样质量的数值, 单位为克(g);

A——试样溶液中二羟丙茶碱的色谱峰面积;

CS——基质匹配标准溶液中二羟丙茶碱质量浓度的数值,单位为纳克每毫升(ng/mL);

AS——基质匹配标准溶液中二羟丙茶碱的色谱峰面积。

测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留3位有效数字。

10 精密度

在重复性条件下,2次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值不大于该算术平均值的20%。

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非原文:“别多想。” 慕轻妍忽然说了这么一句,沈随一听,还以为她听进去了,刚要松一口气,就听见她又补了一句:“你们一个也跑不了。” 第525章报复 又过了两三天。 新闻上爆出了一则消息,沈随找社会上人员企图对圈内女明星不轨,不法分子良心发现,向警方自首。 一时间,沈随名声更是岌岌可危。 全网人都在讨伐她。 胡玉汐得知这些消息的时候,有些坐立难安。 “我一直以为沈随退圈,事情就应该过去了,但是没想到,他们完全不给一点机会,居然把人往绝路上逼。” “有我在,你担心什么?” 坐在对面和她共赏夜景的优雅男人不紧不慢的吃了一小口牛排,十分惬意,和她的焦灼完全相反。 胡玉汐看了看他,见他高贵随意的姿态,欲言又止。 似乎是看出了她的意思,男人又眼皮子一掀,说:“你还担心会报复到你身上?” “是有点。” 她回答道:“我不知道为什么慕轻妍对我有那么大的敌意,我一开始明明想和她交好,但是她一点面子不给,反而还三番两次终止了跟我的合作,我也不知道是哪里得罪过她,海平,我现在可以依靠的只有你了,你可不能不管我。” 说到最后,胡玉汐还跟他撒起了娇。 她很美,性格一向强势,但此时服软做小的模样更是别有一番风味,能极大的满足男人的那点大男子主义。 陆海平看着她的眼神果然变得深了点,但细看,眼底依旧一片清明。先帝创业未半而中道崩殂,今天下三分,益州疲弊,此诚危急存亡之秋也。然侍卫之臣不懈于内,忠志之士忘身于外者,盖追先帝之殊遇,欲报之于陛下也。诚宜开张圣听,以光先帝遗德,恢弘志士之气,不宜妄自菲薄,引喻失义,以塞忠谏之路也。
 宫中府中,俱为一体;陟罚臧否,不宜异同。若有作奸犯科及为忠善者,宜付有司论其刑赏,以昭陛下平明之理,不宜偏私,使内外异法也。
  侍中、侍郎郭攸之、费祎、董允等,此皆良实,志虑忠纯,是以先帝简拔以遗陛下。愚以为宫中之事,事无大小,悉以咨之,然后施行,必能裨补阙漏,有所广益。
  将军向宠,性行淑均,晓畅军事,试用于昔日,先帝称之曰能,是以众议举宠为督。愚以为营中之事,悉以咨之,必能使行阵和睦,优劣得所。
  亲贤臣,远小人,此先汉所以兴隆也;亲小人,远贤臣,此后汉所以倾颓也。先帝在时,每与臣论此事,未尝不叹息痛恨于桓、灵也。侍中、尚书、长史、参军,此悉贞良死节之臣,愿陛下亲之信之,则汉室之隆,可计日而待也。
  臣本布衣,躬耕于南阳,苟全性命于乱世,不求闻达于诸侯。先帝不以臣卑鄙,猥自枉屈,三顾臣于草庐之中,咨臣以当世之事,由是感激,遂许先帝以驱驰。后值倾覆,受任于败军之际,奉命于危难之间,尔来二十有一年矣。
  先帝知臣谨慎,故临崩寄臣以大事也。受命以来,夙夜忧叹,恐托付不效,以伤先帝之明;故五月渡泸,深入不毛。今南方已定,兵甲已足,当奖率三军,北定中原,庶竭驽钝,攘除奸凶,兴复汉室,还于旧都。此臣所以报先帝而忠陛下之职分也。至于斟酌损益,进尽忠言,则攸之、祎、允之任也。
  愿陛下托臣以讨贼兴复之效,不效,则治臣之罪,以告先帝之灵。若无兴德之言,则责攸之、祎、允等之慢,以彰其咎;陛下亦宜自谋,以咨诹善道,察纳雅言,深追先帝遗诏。臣不胜受恩感激。今当远离,临表涕零,不知所言。

51股被主力减持超亿元 北向资金抢筹贵州茅台、五粮液等

11月2日,上证指数、深证成指、创业板指、科创50指数早盘冲高回落,午后震荡下探。截至收盘,上证指数报3009.41点,跌0.45%,成交额3119.36亿元;深证成指报9734.77点,跌0.94%,成交额4548.43亿元;创业板指报1939.70点,跌0.99%,成交额2138.41亿元;科创50指数报859.93点,跌1.15%,成交额491.98亿元。沪深两市合计成交7667.79亿元,成交额较上一交易日减少451.53亿元。
资金流向
1.主力资金
Wind统计显示,沪深两市主力资金今日净流出237.83亿元。其中,创业板主力资金净流出72.77亿元,沪深300成分股主力资金净流出51.76亿元,科创板主力资金净流出11.27亿元。
从行业板块来看,申万所属的31个一级行业,今日仅有传媒、纺织服装2个行业板块主力资金呈现净流入,净流入金额分别为33.51亿元、0.64亿元。 29个行业板块主力资金呈现净流出,其中,电子行业板块主力资金净流出最多,净流出金额为42.83亿元;行业板块主力资金净流出靠前的还有电力设备、计算机、机械设备、国防军工、医药生物、通信,净流出金额分别为39.52亿元、30.79亿元、20.65亿元、18.99亿元、13.43亿元、12.54亿元。
行业主力资金净流入额.png
个股来看,今日有1585个股获主力资金净流入,其中,29股获主力资金净流入超1亿元。中文在线获主力资金净流入最多,净流入金额为2.89亿元;主力资金净流入居前的个股还有楚天龙、奥飞娱乐、天龙集团、贵州茅台、东风汽车,流入金额分别为2.77亿元、2.66亿元、2.29亿元、2.02亿元、1.87亿元。
个股主力资金净流入排名.png

此外,3474只个股被主力资金净卖出,其中,51股被主力资金净卖出超1亿元。主力资金净流出最多的个股是隆基绿能,净流出金额为8.67亿元;主力资金净流出居前的个股还有信维通信、上海瀚讯、高新发展、江淮汽车、文一科技,净流出金额分别为4.3亿元、3.83亿元、3.72亿元、3.46亿元、3.16亿元。
个股主力资金净流出排名.png

2.北向资金
北向资金今日成交额为983.88亿元,成交净买入26.82亿元。其中,沪股通净买入19.59亿元,深股通净买入7.23亿元。
活跃个股方面,北向资金今日净买入较多的有贵州茅台、五粮液、泸州老窖、信维通信、工业富联,净买入金额分别为7亿元、2.28亿元、2.09亿元、1.87亿元、1.61亿元。北向资金净卖出较多的有比亚迪、长安汽车、中际旭创、韦尔股份、药明康德,净卖出金额分别为3.98亿元、2.82亿元、1.65亿元、1.44亿元、0.96亿元。
北向资金活跃个股交易情况.png

3.龙虎榜机构资金动向
盘后龙虎榜数据显示,今日机构席位资金合计净卖出约1.8亿元。其中,净买入的个股6只,净卖出的个股14只。机构净买入最多的股票是楚天龙,净买入金额约2712.65万元;机构净买入居前的还有深城交、好上好等股。机构净卖出最多的股票是中贝通信,净卖出金额约5533.6万元;机构净卖出居前的还有赛隆药业、龙宇股份、奥飞娱乐等股。
龙虎榜机构净买入的个股.png
楚天龙今天涨停。盘后数据显示,1个机构出现在龙虎榜单上,净买入2712.65万元;华鑫证券有限责任公司上海分公司买入2593.27万元,同时卖出292.2万元;华泰证券股份有限公司深圳益田路证券营业部买入22.44万元,同时卖出4003.2万元。
楚天龙.png

涨跌停个股
截至收盘,沪深两市合计855个股上涨,4079只个股下跌,平盘个股138只,停牌的个股1只。不含当日上市新股,共有38只个股涨停,5只个股跌停。续涨停天数看,高新发展已连收11个涨停板,连续涨停板数量最多。
从收盘涨停板封单量来看,鹏都农牧最受追捧,收盘涨停板封单有4181.22万股;其次是东风汽车、电广传媒,涨停板封单分别有2064.88万股、1758.75万股。以封单金额计算,天龙股份、高新发展、智度股份等涨停板封单资金较多,分别有3.12亿元、2.34亿元、1.62亿元。
个股涨跌分布.png

行业板块、概念方面看,行业板块跌多涨少。其中,传媒、银行、游戏等行业板块涨幅靠前;影视概念、网络游戏、广电、知识产权、托育服务等概念走势活跃。军工、电力设备、美容护理、电子、机械设备、建筑材料、计算机、有色金属等行业板块跌幅居;6G概念、天基互联、毫米波概念、液冷概念、BC电池、轮毂电机、北斗导航、半导体、复合集流体等概念走势较弱。涨停个股主要集中在传媒、汽车、建筑装饰等行业。


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