Allergy
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Minnie:eolgul eomneun feed pari nallineun

followers I’m a hater of instagram

hater of tiktok lock geollin gaelleori
宋雨琦:bolpumeomneun fit mweonde

undongdo an hago meikeueop hanado

mothago geurae nan naega bwado

byeolloingeol
田小娟:maeil bam In tamsaek tab naman

eomneun syanel waenji naboda

seongsukhan yojeum 10dae MZ

haeshitaegeu what the Y2K sesangeun

na ppaego jal doraga
叶舒华:please give me the hate button nan

naega neomu shilhgeodeun
田小娟:bireomeogeul my name
曹薇娟:why ain’t I pretty why ain’t I lovely why

ain’t I sexy why am I me love me love

me love me love me love me want love

me love me love me love me love me

want
宋雨琦:she so pretty yea so lovely she got

everything why am I not her love me

love me love me love me love me but

bireomeogeul huh nae geoul alreoji
叶舒华:nado want to dance hype boy but

hwamyeon sogen like tomboy biuseul

geoya geurae geu boy
田小娟:oh god it’s so funny maltuneun wae

too much dope naega mweonde

seonggyeokkkaji johji ana geurae maja

naneun pyeongsaeng honjailjido
Minnie:please give me your like button nado

sarangbatgo shipgeodeun
宋雨琦:bireomeogeul my name
曹薇娟:why ain’t I pretty why ain’t I lovely why

ain’t I sexy why am I me love me love

me love me love me love me want love

me love me love me love me love me

want
宋雨琦:she so pretty yea so lovely she got

everything why am I not her love me

love me love me love me love me but

bireomeogeul huh nae geoul alreoji
合唱:ra(x40)
田小娟:bireomeogeul huh nae geoul alreoji

Queencard
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Minnie:hey you mweol boni naega jom sexy

sexy banaenni ye you mweo hani

neodo nae kiss kiss weonhani
田小娟:weol hwa su mok geum to il mimoga

shwijireul anne
宋雨琦:meoributeo balkkeutkkaji nunbusheo

bichi nane
叶舒华:oh jeogi eonniyadeul nae fashioneul

ttara hane
曹薇娟:areumdaun yeojaye haruneun da

areumdamne i partye junbidwen

birthday cake taeeonaseo gamsahae

every day
Minnie:I don’t need them geurae naega bwado

nan
田小娟:queencard I’m hot my boob and booty

is hot spotlight nal bwa I’m a star star

star
宋雨琦:queencard I’m the top I’m twerking on

the runway
叶舒华:I am a queencard you wanna be the

queencard
田小娟:I’m a queencard I’m a queencard I’m a

I’m a I’m a queencard I’m a queencard
Minnie:take a photo
曹薇娟:I’m a queencard I’m a queencard I’m a

I’m a I’m a queencard I’m a queencard
宋雨琦:look so cool look so sexy like kim

kardashian look so cute look so pretty

like ariana
叶舒华:I wanna with you ppoppo I wanna with

you poong
宋雨琦:jakku yeppeojyeo geoul sok neoeo
Minnie:i partye junbidwen blue champagne

taeeonan geol chukhahae every day
曹薇娟:I don’t need them geurae naega bwado

nan
宋雨琦:queencard I’m hot my boob and booty

is hot spotlight nal bwa I’m a star star

star
田小娟:queencard I’m the top I’m twerking on

the runway
Minnie:I am a queencard you wanna be the

queencard
宋雨琦:I’m a queencard I’m a queencard I’m a

I’m a I’m a queencard I’m a queencard 
田小娟:take a photo
叶舒华:I’m a queencard I’m a queencard I’m a

I’m a I’m a queencard I’m a queencard
合唱:amugeona geolchin girl queenkakaka

mareugeona saljjin girl queenkakaka

jashingam neomchineun girl

queenkakaka
曹薇娟:I am a queencard you wanna be the

queencard

人钩端螺旋体IgG抗体(Lep IgG)酶联免疫法
人钩端螺旋体IgG抗体(Lep IgG)酶联免疫法
人钩端螺旋体IgG抗体(Lep IgG)酶联免疫法

编制：深圳市恒昊生物科技有限公司
电连：I73==I806==9I87

使用目的：
本试剂盒用于测定人血清、血浆、细胞、组织匀浆及相关液体样本中钩端螺旋体 IgG
抗体(Lep IgG)表达。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人钩端螺旋体 IgG 抗体(Lep IgG)表达。用纯化
的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中钩端螺旋体 IgG 抗体(Lep IgG)相结合，经
洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与 HRP 标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原
复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸
的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），与 CUTOFF
值相比较，从而判定标本中人钩端螺旋体 IgG 抗体(Lep IgG)的存在与否。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1 瓶
2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 阳性对照 0.5ml×1 瓶
3 酶标包被板 12 孔×8 条 9 阴性对照 0.5ml×1 瓶
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上
进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照 2 孔、阳性对照 2 孔、空白对照 1
孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）
2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先加
样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔
壁，轻轻晃动混匀，
3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重
复 5 次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15
分钟. 10. 终止：每孔加终止液 50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白孔调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.20
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品 OD 值< 临界值（CUT OFF）者为钩端螺旋体 IgG 抗体(Lep IgG)阴性
阳性判定：样品 OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为钩端螺旋体 IgG 抗体(Lep IgG)阳性。
注意事项
1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。
2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。
3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5．底物请避光保存。
6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为 630nm
7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸，使用时必须
注意安全。
保存条件及有效期
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6 个月
本试剂盒仅供研究使用。