#三亚沙滩现多起剧毒僧帽水母伤人事件#
僧帽水母原本只分布在大西洋
所谓中国僧帽水母非同一水母
三亚发现的是否为大西洋水母
如果是此事严重到不可思量了
水母是漂浮动物只随洋流迁移
如果大西洋的洋流跑到三亚来
全球气候系统将发生巨大灾难
气候系统前边谈过其混沌代码
洋流对气候影响是至关重要的
但愿是中国本土的假僧帽水母
新闻图片中的是蓝瓶僧帽水母
并不是大西洋剧毒的僧帽水母
国内科学界对僧帽水母的认知
尚处于没有研究认知定义阶段
世界僧帽水母的分类并不统一
但只要不是大西洋过来的就行
僧帽水母原本只分布在大西洋
所谓中国僧帽水母非同一水母
三亚发现的是否为大西洋水母
如果是此事严重到不可思量了
水母是漂浮动物只随洋流迁移
如果大西洋的洋流跑到三亚来
全球气候系统将发生巨大灾难
气候系统前边谈过其混沌代码
洋流对气候影响是至关重要的
但愿是中国本土的假僧帽水母
新闻图片中的是蓝瓶僧帽水母
并不是大西洋剧毒的僧帽水母
国内科学界对僧帽水母的认知
尚处于没有研究认知定义阶段
世界僧帽水母的分类并不统一
但只要不是大西洋过来的就行
省大尹师祥明作品鉴藏͏
—【祥石龙瓢】
家藏原紫矿泥·400cc
尹祥明
中国陶瓷工美艺术大师
正高级艺工美术师
江苏工省艺美术大师
师从大国师徐秀先堂生
收藏热线13621220471同微信欢迎订购!
乌克兰家国艺术科院学院士、南京农业大教学授、江苏省五劳一动奖章获得者、中美国术家会协会员、中国工艺美术学会专会委委员、中国间民文艺家协会员会。
1998年创建宜日兴月陶坊。品作多次加参国内外大型紫砂陶艺展,览入选"陶瓷的国度-中国当代陶出艺国巡回展",法国"中神国话"艺术,展并在全国性的艺陶创作评比中多次获,奖作品被文部化,中国历史博馆物,香港艺馆术等收藏。
经典用实器型,以其端庄大的方造型和流畅的水出,一直受深广大壶友茶客的喜爱。壶身饱,满线条畅流自然,底壶三圆足称托更,显稳之重气,直流嘴三与角把的搭配更比是例协调,气势凡非,平盖桥钮,意古立现,以复杂的堆绘艺工加以饰装,龙腾飞中空戏耍一颗火珠称,为“龙戏珠”,从代汉开始,它便成为一吉种祥喜的庆装饰图纹细,观之,漂浮着龙的须,锋利龙的爪,猛凶的龙角,健壮的龙身无,一不栩如栩生,细腻传神!等此紫砂佳作值得入珍手藏!
—【祥石龙瓢】
家藏原紫矿泥·400cc
尹祥明
中国陶瓷工美艺术大师
正高级艺工美术师
江苏工省艺美术大师
师从大国师徐秀先堂生
收藏热线13621220471同微信欢迎订购!
乌克兰家国艺术科院学院士、南京农业大教学授、江苏省五劳一动奖章获得者、中美国术家会协会员、中国工艺美术学会专会委委员、中国间民文艺家协会员会。
1998年创建宜日兴月陶坊。品作多次加参国内外大型紫砂陶艺展,览入选"陶瓷的国度-中国当代陶出艺国巡回展",法国"中神国话"艺术,展并在全国性的艺陶创作评比中多次获,奖作品被文部化,中国历史博馆物,香港艺馆术等收藏。
经典用实器型,以其端庄大的方造型和流畅的水出,一直受深广大壶友茶客的喜爱。壶身饱,满线条畅流自然,底壶三圆足称托更,显稳之重气,直流嘴三与角把的搭配更比是例协调,气势凡非,平盖桥钮,意古立现,以复杂的堆绘艺工加以饰装,龙腾飞中空戏耍一颗火珠称,为“龙戏珠”,从代汉开始,它便成为一吉种祥喜的庆装饰图纹细,观之,漂浮着龙的须,锋利龙的爪,猛凶的龙角,健壮的龙身无,一不栩如栩生,细腻传神!等此紫砂佳作值得入珍手藏!
一篇,教会你【全胚胎免疫组织化学染色】
免疫组织化学染色法是指在抗体上结合荧光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测。
常规的免疫组织化学染色法有ABC法、LSAB法(SP法)(Labelled streptavidim biotln)、真空负压LSAB法、Envision TM Systems、免疫组化双染色法(ⅰ) (Ionmuno-Histochemistry double staimimg method)、免疫组化的双染色法(ⅱ) (Immuno-histochemistry double staining method)、细胞爬片免疫荧光染色法、真空负压免疫荧光染色法染细胞爬片,免疫组织化学染色结果评价标准如下:对免疫组织化学染色所得结果的判断要持科学态度,根据对照实验准确判断阳性和阴性结果,排除假阳性和假阴性结果。为使实验结果准确无误,应多次重复进行实验。
最后得出科学的结论。为达此目的,首先应学会区别特异性和非特异性染色结果。
非特异性染色的特点是:细胞和间质染色无区别或间质染色更强;
染色无特定部位,无结构性;染色五分布规律,某一部位均匀着色;
染色出现在切片的干燥部位、边缘、刀痕或组织折叠处。
排除非特异性染色之后,应确定特异性染色在组织细胞中的部位和程度,并且考虑是否有必要进行半定量测定。
[星星]一、 以抗原表达模式定位
1
细胞质内弥散性分布,多数免疫组织化学染色为胞质型阳性反应,如细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)和波形蛋白(Vimentin)等。
2
细胞核周边胞质内分布,其判别要点是细胞核轮廓被勾画得很清楚,如CD3多克隆抗体的染色。
3
胞浆内局限性点状阳性反应,如CDI$抗体的染色。
4
细胞膜线性阳性反应,大多数淋巴细胞标志物的染色均如此,如CD20。
5
细胞核阳性反应,如BrdU、Ki-67及雌、孕激素受体蛋白等。
有些抗原的阳性表达可同时出现在细胞的不同部位,如细胞质和细胞膜等。
如图1.
[星星]二、阳性染色结果定量
1
计算免疫反应阳性细胞数方法是选择每个样品中10个非重叠视野,计算每个视野中的阳性细胞与总细胞数的百分比,取平均数,连续观察和计算至少二个条件相同的样品。得出数据经统计学处理后可在计算机Microsoft Excel中作出柱形图。
2
另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定,一般阳性细胞数在0~25为阴性,25~50为+,50~75为++,75以上为+++。此种判定方法容易出现人为误差,现已很少在论文中出现。
3
图像分析系统检测阳性结果。
针对以上的评判标准,常规免疫组织化学染色在有些时候是不能满足我们对实验的要求,这个时候就可能会用到一些非常规的免疫组织化学染色方法,比如全组织免疫组织化学染色,全组织免疫组织化学染色尤其是胚胎,是指组织并没有切片,而是组织的一小块进行的整体染色方法。胚胎干细胞、胚胎发育学研究者以及神经学者通过动物的不同发育阶段表达不同的目的蛋白这一特点而对不同阶段的动物全胚胎进行染色。
全组织染色与免疫细胞化学以及冰冻切片染色十分类似。如果一种抗体可以应用于冰冻切片(并不包括石蜡包埋的切片)染色中的话,那么在全胚胎染色中也是适用的。不同之处在于全胚胎染色的样品比正常的切片样品更大更厚。
因此,固定、封闭、抗体孵育、洗脱、通透以及底物显色过程都需要更长的时间,以使得溶液可以渗透到达样品的中心。虽然研究者们使用不一样的次数,但必要的话这些步骤中的细节对于优化实验也可以提供指导。
[星星]一、固定中很重要的一点
使用同一种抗体时,在冰冻切片中成功使用的固定液,一般都适合用来做全组织染色的。然而,大多数研究人员偏好于使用4%多聚甲醛。虽然4%多聚甲醛的这个浓度是很低的,但这还是需要整个样品等待长时间以使得溶液可以渗透到样品的中心。因此,这并不适合所有的抗体,这是由于4%多聚甲醛固定液引起的蛋白交联会使很多抗体不能识别其抗原表位。
一般,石蜡切片需要进行抗原修复。而由于抗原修复中的加热步骤会损坏胚胎样品,故胚胎样品不需要加热修复抗原这一步骤。如果多聚甲醛固定在组织整体固定中不可行的话,这就可能是因为抗体对于蛋白交联比较敏感,那么就需要选择其他的固定液。甲醇是人们在组织整体免疫染色步骤中固定液的第二种常用选择。
斑马鱼胚胎的固定和准备需要额外的步骤以确保卵膜被彻底渗透。
[星星]二、获取图像
观看全胚胎图像可以使其在爬片之前漂浮在一个盛有甘油溶液的培养皿中观察。如果胚胎很小的话,可以使用甘油爬片后,盖盖玻片之前进行观察。
在这种情况下,可以在盖玻片周围滴加油脂,使其不易移动且可以减少使用显微镜观察时造成的盖玻片的损坏。然而,如果通过全胚胎很难观察一个清晰的染色图像的话,也可以使用明胶对全胚胎进行分开后观察,这种情况尤其适用于大的后期胚胎阶段和大的组织样品。
如果使用免疫荧光标记的话,共聚焦显微镜是很好的观察全胚胎的工具。这样就不用在染色后又将全胚胎分成几个玻片进行观察了。
[星星]三、选择胚胎的年龄(阶段)
随着胚胎的生长,越大的胚胎越难染色。像固定液、抗体、显影液等试剂也不易于渗透到样品的中心,染色的细胞很难获得一个清晰的图像。那么,必要的话,大的或者后期的胚胎可以在染色之前可以将其分开成几块。
推荐年龄:
(1)鸡胚胎:6天;(2)鼠胚胎:12天等
[星星]四.实验步骤如图2-5[星星]
#医学生[超话]##知识科普##干货分享##考研[超话]##博士[超话]##科研实验##动物实验##分子实验##细胞实验#
免疫组织化学染色法是指在抗体上结合荧光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在,此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质,也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测。
常规的免疫组织化学染色法有ABC法、LSAB法(SP法)(Labelled streptavidim biotln)、真空负压LSAB法、Envision TM Systems、免疫组化双染色法(ⅰ) (Ionmuno-Histochemistry double staimimg method)、免疫组化的双染色法(ⅱ) (Immuno-histochemistry double staining method)、细胞爬片免疫荧光染色法、真空负压免疫荧光染色法染细胞爬片,免疫组织化学染色结果评价标准如下:对免疫组织化学染色所得结果的判断要持科学态度,根据对照实验准确判断阳性和阴性结果,排除假阳性和假阴性结果。为使实验结果准确无误,应多次重复进行实验。
最后得出科学的结论。为达此目的,首先应学会区别特异性和非特异性染色结果。
非特异性染色的特点是:细胞和间质染色无区别或间质染色更强;
染色无特定部位,无结构性;染色五分布规律,某一部位均匀着色;
染色出现在切片的干燥部位、边缘、刀痕或组织折叠处。
排除非特异性染色之后,应确定特异性染色在组织细胞中的部位和程度,并且考虑是否有必要进行半定量测定。
[星星]一、 以抗原表达模式定位
1
细胞质内弥散性分布,多数免疫组织化学染色为胞质型阳性反应,如细胞角蛋白(Cytokeratin,CK)和波形蛋白(Vimentin)等。
2
细胞核周边胞质内分布,其判别要点是细胞核轮廓被勾画得很清楚,如CD3多克隆抗体的染色。
3
胞浆内局限性点状阳性反应,如CDI$抗体的染色。
4
细胞膜线性阳性反应,大多数淋巴细胞标志物的染色均如此,如CD20。
5
细胞核阳性反应,如BrdU、Ki-67及雌、孕激素受体蛋白等。
有些抗原的阳性表达可同时出现在细胞的不同部位,如细胞质和细胞膜等。
如图1.
[星星]二、阳性染色结果定量
1
计算免疫反应阳性细胞数方法是选择每个样品中10个非重叠视野,计算每个视野中的阳性细胞与总细胞数的百分比,取平均数,连续观察和计算至少二个条件相同的样品。得出数据经统计学处理后可在计算机Microsoft Excel中作出柱形图。
2
另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定,一般阳性细胞数在0~25为阴性,25~50为+,50~75为++,75以上为+++。此种判定方法容易出现人为误差,现已很少在论文中出现。
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图像分析系统检测阳性结果。
针对以上的评判标准,常规免疫组织化学染色在有些时候是不能满足我们对实验的要求,这个时候就可能会用到一些非常规的免疫组织化学染色方法,比如全组织免疫组织化学染色,全组织免疫组织化学染色尤其是胚胎,是指组织并没有切片,而是组织的一小块进行的整体染色方法。胚胎干细胞、胚胎发育学研究者以及神经学者通过动物的不同发育阶段表达不同的目的蛋白这一特点而对不同阶段的动物全胚胎进行染色。
全组织染色与免疫细胞化学以及冰冻切片染色十分类似。如果一种抗体可以应用于冰冻切片(并不包括石蜡包埋的切片)染色中的话,那么在全胚胎染色中也是适用的。不同之处在于全胚胎染色的样品比正常的切片样品更大更厚。
因此,固定、封闭、抗体孵育、洗脱、通透以及底物显色过程都需要更长的时间,以使得溶液可以渗透到达样品的中心。虽然研究者们使用不一样的次数,但必要的话这些步骤中的细节对于优化实验也可以提供指导。
[星星]一、固定中很重要的一点
使用同一种抗体时,在冰冻切片中成功使用的固定液,一般都适合用来做全组织染色的。然而,大多数研究人员偏好于使用4%多聚甲醛。虽然4%多聚甲醛的这个浓度是很低的,但这还是需要整个样品等待长时间以使得溶液可以渗透到样品的中心。因此,这并不适合所有的抗体,这是由于4%多聚甲醛固定液引起的蛋白交联会使很多抗体不能识别其抗原表位。
一般,石蜡切片需要进行抗原修复。而由于抗原修复中的加热步骤会损坏胚胎样品,故胚胎样品不需要加热修复抗原这一步骤。如果多聚甲醛固定在组织整体固定中不可行的话,这就可能是因为抗体对于蛋白交联比较敏感,那么就需要选择其他的固定液。甲醇是人们在组织整体免疫染色步骤中固定液的第二种常用选择。
斑马鱼胚胎的固定和准备需要额外的步骤以确保卵膜被彻底渗透。
[星星]二、获取图像
观看全胚胎图像可以使其在爬片之前漂浮在一个盛有甘油溶液的培养皿中观察。如果胚胎很小的话,可以使用甘油爬片后,盖盖玻片之前进行观察。
在这种情况下,可以在盖玻片周围滴加油脂,使其不易移动且可以减少使用显微镜观察时造成的盖玻片的损坏。然而,如果通过全胚胎很难观察一个清晰的染色图像的话,也可以使用明胶对全胚胎进行分开后观察,这种情况尤其适用于大的后期胚胎阶段和大的组织样品。
如果使用免疫荧光标记的话,共聚焦显微镜是很好的观察全胚胎的工具。这样就不用在染色后又将全胚胎分成几个玻片进行观察了。
[星星]三、选择胚胎的年龄(阶段)
随着胚胎的生长,越大的胚胎越难染色。像固定液、抗体、显影液等试剂也不易于渗透到样品的中心,染色的细胞很难获得一个清晰的图像。那么,必要的话,大的或者后期的胚胎可以在染色之前可以将其分开成几块。
推荐年龄:
(1)鸡胚胎:6天;(2)鼠胚胎:12天等
[星星]四.实验步骤如图2-5[星星]
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