榆树 榆属 榆科 蔷薇目 木兰纲 被子植物门 植物界 真核域。
叶子，卵状披针形，含有抗营养因子单宁（降低消化，延长食糜在胃肠内停留时间，降低动物采食量）15g/kg。适量添加可增强畜牧业质量（十四五规划优质饲草产业缺口达5000吨）。
光合作用固定C，C含量越高，植物对外界不利环境的防御能力越强。衰老组织器官在离开植物体前，会将养分转移到其它组织，称为养分重吸收。
根系吸收N、P，树以凋落物形式返还C、N、P给土壤。凋落物归还是土壤有机质和养分积累的主要来源。土壤养分盈亏状况可反应循环规律是否完善。
榆树前期生长较快，榆树造林可提升土壤养分。松油的养分保存能力更高，适宜与榆树建立混交林。
冬季冷激量增加，导致开花的积温需求降低。
叶子，卵状披针形，含有抗营养因子单宁（降低消化，延长食糜在胃肠内停留时间，降低动物采食量）15g/kg。适量添加可增强畜牧业质量（十四五规划优质饲草产业缺口达5000吨）。
光合作用固定C，C含量越高，植物对外界不利环境的防御能力越强。衰老组织器官在离开植物体前，会将养分转移到其它组织，称为养分重吸收。
根系吸收N、P，树以凋落物形式返还C、N、P给土壤。凋落物归还是土壤有机质和养分积累的主要来源。土壤养分盈亏状况可反应循环规律是否完善。
榆树前期生长较快，榆树造林可提升土壤养分。松油的养分保存能力更高，适宜与榆树建立混交林。
冬季冷激量增加，导致开花的积温需求降低。
1.什么是酵母展示平台
酵母展示（或酵母表面展示）是一种强大的蛋白质工程技术，它是用整合到酵母细胞壁中的重组蛋白的表达来分离和工程化抗体。自 2000 年首次发表以来，酵母表面展示已被广泛用于设计各种蛋白质以提高亲和力、特异性、表达、稳定性和催化活性。
2.酵母展示原理
酵母抗体展示技术（Yeast Display Technology）是指用抗体序列可变区与凝集素Aga2p融合表达，Aga2p蛋白亚基通过两个二硫键与固定在酵母细胞壁上的Aga1p 蛋白亚基结合，结合流式分选技术，将靶向抗原的特异性抗体给筛选出来。
3.纳米抗体
纳米抗体（Nanobody, Nbs）是驼科动物外周血清产生的一种单链抗体，这些抗体仅由重链组成，缺乏轻链和功能性CH1和CH4结构域。VHH晶体为2.5nm，长4nm，分子量只有15KDa。相较于传统抗体，纳米抗体因其分子量小，从而更容易可穿透血脑屏障；原核或真核系统有高表达量；特异性强，亲和力高；对人的免疫原性弱等优点，因此在抗肿瘤药物研发、心脑血管疾病、免疫疾病等领域有巨大价值。
4.纳米抗体酵母展示优缺点
4.1优点
（1）酵母作为真核表达系统，可以进行翻译后修饰来表达和折叠复杂的真核蛋白。
（2）相对噬菌体展示文库技术而言，酵母展示技术在微量抗体表达后抗体活性要高，得益此基础，在流式筛选时就能区分抗体的亲和力高低。
（3） 插入异源蛋白不会破坏表面蛋白的结构，也不会影响表面展示的效率。
4.2缺点
（1）相比于噬菌体展示技术，酵母展示库容量较低，因此主要应用于客户对项目库容要求不高，动物免疫后PBMC细胞经过二次分选以及避免漏掉二硫键形成的抗体发现项目；
（2）由于酵母表面存在多个蛋白质拷贝，可能会发生与寡聚蛋白靶标不希望的多价结合。
5.酵母抗体展示应用
随着这项技术的不断完善，现在酵母展示的应用包括酶工程；蛋白质表位作图、蛋白质-蛋白质相互作用的鉴定、免疫生物催化和生物传感器，以及用于生物技术和生物医学应用的酵母细胞上蛋白质和酶的展示。
6.泰克生物能够提供酵母抗体展示技术服务
泰克生物能够为客户提供高质量的纳米抗体酵母展示服务，主要服务流程如下：抗原准备，羊驼免疫，PBMC分离，RNA提取，cDNA制备，文库构建，文库筛选，抗体表达。
5.1抗原制备
5.1.1密码子优化+基因模板合成+表达载体构建；
5.1.2质粒抽提+转染（哺乳表达系统）目的蛋白检测（WB，SDS-PAGE）；
5.1.3蛋白表达放大+蛋白亲和纯化。
5.2动物免疫
5.2.1动物免疫4次，加强免疫一针，共计免疫5针；
5.2.2免疫前采集阴性血清，第4针采血进行ELISA检测血清效价；
5.2.3若第4针血清抗体效价（蛋白抗原>10^5；多肽抗原>10^4）满足要求，则采血前7天再次加强免疫1针，如不满足要求，则继续常规免疫；
5.2.4效价合格，采血（＞100ml）分离单核细胞。
5.3 cDNA制备
5.3.1 PBMC总RNA提取（参照RNA提取试剂盒）；
5.3.2高保真RT-PCR制备cDNA（参照反转录试剂盒）。
5.4文库制备
5.4.1以cDNA为模板，两轮PCR扩增VHH基因；
5.4.2酵母表达质粒构建与转化： VHH基因拼接酵母展示载体，电击转化酵母宿主菌，构建抗体库，电击次数不低于10次；
5.4.3鉴定：随机挑选24个克隆，PCR鉴定阳性率+PCR鉴定多样性+插入率。
5.5文库筛选
5.5.1磁珠分选；
5.5.2 FACS分选（免疫双标分选）；
5.5.3铺板+阳性克隆菌培养+抗体基因测序；（>20个，多达96个）。
5.6抗体表达
5.6.1将获得的抗体序列构建合适的表达载体（哺乳表达）进行表达+亲和纯化+抗体蛋白定量。
酵母展示（或酵母表面展示）是一种强大的蛋白质工程技术，它是用整合到酵母细胞壁中的重组蛋白的表达来分离和工程化抗体。自 2000 年首次发表以来，酵母表面展示已被广泛用于设计各种蛋白质以提高亲和力、特异性、表达、稳定性和催化活性。
2.酵母展示原理
酵母抗体展示技术（Yeast Display Technology）是指用抗体序列可变区与凝集素Aga2p融合表达，Aga2p蛋白亚基通过两个二硫键与固定在酵母细胞壁上的Aga1p 蛋白亚基结合，结合流式分选技术，将靶向抗原的特异性抗体给筛选出来。
3.纳米抗体
纳米抗体（Nanobody, Nbs）是驼科动物外周血清产生的一种单链抗体，这些抗体仅由重链组成，缺乏轻链和功能性CH1和CH4结构域。VHH晶体为2.5nm，长4nm，分子量只有15KDa。相较于传统抗体，纳米抗体因其分子量小，从而更容易可穿透血脑屏障；原核或真核系统有高表达量；特异性强，亲和力高；对人的免疫原性弱等优点，因此在抗肿瘤药物研发、心脑血管疾病、免疫疾病等领域有巨大价值。
4.纳米抗体酵母展示优缺点
4.1优点
（1）酵母作为真核表达系统，可以进行翻译后修饰来表达和折叠复杂的真核蛋白。
（2）相对噬菌体展示文库技术而言，酵母展示技术在微量抗体表达后抗体活性要高，得益此基础，在流式筛选时就能区分抗体的亲和力高低。
（3） 插入异源蛋白不会破坏表面蛋白的结构，也不会影响表面展示的效率。
4.2缺点
（1）相比于噬菌体展示技术，酵母展示库容量较低，因此主要应用于客户对项目库容要求不高，动物免疫后PBMC细胞经过二次分选以及避免漏掉二硫键形成的抗体发现项目；
（2）由于酵母表面存在多个蛋白质拷贝，可能会发生与寡聚蛋白靶标不希望的多价结合。
5.酵母抗体展示应用
随着这项技术的不断完善，现在酵母展示的应用包括酶工程；蛋白质表位作图、蛋白质-蛋白质相互作用的鉴定、免疫生物催化和生物传感器，以及用于生物技术和生物医学应用的酵母细胞上蛋白质和酶的展示。
6.泰克生物能够提供酵母抗体展示技术服务
泰克生物能够为客户提供高质量的纳米抗体酵母展示服务，主要服务流程如下：抗原准备，羊驼免疫，PBMC分离，RNA提取，cDNA制备，文库构建，文库筛选，抗体表达。
5.1抗原制备
5.1.1密码子优化+基因模板合成+表达载体构建；
5.1.2质粒抽提+转染（哺乳表达系统）目的蛋白检测（WB，SDS-PAGE）；
5.1.3蛋白表达放大+蛋白亲和纯化。
5.2动物免疫
5.2.1动物免疫4次，加强免疫一针，共计免疫5针；
5.2.2免疫前采集阴性血清，第4针采血进行ELISA检测血清效价；
5.2.3若第4针血清抗体效价（蛋白抗原>10^5；多肽抗原>10^4）满足要求，则采血前7天再次加强免疫1针，如不满足要求，则继续常规免疫；
5.2.4效价合格，采血（＞100ml）分离单核细胞。
5.3 cDNA制备
5.3.1 PBMC总RNA提取（参照RNA提取试剂盒）；
5.3.2高保真RT-PCR制备cDNA（参照反转录试剂盒）。
5.4文库制备
5.4.1以cDNA为模板，两轮PCR扩增VHH基因；
5.4.2酵母表达质粒构建与转化： VHH基因拼接酵母展示载体，电击转化酵母宿主菌，构建抗体库，电击次数不低于10次；
5.4.3鉴定：随机挑选24个克隆，PCR鉴定阳性率+PCR鉴定多样性+插入率。
5.5文库筛选
5.5.1磁珠分选；
5.5.2 FACS分选（免疫双标分选）；
5.5.3铺板+阳性克隆菌培养+抗体基因测序；（>20个，多达96个）。
5.6抗体表达
5.6.1将获得的抗体序列构建合适的表达载体（哺乳表达）进行表达+亲和纯化+抗体蛋白定量。
每日科技名词|半乳凝素
来源：全国科学技术名词审定委员会
半乳凝素
galectin
又称：S型凝集素（S-type lectin）
定义：广泛分布于动物界，在哺乳动物中多见的一个蛋白质家族。糖结合专一性都是β半乳糖基，并有类似的糖识别结构域，具有参与细胞间黏着，诱导细胞凋亡，促使细胞分裂等生理功能。
学科：生物化学与分子生物学_糖类
相关名词：凝集素 水溶性蛋白质 高尔基体
根据CRD的数目和排列方式可将半乳凝素分为三种类型：以单体或CRD非共价同源二聚体形式存在的原型半乳凝素；由一个非凝集素N端结构域连接到CRD上构成的嵌合型半乳凝素；在同一条肽链上具有串联的两个CRD结构，中间由70个以上的氨基酸连接的串联重复型半乳凝素。
半乳凝素分布广泛，在脊椎动物、无脊椎动物和单细胞真核生物（原生生物）中均有发现。半乳凝素广泛表达于纤维细胞、胚胎细胞、上皮细胞、内皮细胞、树突细胞、巨噬细胞、骨髓细胞、T细胞和B细胞等，表达后存在于细胞质基质和细胞核中，可通过一种非经典途径向细胞外分泌，该途径独立于内质网和高尔基体。
无论是胞内还是胞外的半乳凝素，都能够与蛋白质等分子相互作用，进而影响各种细胞活动。细胞内的半乳凝素穿梭在细胞核与细胞质之间，参与细胞的基本活动，包括前mRNA（前信使RNA）的剪接、细胞生长、凋亡以及细胞周期等过程。细胞外的半乳凝素能够识别并结合细胞外基质的糖蛋白，比如纤维连接蛋白、弹性蛋白等，或者结合细胞膜表面的糖蛋白或糖脂，引发一系列的跨膜信号反应。
大量研究表明半乳凝素与各种疾病有关，但在体内研究半乳凝素活性仍存在挑战，对其功能研究仍是一个开放且有前途的领域。[强] https://t.cn/A6pMRxWc
来源：全国科学技术名词审定委员会
半乳凝素
galectin
又称：S型凝集素（S-type lectin）
定义：广泛分布于动物界，在哺乳动物中多见的一个蛋白质家族。糖结合专一性都是β半乳糖基，并有类似的糖识别结构域，具有参与细胞间黏着，诱导细胞凋亡，促使细胞分裂等生理功能。
学科：生物化学与分子生物学_糖类
相关名词：凝集素 水溶性蛋白质 高尔基体
根据CRD的数目和排列方式可将半乳凝素分为三种类型：以单体或CRD非共价同源二聚体形式存在的原型半乳凝素；由一个非凝集素N端结构域连接到CRD上构成的嵌合型半乳凝素；在同一条肽链上具有串联的两个CRD结构，中间由70个以上的氨基酸连接的串联重复型半乳凝素。
半乳凝素分布广泛，在脊椎动物、无脊椎动物和单细胞真核生物（原生生物）中均有发现。半乳凝素广泛表达于纤维细胞、胚胎细胞、上皮细胞、内皮细胞、树突细胞、巨噬细胞、骨髓细胞、T细胞和B细胞等，表达后存在于细胞质基质和细胞核中，可通过一种非经典途径向细胞外分泌，该途径独立于内质网和高尔基体。
无论是胞内还是胞外的半乳凝素，都能够与蛋白质等分子相互作用，进而影响各种细胞活动。细胞内的半乳凝素穿梭在细胞核与细胞质之间，参与细胞的基本活动，包括前mRNA（前信使RNA）的剪接、细胞生长、凋亡以及细胞周期等过程。细胞外的半乳凝素能够识别并结合细胞外基质的糖蛋白，比如纤维连接蛋白、弹性蛋白等，或者结合细胞膜表面的糖蛋白或糖脂，引发一系列的跨膜信号反应。
大量研究表明半乳凝素与各种疾病有关，但在体内研究半乳凝素活性仍存在挑战，对其功能研究仍是一个开放且有前途的领域。[强] https://t.cn/A6pMRxWc
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