"FDC-P1 小鼠正常骨髓贴壁细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HEK-293H细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SGC7901/DDP细胞、H1650_CO细胞、10T1/2细胞
SL1细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Cates-1B细胞、NCI-H2347细胞、TFK1细胞
Rainbow Trout Embryo细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3传代,3-4天换液一次;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:多角;相关细胞有:SupB15W细胞、BOWES细胞、TOG细胞
SK-RC-52细胞;细胞背景资料:肾癌;纵隔膜转移;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SC细胞、H4IIE细胞、HT 1080.T细胞
HConEpic细胞;细胞背景资料:结膜;上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Vero 76 clone E-6细胞、KP-N-RT细胞、NCIH929细胞
贴壁消化难题:1,先用PBS 把细胞洗两遍,使瓶内没有血清了,减少对胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在细胞有些消化下来时,拿着瓶口,运用手腕的力量轻轻震荡瓶内液体,这样细胞很快就下来了,还不需要吹打,分散也均匀;2,成团、絮状:消化液里加入edta可以减少细胞成团的现象,血清可以终止胰酶的作用,如果是进口血清的话也能终止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清终止,如果消化液中加入了edta的话,就要将消化液倒干净,如果细胞贴壁要求不是很严格的话,一般不需要进行离心。鼻咽癌细胞的贴壁能力很强,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗涤时要洗净残余的培养基,加入胰酶后在培养箱中消化(避免细胞室温下受损以及在此温度时胰酶活性最强)至细胞收缩变圆(可显微镜下观察)且有少许细胞脱落(有流下来的趋势),随后立即弃去胰酶(如果脱落的细胞很多且需要大量细胞实验,则不能弃去胰酶),加入培养基仔细吹打(不能用无血清培养基或者PBS替代,否则细胞聚集成团块或絮状)。一般我都离心一次弃去上清(去除残留的胰酶及漂浮的死细胞或细胞碎片);消化过度:马上用培养基中和,用吸管吹打细胞,收集全部的细胞到以无菌的离心管中800RPM 3分钟。弃上清,用全培重悬,换新的培养瓶继续培养,状态不好的细胞在培养的过程中会死亡脱落,在换液的时候可以清除掉!
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:2-3天换液1次
FDC-P1 小鼠正常骨髓贴壁细胞系
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
LS-174T细胞;细胞背景资料:LS 174T是LS 180 (ATCC CL 187)结肠腺癌细胞株的胰蛋白酶化变种。 它比亲本更易传代,象LS 180一样生成大量的癌胚抗原(CEA)。 电镜研究表明有丰富的微丝和细胞质粘液素液泡。 直肠抗原3阳性。 p53抗原表达阴性,但mRNA表达阳性。 与ATCC CL-187来源于同一个肿瘤。LS 174T细胞角蛋白染色阳性。 癌基因c-myc, N-myc, H-ras, N-ras, Myb, 和 fos的表达呈阳性。 癌基因k-ras和sis的表达未做检测。;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:H4-II-EC3细胞、NCIH1869细胞、SKCol1细胞
Hs840_T细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:4—1:8传代,每周换液2—3次;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;相关细胞有:LIXC002细胞、578T细胞、EoL-1 cell细胞
PC-9/S1细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:SU86-86细胞、H-498细胞、D407细胞
HepaRG细胞;细胞背景资料:肝癌;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Sp2/O细胞、HRVEC细胞、HEMCSS细胞
NCIH2228细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代,每周2-3次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞
细胞生长特性:悬浮生长
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞形态特性:淋巴母细胞
NCIH2228细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代,每周2-3次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞
Tca-8113细胞;细胞背景资料:舌鳞癌;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:KM12细胞、Hca-F细胞、NP-69细胞
NCI747细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2次;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:N87细胞、KYSE0520细胞、NCI-H735细胞
CTV-1细胞;细胞背景资料:急性T淋巴细胞白血病;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞
Calu-6细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:消化20分钟。1:2。5-6天长满。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:GTL-16细胞、SW-13细胞、GM06141细胞
Ej138细胞;细胞背景资料:膀胱癌;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Hi5细胞、MB-49细胞、G422细胞
SCC-25细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3-1:10传代,2-3天换液1次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞
FDC-P1 小鼠正常骨髓贴壁细胞系
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理;霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
HF-91细胞;细胞背景资料:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞
SUD4细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:淋巴母细胞;相关细胞有:HNTEC细胞、T HEECs细胞、Hs688(A)T细胞
Ha Fe细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
LN 229细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞
BrCL18细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:MUTZ3细胞、SKMEL-2细胞、VK-2/E6E7细胞
MeWo细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3-1:5传代,2-3天换液1次。;细胞生长特性:混合生长;细胞形态特性:成纤维细胞;相关细胞有:OCI-Ly3细胞、HBVSMC细胞、OPM-2细胞
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"AAV-293 腺病毒转化的人胚肾贴壁细胞系
细胞背景资料:我们推荐使用AAV-293细胞株繁殖腺病毒相关重组病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293细胞株,但产生的病毒滴度更高。 HEK293细胞是剪切过的腺病毒5型DNA转染的人胚肾细胞。 跟HEK293细胞一样,AAV-293细胞反式表达腺病毒E1基因,当共转染三个AAV助质粒(一个含ITR的质粒,pAAV-RC, 和E1缺失助质粒)时,可以产生有感染力的腺病毒-相关病毒颗粒。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
D-341 Med细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:髓母细胞样;相关细胞有:OVCAR8/ADR细胞、EOC-20细胞、HuCC-T1细胞
WEHI3细胞;细胞背景资料:白血病;BALB/c;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Hs294T细胞、RPMI-7951细胞、SGC7901/DDP细胞
D-283 Med细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮细胞的多细胞聚集体,和一些贴壁细胞;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:KALS1细胞、HCC1954 BL细胞、RA-FLSs细胞
Rat1细胞;细胞背景资料:成纤维细胞;自发永生;Fischer 344;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:INS-1细胞、HPaSteC(HPSC)细胞、SW 780细胞
KU 19-19细胞;细胞背景资料:膀胱癌;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞
细胞传代培养实验:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或1:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养;细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间,与细胞世代或倍增不同。在一代中,细胞培增3~6次。细胞传代后,一般经过三个阶段:游离期、指数增生期和停止期。常用细胞分裂指数表示细胞增殖的旺盛程度,即细胞群的分裂相数/100个细胞。一般细胞分裂指数介于0.2%~0.5%,肿瘤细胞可达3~5%;细胞接种2~3天分裂增殖旺盛,是活力最好时期,称指数增生期(对数生长期),适宜进行各种试验。实验步骤:1.将长成的培养细胞从二氧化碳培养箱中取出,在超净工作台中倒掉瓶内的培养液,加入少许消化液。(以液面盖住细胞为宜),静置5~10分钟。2.在倒置镜下观察被消化的细胞,如果细胞变圆,相互之间不再连接成片,这时应立即在超净台中将消化液倒掉,加入3~5ml新鲜培养液,吹打,制成细胞悬液。3.将细胞悬液吸出2ml左右,加到另一个培养瓶中并向每个瓶中分别加3ml左右培养液,盖好瓶塞,送回二氧化碳培养箱中,继续进行培养。一般情况,传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上,2~4天就可在瓶内形成单层,需要再次进行传代。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
AAV-293 腺病毒转化的人胚肾贴壁细胞系
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞
NCIH524细胞;细胞背景资料:该细胞1982年建系,源自非小细胞肺癌男性患者的转移淋巴结。;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:圆形细胞;相关细胞有:SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
MBT2细胞;细胞背景资料:膀胱移行细胞癌;C3H/He;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:PC-9/GR细胞、M-14细胞、MHCC97H细胞
ROS 17/2.8细胞;细胞背景资料:骨肉瘤;ACI 9935;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞
Mono Mac6细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞;相关细胞有:138 MG细胞、KATOIII细胞、SCC-9细胞
细胞生长特性:贴壁生长
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
细胞形态特性:上皮细胞
U138细胞;细胞背景资料:星形细胞瘤;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:EJ-1细胞、SW-1353细胞、EC-9706细胞
H82细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2—1:5传代,每周换液2-3次;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:FRTL-5细胞、H596细胞、OCM-1细胞
P-19细胞;细胞背景资料:P19细胞株是从C3H/He小鼠中诱导的恶性畸胎瘤中建立的。该细胞在含有0.1mM的培养基中可高效率地克隆。该细胞具有多能性,在500nM维A酸诱导下可以分化成神经和神经胶质样细胞;在0.5%~1.0%二甲亚砜(DMSO)存在下,分化形成心脏和骨骼肌样细胞,但不形成神经或神经胶质样细胞;在DMSO和维A酸同时存在时,细胞的分化与只有维A酸一样。;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞
Tca8113细胞;细胞背景资料:舌鳞癌;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Hs 695T细胞、SUDHL-5细胞、Tu-212细胞
THP1细胞;细胞背景资料:该细胞从一名1岁的患有急性单核细胞性白血病的男孩的外周血中分离建立。该细胞可以吞噬乳胶颗粒和激活的红细胞,细胞膜和胞浆内均没有免疫球蛋白,表达C3R和FcR;可受佛波酯TPA诱导向单核系方向分化;可作为转染宿主。;细胞传代方法:维持细胞浓度在2-4×105-8×105/ml,勿超过1×106/ml;2-3天换液1次。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:单核细胞;相关细胞有:HBVP细胞、WM115-mel细胞、MUTZ3细胞
CSQT-2细胞;细胞背景资料:肝癌;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Blotchy fibroblast-11细胞、COR-L88细胞、BT-474细胞
NCI-128细胞;细胞背景资料:小细胞肺癌;胸腔积液转移;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞
AAV-293 腺病毒转化的人胚肾贴壁细胞系
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理;霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
MCF.7细胞;细胞背景资料:MCF-7细胞保留了多个分化了的乳腺上皮的特性,包括:能通过胞质雌激素受体加工雌二醇并能形成圆形复合物(domes)。该细胞含有Tx-4癌基因。肿瘤坏死因子α(TNFalpha)可以抑制MCF-7细胞的生长。抗雌激素处理细胞能调变IGFBP'S的分泌。;细胞传代方法:1:2传代,3-4天长满;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:SKNEP1细胞、HCEC细胞、AGS细胞
PC3-M细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞
NCI-ADR-RES细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Wayne State University-Head and Neck 13细胞、RPMI1846细胞、WEHI164细胞
HKC细胞;细胞背景资料:胚胎;肾小管;上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SW-982细胞、PL9细胞、BL1339细胞
HEC-1A细胞;细胞背景资料:这株细胞及其亚株HEC-1-B是H.Kuramoto及其同事1968年从一位IA期子宫内膜癌患者身上分离得到的。PAF可以诱导其c-fos的表达。;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:Oka-C1细胞、SK Col 1细胞、OEC33细胞
WPMY1细胞;细胞背景资料:肌成纤维基质细胞株,WPMY-1,与RWPE-1cells(ATCCCRL-11609)一样,来源于同一张成人前列腺组织切片的周围区域的基质细胞。通过一个pRSTV质料结构,用SV40大T抗原对基质细胞进行永生化。WPMY-1细胞,与RWPE-1细胞及其它上皮细胞衍生株一样,属于来源于同一个前列腺的一系列细胞株。由于它们来源于同一个前列腺的周围区域,WPMY-1细胞株对于研究分泌和基质与上皮细胞相互作用尤其有用。;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成肌细胞;相关细胞有:TJ905细胞、SNU-C1细胞、KYSE 140细胞
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"HEK293-F 人胚肾贴壁细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Hs 766细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2—1:8传代,每周换液2—3次;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞
COV434细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;相关细胞有:SRS-82细胞、NWA细胞、FL83B细胞
BEL-7402细胞;细胞背景资料:BEL-7402细胞株是1974年从临床肝癌手术标本中建立的。;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:5-8F细胞、P-36细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞
SUM190细胞;细胞背景资料:乳腺癌;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SW 780细胞、JURKAT E-61细胞、SCC15细胞
CCRF细胞;细胞背景资料:G.E. Foley 等人建立了类淋巴母细胞细胞株CCRF-CEM。 细胞是1964年11月从一位四岁白人女性急性淋巴细胞白血病患者的外周血白血球衣中得到。此细胞系从香港收集而来。;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;相关细胞有:EC9706细胞、SP2/0 Ag-14细胞、EA hy 926细胞
细胞冻存复苏材料与方法步骤:常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器,规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点:(1)一般两周需充液氮一次,至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃,使用时注意勿让液氮溅到皮肤上,以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构,中间为真空层,瓶口有双层焊接处,应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时,要注意缓慢小心,并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导,使液氮直达瓶底,如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用,加液氮时更要缓慢,以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培养液,DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒),2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为:(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天最好换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为3×106~1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中,安瓿装1~1.5mL在火焰喷灯上封口,封口处要完全封闭,圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜,次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤:先将安瓿置入4℃冰箱中2~3小时,再移至冰箱冷冻室内3~4小时,再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时,最后沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,最好取出一只安瓿细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
HEK293-F 人胚肾贴壁细胞系
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HNE2细胞;细胞背景资料:鼻咽癌;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞
Y3-Ag1.2.3细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:HuH1细胞、NBL-1细胞、ETCC007细胞
U-2932细胞;细胞背景资料:弥漫大B淋巴瘤;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:Hs 839.T细胞、P3HR1细胞、NRK52E细胞
Colo-201细胞;细胞背景资料:该细胞源自一位70岁白人男性,CSAp (CSAp-)和CEA阴性。;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮+贴壁;细胞形态特性:淋巴细胞;相关细胞有:NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞
HPAF-2细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞
细胞生长特性:贴壁生长;悬浮生长
细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是最常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体最突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体最有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小抑制作用,所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。
细胞形态特性:上皮细胞样
HPAF-2细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞
NCI-H1355细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:每周换液2次。;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:NCI-H1618细胞、COLO-1细胞、T 24细胞
PLC8024细胞;细胞背景资料:该细胞系分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)。 此细胞系原先被支原体污染,后用BM-cycline去除支原体;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;相关细胞有:LS-174T细胞、KYSE30细胞、Panc3_27细胞
H-2029细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3-1:5传代;;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:NCTC-929细胞、UM-UC3细胞、SK MES 1细胞
SK-OV-433细胞;细胞背景资料:卵巢癌;女性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:KYSE-450细胞、WIL2S细胞、DMS 273细胞
YD38细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:AG06814-J细胞、OVCAR-8/ADR细胞、143B细胞
NCIH520细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:3-1:6传代;2-3天换液1次;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:SUDHL-16细胞、A 172细胞、DC2.4细胞
HEK293-F 人胚肾贴壁细胞系
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
MDA-MB-468-RED细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:GM346细胞、Medical Research Council cell strain-5细胞、Me Wo细胞
HLFa细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;相关细胞有:H1563细胞、SNU-398细胞、H2196细胞
CTV-1细胞;细胞背景资料:急性T淋巴细胞白血病;男性;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞
NCI N87细胞;细胞背景资料:NCI-N87细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG72,并且没有左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性。它们的血管活性的肠肽(VIP)受体活性极低并缺乏胃泌激素受体。它们表达蕈毒碱胆碱受体。没有证据表明存在N-myc,L-myc,myb和EGF受体基因的重组。这个细胞株表达的c-myc和c-erb-B2RNA水平与其它细胞株相当。以下基因不表达:N-myc,L-myc,c-cis,IGF-2,或胃泌激素释放肽。报道NCI-N87细胞的植板率为4.3%。;细胞传代方法:消化15-20分钟。1:2。4-5天长满。;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;相关细胞有:MGC-803细胞、MV4-11细胞、NCIH208细胞
WM-266-4细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2传代;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;相关细胞有:CCD-966SK细胞、T-HSC细胞、MCF-7/ADR-RES细胞
Hs606T细胞;细胞背景资料:详见相关文献介绍;细胞传代方法:1:2—1:3传代,2—3天换液一次;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;相关细胞有:FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞
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