临床大队列蛋白质组学整体解决方案助力精准诊疗
原创 金开瑞生物 金开瑞生物 4天前
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简介
在精准医学和大数据时代、人工智能的大背景下，高通量大队列样本组学（Omics）研究在生命科学研究以及在临床病理研究、临床诊疗领域得到广泛应用。蛋白质作为生命活动和功能的直接执行者，在研究生理、病理机制以及临床诊断、预后评估、治疗靶点以及药物靶点研究中扮演着重要角色。蛋白质组学大队列样本在临床诊疗、疾病机制研究中的应用受到科学家的广泛关注。
然而，制约大队列样本蛋白质组学技术的两大因素极大地限制了其应用，一是针对大样本质谱检测的机时问题以及由此带来的批次效应（质谱长时间运行导致其性能下降，样品间的仪器误差增大），二是对复杂的大样本数据的深度挖掘。金开瑞针对这两个问题专门开发了包含蛋白质组学技术服务、大数据深度挖掘和标志物深度验证三大模块的临床大队列样本蛋白质组学整体解决方案，为科研工作者提供专业、全方位的技术服务。
方案流程
1. 蛋白质组学技术
2. 大数据深度挖掘
3. 疾病标志物验证
通过高通量、大规模蛋白质组学技术及生物信息学、统计学等手段，可以筛选到部分候选蛋白标志物，其表达量往往在疾病/正常样本中具有明显的差异。但是，仅仅通过蛋白质组学手段不足以确定，还需要进行进一步验证和确证[1]（下图）。金开瑞拥有成熟的抗体制备平台、Wester Blot实验平台、免疫组织化学平台和ELISA制备平台，为您提供完整的标志物各阶段验证实验。
标志物筛选的四个步骤
技术优势
1. microflow-LC技术[2-5]
微流控液相色谱-质谱（microflow-LC MS/MS）系统由于其大流速、粗管路的特点，具有耐脏、高稳定性、短梯度等优势，在处理大队列样本过程，可大大降低质谱数据采集过程的偏差，提升队列数据的整体质量。具体表现为如下优势：
大幅缩短检测周期。处理100例样本，传统LC-MS/MS系统大约需12天左右，采用micro-SWATH仅需5天即可完成。
有效降低批次效应。得益于微流控系统的高稳定性和短梯度等特点，microflow系统在处理大队列样本时表现出卓越的一致性，几乎无批次偏倚。
定量结果表现出良好的一致性（20例人血浆样本）
极大提升定量准确性。microflow针对大样本定量检测表现出极佳的准确性，样品间的相关系数普遍在0.9以上。
microflow-SWATH结果表现出良好的相关性（20例血浆样本）
2. 数据分析整体解决方案
在精准医学和大数据时代、人工智能的大背景下，大队列样本的数据分析成为科学家关注的重点，也是难点。通过调阅相关CNS文献报道，结合蛋白质组学数据本身特点，我们开发了一套专门针对临床疾病（尤其是肿瘤）的大队列数据分析方案，充分挖掘大数据中隐藏的信息，为临床诊断、治疗及疾病机制研究提供可靠的证据。
数据预处理保证数据质量。三大维度预处理，保证高可靠、高质量数据[6]。
三大维度数据质量控制，确保数据的高质量
分子分型助力精准诊疗。蛋白质层面的分子分型可以帮助临床医生更准确地识别不同类型的肿瘤，确定精准的治疗方案，更加适合指导肿瘤患者用药、治疗，预后评估，并通过功能分析以及生存分析发现在通路富集和总体生存率层面蛋白分子水平分型是否存在显著差异，进一步证实根据蛋白质进行分类的科学性。是肿瘤分子分型的又一大热点[7]。
共识聚类的凭据共识矩阵和轮廓距离确定最佳分类数
多组学整合分析揭示病理机制。尽管目前的研究结果显示转录组和蛋白质组表达趋势相关性较差，但mRNA和蛋白作为基因表达的共同产物，在某种程度上必然存在因果关系或相关关系。我们通过分子分型结果，对两组学数据进行进一步细化、关联，从而得到常规关联分析所不能获得的信息，并结合差异表达分析，深入挖掘关键功能模块，探索疾病病理机制。除此之外，我们也开发了CNV/SNP对蛋白质表达/功能影响的相关算法，旨在研究基因层面突变对蛋白功能的影响[8]。
蛋白质组和转录组表达水平相关性分析
CNV和蛋白质/mRNA表达水平相关性分析
预后标志物筛选实现精准诊断。使用合理的描述性统计学和相关性分析等手段，经过严格的筛选标准，最终通过Cox回归模型分析影响患者生存预后的因素，结合变化倍数，可挖掘出针对肿瘤不同分子型的特异性表达蛋白，并通过KM生存曲线分析判断是否为预后不良病例的特异性蛋白标志物[8]。
标志物筛选的基本流程
候选药物靶点提名实现精准用药。基于蛋白质组学及蛋白质组学分型结果，结合是否为已知临床药物靶点，可以针对肿瘤或特定分子型筛选具有药物靶点潜能的显著差异蛋白，从而达到精准用药[9]。
3. 标志物验证和确证
蛋白质标志物的鉴定往往需要经过四个阶段：a) 发现阶段，通过大队列样本蛋白质组学的Discovery 策略，结合数据的深度挖掘，最终选定上百种候选标志物蛋白进行进一步验证；b) 差异表达验证，经过此阶段，一般最终筛选到几十种蛋白符合预期；c) 概念阶段验证，进而实现临床疾病诊断、治疗的医学转化。金开瑞可提供多种蛋白质定性、定量验证手段。
基于质谱PRM验证。通过高分辨质谱对靶蛋白-肽段的特异识别检测，可实现蛋白的精确定量，具有通量高、定量准确的优势，一次可同时验证上百种蛋白标志物；
PRM验证的基本原理
基于Western blot验证。制备候选靶点蛋白的单多克隆抗体，基于抗原抗体的特异性反应实现对样本中目标蛋白的定性/半定量检测。验证过程中可选择多例表型差异的样品进行平行检测，通过识别信号的强弱及灰度分析值进一步判断靶点蛋白作为候选靶标的准确性。
Western blot验证的基本原理
基于IHC验证。制备候选靶点蛋白的单多克隆抗体，基于抗原抗体的特异性反应实现对样本中目标蛋白的定性/半定量检测。区别于WB，IHC更侧重靶点蛋白的亚细胞定位，对特异性进一步做了补充，着色深浅跟目标蛋白的含量呈正相关。
immunochemistry验证的基本原理
基于Sandwich ELISA验证。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记，受检标本加入后，与固相载体表面的抗原或抗体起反应，再加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据呈色的深浅进行定性或定量分析。对于大分子的靶标蛋白检测，通常是基于夹心ELISA原理进行定量检测产品的开发，这一步主要是扩大测样通量，以满足诊断级别的样本检测例数，同时对靶标蛋白进行绝对定量。
Sandwich ELISA验证的基本原理
限时优惠
活动期间，做一个蛋白质组送一个WB验证。
活动日期截止：2021年5月30日
更多优惠活动请咨询当地销售
参考文献
1. Del Campo, M., et al., Facilitating the Validation of Novel Protein Biomarkers for Dementia: An Optimal Workflow for the Development of Sandwich Immunoassays. Front Neurol, 2015. 6: p. 202.
2. Broccardo, C.J., et al., Multiplexed analysis of steroid hormones in human serum using novel microflow tile technology and LC-MS/MS. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci, 2013. 934: p. 16-21.
3. Sun, R., et al., Accelerated Protein Biomarker Discovery from FFPE Tissue Samples Using Single-Shot, Short Gradient Microflow SWATH MS. J Proteome Res, 2020. 19(7): p. 2732-2741.
4. Needham, S.R., Microspray and microflow liquid chromatography: the way forward for LC-MS bioanalysis. Bioanalysis, 2017. 9(24): p. 1935-1937.
5. Distler, U., et al., Enhancing Sensitivity of Microflow-Based Bottom-Up Proteomics through Postcolumn Solvent Addition. Anal Chem, 2019. 91(12): p. 7510-7515.
6. Gillette, M.A., et al., Proteogenomic Characterization Reveals Therapeutic Vulnerabilities in Lung Adenocarcinoma. Cell, 2020. 182(1): p. 200-225 e35.
7. Xu, J.Y., et al., Integrative Proteomic Characterization of Human Lung Adenocarcinoma. Cell, 2020. 182(1): p. 245-261 e17.
8. Gao, Q., et al., Integrated Proteogenomic Characterization of HBV-Related Hepatocellular Carcinoma. Cell, 2019. 179(5): p. 1240.
9. Ge, S., et al., Author Correction: A proteomic landscape of diffuse-type gastric cancer. Nat Commun, 2018. 9(1): p. 1850.
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简介
在精准医学和大数据时代、人工智能的大背景下，高通量大队列样本组学（Omics）研究在生命科学研究以及在临床病理研究、临床诊疗领域得到广泛应用。蛋白质作为生命活动和功能的直接执行者，在研究生理、病理机制以及临床诊断、预后评估、治疗靶点以及药物靶点研究中扮演着重要角色。蛋白质组学大队列样本在临床诊疗、疾病机制研究中的应用受到科学家的广泛关注。
然而，制约大队列样本蛋白质组学技术的两大因素极大地限制了其应用，一是针对大样本质谱检测的机时问题以及由此带来的批次效应（质谱长时间运行导致其性能下降，样品间的仪器误差增大），二是对复杂的大样本数据的深度挖掘。金开瑞针对这两个问题专门开发了包含蛋白质组学技术服务、大数据深度挖掘和标志物深度验证三大模块的临床大队列样本蛋白质组学整体解决方案，为科研工作者提供专业、全方位的技术服务。
方案流程
1. 蛋白质组学技术
2. 大数据深度挖掘
3. 疾病标志物验证
通过高通量、大规模蛋白质组学技术及生物信息学、统计学等手段，可以筛选到部分候选蛋白标志物，其表达量往往在疾病/正常样本中具有明显的差异。但是，仅仅通过蛋白质组学手段不足以确定，还需要进行进一步验证和确证[1]（下图）。金开瑞拥有成熟的抗体制备平台、Wester Blot实验平台、免疫组织化学平台和ELISA制备平台，为您提供完整的标志物各阶段验证实验。
标志物筛选的四个步骤
技术优势
1. microflow-LC技术[2-5]
微流控液相色谱-质谱（microflow-LC MS/MS）系统由于其大流速、粗管路的特点，具有耐脏、高稳定性、短梯度等优势，在处理大队列样本过程，可大大降低质谱数据采集过程的偏差，提升队列数据的整体质量。具体表现为如下优势：
大幅缩短检测周期。处理100例样本，传统LC-MS/MS系统大约需12天左右，采用micro-SWATH仅需5天即可完成。
有效降低批次效应。得益于微流控系统的高稳定性和短梯度等特点，microflow系统在处理大队列样本时表现出卓越的一致性，几乎无批次偏倚。
定量结果表现出良好的一致性（20例人血浆样本）
极大提升定量准确性。microflow针对大样本定量检测表现出极佳的准确性，样品间的相关系数普遍在0.9以上。
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2. 数据分析整体解决方案
在精准医学和大数据时代、人工智能的大背景下，大队列样本的数据分析成为科学家关注的重点，也是难点。通过调阅相关CNS文献报道，结合蛋白质组学数据本身特点，我们开发了一套专门针对临床疾病（尤其是肿瘤）的大队列数据分析方案，充分挖掘大数据中隐藏的信息，为临床诊断、治疗及疾病机制研究提供可靠的证据。
数据预处理保证数据质量。三大维度预处理，保证高可靠、高质量数据[6]。
三大维度数据质量控制，确保数据的高质量
分子分型助力精准诊疗。蛋白质层面的分子分型可以帮助临床医生更准确地识别不同类型的肿瘤，确定精准的治疗方案，更加适合指导肿瘤患者用药、治疗，预后评估，并通过功能分析以及生存分析发现在通路富集和总体生存率层面蛋白分子水平分型是否存在显著差异，进一步证实根据蛋白质进行分类的科学性。是肿瘤分子分型的又一大热点[7]。
共识聚类的凭据共识矩阵和轮廓距离确定最佳分类数
多组学整合分析揭示病理机制。尽管目前的研究结果显示转录组和蛋白质组表达趋势相关性较差，但mRNA和蛋白作为基因表达的共同产物，在某种程度上必然存在因果关系或相关关系。我们通过分子分型结果，对两组学数据进行进一步细化、关联，从而得到常规关联分析所不能获得的信息，并结合差异表达分析，深入挖掘关键功能模块，探索疾病病理机制。除此之外，我们也开发了CNV/SNP对蛋白质表达/功能影响的相关算法，旨在研究基因层面突变对蛋白功能的影响[8]。
蛋白质组和转录组表达水平相关性分析
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标志物筛选的基本流程
候选药物靶点提名实现精准用药。基于蛋白质组学及蛋白质组学分型结果，结合是否为已知临床药物靶点，可以针对肿瘤或特定分子型筛选具有药物靶点潜能的显著差异蛋白，从而达到精准用药[9]。
3. 标志物验证和确证
蛋白质标志物的鉴定往往需要经过四个阶段：a) 发现阶段，通过大队列样本蛋白质组学的Discovery 策略，结合数据的深度挖掘，最终选定上百种候选标志物蛋白进行进一步验证；b) 差异表达验证，经过此阶段，一般最终筛选到几十种蛋白符合预期；c) 概念阶段验证，进而实现临床疾病诊断、治疗的医学转化。金开瑞可提供多种蛋白质定性、定量验证手段。
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基于IHC验证。制备候选靶点蛋白的单多克隆抗体，基于抗原抗体的特异性反应实现对样本中目标蛋白的定性/半定量检测。区别于WB，IHC更侧重靶点蛋白的亚细胞定位，对特异性进一步做了补充，着色深浅跟目标蛋白的含量呈正相关。
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基于Sandwich ELISA验证。ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记，受检标本加入后，与固相载体表面的抗原或抗体起反应，再加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，根据呈色的深浅进行定性或定量分析。对于大分子的靶标蛋白检测，通常是基于夹心ELISA原理进行定量检测产品的开发，这一步主要是扩大测样通量，以满足诊断级别的样本检测例数，同时对靶标蛋白进行绝对定量。
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参考文献
1. Del Campo, M., et al., Facilitating the Validation of Novel Protein Biomarkers for Dementia: An Optimal Workflow for the Development of Sandwich Immunoassays. Front Neurol, 2015. 6: p. 202.
2. Broccardo, C.J., et al., Multiplexed analysis of steroid hormones in human serum using novel microflow tile technology and LC-MS/MS. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci, 2013. 934: p. 16-21.
3. Sun, R., et al., Accelerated Protein Biomarker Discovery from FFPE Tissue Samples Using Single-Shot, Short Gradient Microflow SWATH MS. J Proteome Res, 2020. 19(7): p. 2732-2741.
4. Needham, S.R., Microspray and microflow liquid chromatography: the way forward for LC-MS bioanalysis. Bioanalysis, 2017. 9(24): p. 1935-1937.
5. Distler, U., et al., Enhancing Sensitivity of Microflow-Based Bottom-Up Proteomics through Postcolumn Solvent Addition. Anal Chem, 2019. 91(12): p. 7510-7515.
6. Gillette, M.A., et al., Proteogenomic Characterization Reveals Therapeutic Vulnerabilities in Lung Adenocarcinoma. Cell, 2020. 182(1): p. 200-225 e35.
7. Xu, J.Y., et al., Integrative Proteomic Characterization of Human Lung Adenocarcinoma. Cell, 2020. 182(1): p. 245-261 e17.
8. Gao, Q., et al., Integrated Proteogenomic Characterization of HBV-Related Hepatocellular Carcinoma. Cell, 2019. 179(5): p. 1240.
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#玉门停电##酒泉身边事# 【停电通知】尊敬的电力客户：3月25日玉门这些地方计划停电、请各位用户做好停电期间的准备工作、并请相互转告~ 停电给您生活带来的不便、敬请谅解！衷心感谢您给予的合作和支持！
国网玉门市供电公司停电通知
（2021年3月25日）
1.停电时间：https://t.cn/A6tkAU5R ，35kV花海变电站停电检修。
停电范围：玉门市泽民源水暖有限责任公司、玉门市花海镇中心小学、陈天科变、玉门市泽民源水暖有限责任公司、粮管所变、花海处花海灌溉管理所中闸变、李振文、先进面粉厂、李振文变、南渠十一组变、先进一组上片变、东环路2变、中闸四组井变、花海镇机关一号变、乡锅炉变、供销社变、花海北环路变、东环路1变、南渠四队变、南渠五六组变、南渠七组变、南渠八组、南渠九组变、南渠十组变、黄水桥三四组变、黄水桥五六组变、黄水桥七组变、中闸上片变、中闸一组变、中闸四组变、中闸五组变、中闸六组变、中闸七组变、中闸八九组变、中闸十组变、中闸十一组变、先进一组变、先进二组变、先进四组变、先进五组变、南渠五组水井变、赵荣业水井变、花海镇先进六组水井变、先进六组变、先进七组变、先进八组变、陈玉虎变、侯正军动力、甘肃西能环保科技有限公司、东环路3变、史学生、中国铁塔股份有限公司酒泉市分公司、李吉明箱变、中国铁塔股份有限公司酒泉市分公司、玉门市花通客运有限责任公司汽车站、刘芳霞、玉门市中垦农副产品购销农民专业合作社、玉门市花海镇人民政府、先进二组照明变、甘肃盛泰嘉农牧有限公司、玉门市润丰仓储有限公司、中国联合网络通信有限公司酒泉市分公司、王吉昌、王茂功预制厂变、沈伟冷库、黄水桥二组变、小泉一组变、小泉二组变、小泉三九十组变、小泉四组变、小泉5组变、小泉六组上片变、小泉六组下片变、小泉七组变、小泉八组变、花海镇机关2变、花海西环路变、黄水桥一组变、小泉六组南水井变、小泉七组水井变、花海农村合作社、玉门市泽民源水暖有限责任公司、天都小区箱变、花海镇赵建东变、伍守祖、花海鑫易新村变、小泉八组照明变、黄花小区变、中国移动通信集团甘肃有限公司酒泉分公司、马尕德水井、马维刚水井、独山子锅炉房、铁福海水井、马正蛟水井、中国铁塔股份有限公司酒泉市分公司、金泉村水井2号变、独山子二村彩门水井变、独山子三村南水井变、独山子三村东水井变、独山子一村2号路水井变、农场三组变、农场四组变、独山子一村1号路东变、独山子一村1号路西变、独山子一村2号路东变、独山子一村2号路西变、独山子一村3号路中心变、独山子一村3号路西变、独山子一村4号路变、独山子一村5号路变、独山子二村1号路东变、独山子三村三路西变、独山子二村2号路东变、独山子二村2号路中变、独山子二村3号路东变、独山子三村学校东变、独山子三村1号路变、独山子三村学校西变、独山子三村2号路变、独山子三村3号路东变、独山子三村4号路变、独山子三村5号路北变、独山子乡四村一号路变、独山子四村2号路东变、独山子四村2号路西变、独山子四村3号路东变、独山子四村3号路西变、独山子四村4号路变、独山子四村5号路变、独山子三村5号路2变、独山子一村一号路桥头居民变、独山子养殖场变、独山子二村西井变、农场三组东井变、农场三组西井变、独山子乡金旺村水井变、独山子二村1号路西变、中国铁塔股份有限公司酒泉市分公司、玉门市独山子东乡族乡学区、玉门市独山子兴隆养殖厂、玉门市独山子东乡族乡人民政府、玉门市独山子东乡族乡源泉村水井、金泉村照明变、玉门市独山子乡人民政府富泰养殖场、玉门市独山子东乡族乡源泉村村民委员会、玉门市独山子乡金泉村圣果枸杞产业发展农民专业合作社、花海绿洲枸杞基地变、乔天山、张玉明、企业预制场变、周生华水井变、梁东春沙场变、酒泉永顺路桥建筑有限公司、花海灌区管理处总干渠工程管理所西河口管理段1号、花海处花海灌溉管理所3号西河口、中国铁塔股份有限公司酒泉市分公司、花海灌区管理处总干渠工程管理所西河口管理段2号、中国联合网络通信有限公司酒泉市分公司、陈玉虎、玉门市福瑞康枸杞种植农民专业合作社、中闸砖厂、孟世鹏沙场、花海处花海灌溉管理所南变、条湖水塔变、条湖一组变、条湖四组变、黄水桥南滩变、园艺场变2、条湖七组变、余兴海水井变、乔天齐变、条湖三组变、花金线养殖场变、陈天英水井变、农场一组变、水管所中变、小二楼变、南渠三组变、南渠二组变、南渠一组变、中闸南滩变、条湖二组变、条湖五组变、农场一组水井变、农场二组1变、谢维瑞、玉门市森林资源管理站、玉门国翔水电有限公司、南环路变、郭红水井、乔天山水井、玉门市花海液化石油气站、甘肃省疏勒河流域水资源局、单国荣、梁秉新水井、包一民、王文生水井、史宗德水井、龙泉村东戈壁变、玉门豫丰棉业有限公司、李永奇二号、季成龙、陈天泰水井、乡锅炉、梁秉明水井变、梁秉祥一号水井变、王春水井、南渠八组东戈壁水井、梁秉江水井变、张玉明水井、赵占林水井、独山子四村三号水井、独山子四村四号水井、金湾一组东井变、金湾一组南井变、金湾三组南井变、金湾三组水井变、金湾二组水井变、李永奇1变、金湾九组水井变、金湾二组西井变、金湾四组水井变、四村八组变、农场二组2变、农场二组3变、农场二组4变、农场二组5、五村西戈壁变、五村西戈壁1井变、五村西戈壁2井变、四村西戈壁水井变、五村南戈壁水井变、四村东戈壁变、五村东戈壁水井变、五村东戈壁变、三村东戈壁井变、三村五组变、金湾一二组变、金湾三组变、金湾四组变、金湾九组变、一支一号变、一支二号变、一支三号变、一支四号变、二支二号变、二支三号井变、二支四号变、三支一号变、小金湾三支二号变、小金湾三支三号变、三支四号变、三支五号变、三支六号变、小金湾三支七号变、四支一号变、四支二号变、四支三号变、四支四号变、小金湾乡机关1号变、小金湾乡机关2号变、二支一号井变、二支二号水井变、一村西戈壁变、西戈壁变、三村二组西戈壁变、乡西戈壁水塔变、三村西戈壁变、梁秉祥农场、花海供销社小金湾变、金湾一组照明、陈天才、五村南戈壁2变、小金湾乡机关3号变、五村西戈壁3变、金泉村水井1变、四支五号变、马占龙变、五村南戈壁1变、赵建荣、黄花分公司一分场蓄水池、小金湾乡机关4号变、独山子四村2井、独山子四村1井、小金湾三支二号照明变、小金湾二支三号照明变、张富兵、独山子温棚变、马阿力、玉门市小金湾东乡族乡人民政府、小金湾乡政府变、玉门市小金湾民族学校、小金湾一支三号东变、小金湾五村五组变、小金湾南戈壁新建1变、玉门市花海镇金湾村村民委员会、魏军祥、玉门市给排水服务站等。
台区经理电话：王文斌 :13893735563 袁震：18893283804
张宇航：18609378318
吕爱军：13893761842 高翔 :15349060333
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停电范围：辛克虎水井、柳湖乡日照温棚、赵本良、刘付业井、包宗让井、何承杰、王玉生水井、王忠堂水井、陈天贵水井、陈学军水井、马建国水井、李生文水井、张学良水井、中国铁塔股份有限公司酒泉市分公司、周健水井、陈天贵水井、周柱军水井、王茂功水井、李再福水井、马应俊水井、辛志国水井、尤尚喜水井变、周建、陈立正、袁玉平、周敬华水井、伍正勇、高玉红水井、卢建军水井、闫金明水井、赵国忠水井、赵国江水井、陈兴福水井、王登武水井、李兴明一号水井、伍寿德水井、张川荣井、史学生水井、西沙一标水塔、玉门市花海辣椒农民专业合作社、中国移动通信集团甘肃有限公司酒泉分公司、中国铁塔股份有限公司酒泉市分公司、条湖六组变、西峡一组变、西峡二组变、华西村变、富民一组变、富民二组变、富民三组变、富民四组变、岷州六组变、柳湖养殖场变、西峡三组水井变、柳湖乡高玉成水井变、花海镇青储场变、柳湖乡政府水井变、花海养殖场变、柳湖李应国水井变、柳湖西沙三标水塔变、西峡二队水井、廖永山二号水井、玉门联雄养殖有限责任公司、富民温棚1号变、刘万花、中国铁塔股份有限公司酒泉市分公司、玉门市鲲鹏生态养殖园、玉门市森林资源管理站、富民温棚基地2变、玉门天江建材有限责任公司、刘峰余、高学明、花海条湖南沙窝变、袁玉新、周琦、玉门华西农业发展有限责任公司、中国移动通信集团甘肃有限公司酒泉分公司、中国石油天然气股份有限公司甘肃酒泉销售分公司、中国移动通信集团甘肃有限公司酒泉分公司、玉门旭辉井变、兴旺一二组变、兴旺三四组变、小康一二三组变、小康四五组变、小康温棚变、柳湖乡兴旺养殖场变、玉门市普瑞农业开发有限公司、花海处花海灌溉管理所柳湖水管站岷州2变、柳湖防沙林、花海处花海灌溉管理所柳湖水管站岷州1变、中国电信股份有限公司玉门分公司、岷州村一四五组变、柳湖乡岷州温棚、柳湖乡人饮变、陈兴春水井、柳湖乡产业园区1、柳湖乡产业园区2、玉门远立洋畜牧有限公司、兴旺吃水井1号变、柳湖乡西河口水井、柳湖乡现代农业产业园区变、富民村水井变、伍振刚、柳湖乡现代农业产业园区2变、兴旺吃水井2变、玉门市柳湖镇办公楼用电、中国移动通信集团甘肃有限公司酒泉分公司、岷州三组变、岷州二组变、玉门市柳湖乡卫生院、玉门市柳湖镇人民政府、柳湖学校箱变配变、玉门市普瑞农业开发有限公司等。
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2021年3月23日 https://t.cn/R2Wxe09
【IPO撤单增加市场忧心？这25家公司终止背后透露重要信息】
据《科创板日报》报道，近期以来，科创板IPO企业回撤数量正在增加，市场也产生担忧，企业IPO是不是变得更严了。
据《科创板日报》记者统计数据显示，2021年以来，科创板共受理了12家企业的申报材料，其中自今年春节假期以来，科创板仅受理5家企业的申报材料。与此同时，自今年1月8日天士生物申请撤回科创板申报材料后，截至目前共有25家科创板申报企业选择撤回材料，其中春节假期后撤回材料的企业达14家。
有国内头部机构投行人士向《科创板日报》记者表示，春节假期后受理企业数量降低，是正常的，因为企业选择930（9月30日）制作的申报材料较少，更多的企业会选择以年报或者是630（6月30日）为基准日，“本身在12月31日后，在四五月份之前申报的企业，每年都较少，但后续若科创板门槛的提高可能会影响一些企业的申报”。
撤单变化：去年12月3轮及以上企业达8家今年多未披露回复
上交所科创板审核官网显示，截至目前，共有89家企业终止IPO审核，其中2019年终止IPO审核的企业有23家，更多企业集中2019年后。
《科创板日报》记者统计，以2020年12月为分界线，2020年1至11月，共有26家企业选择主动终止IPO审核，而2020年12月开始，企业选择撤回IPO材料的现象开始增多，当月共有15家企业撤回IPO材料。步入2021年，又新增25家企业终止科创板IPO申报，即自2020年12月1日至2021年3月12日，总计40家企业撤回材料，占到科创板终止审核企业总数的44.9%。
《科创板日报》记者以2020年12月终止科创板IPO的15家企业，与今年以来终止科创板IPO的25家企业进行对比发现，两批企业在问询答复轮次、被问询的内容等方面有着较大差异。
在今年终止科创板IPO的25家企业中，包括禾赛科技、开创环保等12家企业的发审状态定格在：已问询，但未回复；3月12日撤回材料的齐治科技、锐芯微等4家企业发审状态为：已披露一轮问询回复；同样在3月12日撤回材料的联动科技，在终止IPO前已披露了第二轮问询答复，与其身处同一发审状态的企业还包括：蓝科环保、天和磁材、上海拓璞以及天士生物；而森泰股份与光华科技是2家回复第三轮问询后，选择撤回材料的企业。
尚沃医疗则是今年撤材料的科创板申报名单中，唯一已过会的公司，前者于2020年9月29日通过上市委的审议，但此后公司一直未递交注册材料，此后在今年3月日公司选择撤回申报材料。
而在2020年12月选择终止科创板IPO的企业中，回复二轮及二轮以下的企业共有6家；奥雷德、微导纳米、泽生科技等6家企业在披露第三轮问询后，终止IPO，其中中加特在上会审议前期撤回了材料；另外，健耕医药回复了四轮问询；艾索信息更是在回复到5轮问询后，选择撤回IPO材料。
与上述企业相比，正济药业或许是撤回材料最快的一家企业，公司科创板申报材料于2020年12月3日获受理，但在12月25日，公司随即选择撤回材料。
现场督导显威力
值得注意的是，2020年12月以来的IPO撤回潮中，一部分原因与现场抽查有关。
今年1月31日，证券业协会组织了首发企业信息披露质量抽查名单第二十八次抽签仪式，本批参与抽签为2021年1月30日前受理的科创板和创业板企业，共计407家。抽签结果显示，20家申报企业将被抽查。
其中创业板申报企业有11家，科创板申报企业占9家，包括柔宇科技、蓝科环保、百子尖、华之杰、博创智能、国光信息、紫泉能源、浙江国祥、德威华泰，截至目前除了华之杰和浙江国祥，其余7家已主动撤了材料。并且在前述撤回材料的企业中，仅有蓝科环保披露了二轮问询答复，其余公司均收到问询，但未答复。
《科创板日报》记者了解到，上交所早于2019年6月启动科创板保荐业务现场督查，方式主要包括：现场询问、调阅保荐工作底稿、核对有关证据材料、访谈有关对象、要求保荐机构补充核查等方式。
现场督导之下，部分企业的确存在信披不规范等问题。
比如在对中加特的第三轮问询中，上交所针对保荐业务现场督导发现的10大问题要求公司与保荐机构提供详细说明。
上述现场督导发现的问题包括：会计师工作底稿显示，部分应收账款函证和收入函证回函盖章不是公章或财务专用章（财务章和财务科章计入财务专用章），且应收账款回函差异较大；部分研发项目存在取得安标证后继续领料的情况..........；发行人部分研发材料来自不良品库；2019年5月前，维修业务材料成本通过“其他出库单”统一归集至制造费用，未区分项目核算等。
此外，在上交所对光华科技的第三轮问询中，多个提问亦针对现场督导发现的问题，如：首轮回复中3台搅拌罐涉及“搅拌装置”，与督导发现仅1台污水处理装置运行台账显示“3#釜搅拌改造”信息前后存在矛盾原因；另外，保荐机构向现场督导组提供的一份2017年的文件显示，.......，“贾林负责调整”。而贾林入职时间为2018年10月，且保荐机构未提供2017年发行人向其支付薪酬或劳务费的证据。公司被要求说明前述情况的原因及合理性。
尽管中加特和光华科技均对现场督查的相关问题予以了回复，但两家公司最终先后终止了IPO申报。
多轮问询关注科创属性
值得注意的是，就近期证券业协会的IPO抽查下多家企业撤回申报材料，进而引发外界对于注册制下的审核是否更严格的疑问，武汉科技大学金融证券研究所所长董登新认为，这是判断不准确，或是理解上的误会。
“证券业协会对IPO信息披露质量抽查，其在抽查对象上应该是有针对性的，可能这些企业是IPO条件相对薄弱，IPO材料可能存在比较多的质疑，要去做现场检查”，董登新对《科创板日报》记者分析认为，“带着侥幸心态来排队来参与IPO的这些企业可能就缺乏底气，为了防止被处罚或纳入纳入黑名单，他们主动来撤回材料”。
而对于市场消息，科创板将更加强调“硬科技”的事项，目前尚未有相关细则的公布。但《科创板日报》记者通过梳理发现，在近期对多家公司的多轮问询中，企业的“科创属性”似乎越来越受到重视。
上文提到，在2020年12月终止IPO的15家企业中，有10家企业的问询回复在二轮以及二轮以上。在对艾索信息的第五轮问询中，上交所首个问题关注到“对广东军丰销售的商业合理性”；对健耕医药的第四轮问询中，上交所首个问题为对公司实控人认定；在对奥雷德、新朝阳的第三轮问询中，上交所首先关注收入确认政策和经销收入的情况；另外在对康代智能的二轮问询中，上交所首个问题关注实控人的相关情况，“科创属性”被安排在第9问。
与之相比，在泰森股份今年2月1日披露的第三轮回复中，上交所首个问题即指向“发行人科创属性”，上交所围绕科创属性向泰森股份提出了6个小问，包括：分析论证发行人科技创新能力是否突出；配方类、生产工艺类及安装技术类发明专利如何体现发行人科创属性等。
上交所上市委原拟于2021年2月25日审议泰森股份，后公司于2月23日终止IPO。
此外，在联动科技今年3月5日披露的二轮问询答复中，首个问题亦围绕“科创属性以及进口替代”，其中公司被要求说明，结合专利数量、研发投入、获得奖项等数据说明发行人属于《暂行规定》第五条“科技创新能力突出”情形的客观依据；结合上述事项，说明是否符合《科创属性评价指引（试行）》《上海证券交易所科创板企业发行上市申报及推荐暂行规定》规定的科创属性及科创板定位。
今年3月12日，联动科技撤回IPO材料。
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据《科创板日报》报道，近期以来，科创板IPO企业回撤数量正在增加，市场也产生担忧，企业IPO是不是变得更严了。
据《科创板日报》记者统计数据显示，2021年以来，科创板共受理了12家企业的申报材料，其中自今年春节假期以来，科创板仅受理5家企业的申报材料。与此同时，自今年1月8日天士生物申请撤回科创板申报材料后，截至目前共有25家科创板申报企业选择撤回材料，其中春节假期后撤回材料的企业达14家。
有国内头部机构投行人士向《科创板日报》记者表示，春节假期后受理企业数量降低，是正常的，因为企业选择930（9月30日）制作的申报材料较少，更多的企业会选择以年报或者是630（6月30日）为基准日，“本身在12月31日后，在四五月份之前申报的企业，每年都较少，但后续若科创板门槛的提高可能会影响一些企业的申报”。
撤单变化：去年12月3轮及以上企业达8家今年多未披露回复
上交所科创板审核官网显示，截至目前，共有89家企业终止IPO审核，其中2019年终止IPO审核的企业有23家，更多企业集中2019年后。
《科创板日报》记者统计，以2020年12月为分界线，2020年1至11月，共有26家企业选择主动终止IPO审核，而2020年12月开始，企业选择撤回IPO材料的现象开始增多，当月共有15家企业撤回IPO材料。步入2021年，又新增25家企业终止科创板IPO申报，即自2020年12月1日至2021年3月12日，总计40家企业撤回材料，占到科创板终止审核企业总数的44.9%。
《科创板日报》记者以2020年12月终止科创板IPO的15家企业，与今年以来终止科创板IPO的25家企业进行对比发现，两批企业在问询答复轮次、被问询的内容等方面有着较大差异。
在今年终止科创板IPO的25家企业中，包括禾赛科技、开创环保等12家企业的发审状态定格在：已问询，但未回复；3月12日撤回材料的齐治科技、锐芯微等4家企业发审状态为：已披露一轮问询回复；同样在3月12日撤回材料的联动科技，在终止IPO前已披露了第二轮问询答复，与其身处同一发审状态的企业还包括：蓝科环保、天和磁材、上海拓璞以及天士生物；而森泰股份与光华科技是2家回复第三轮问询后，选择撤回材料的企业。
尚沃医疗则是今年撤材料的科创板申报名单中，唯一已过会的公司，前者于2020年9月29日通过上市委的审议，但此后公司一直未递交注册材料，此后在今年3月日公司选择撤回申报材料。
而在2020年12月选择终止科创板IPO的企业中，回复二轮及二轮以下的企业共有6家；奥雷德、微导纳米、泽生科技等6家企业在披露第三轮问询后，终止IPO，其中中加特在上会审议前期撤回了材料；另外，健耕医药回复了四轮问询；艾索信息更是在回复到5轮问询后，选择撤回IPO材料。
与上述企业相比，正济药业或许是撤回材料最快的一家企业，公司科创板申报材料于2020年12月3日获受理，但在12月25日，公司随即选择撤回材料。
现场督导显威力
值得注意的是，2020年12月以来的IPO撤回潮中，一部分原因与现场抽查有关。
今年1月31日，证券业协会组织了首发企业信息披露质量抽查名单第二十八次抽签仪式，本批参与抽签为2021年1月30日前受理的科创板和创业板企业，共计407家。抽签结果显示，20家申报企业将被抽查。
其中创业板申报企业有11家，科创板申报企业占9家，包括柔宇科技、蓝科环保、百子尖、华之杰、博创智能、国光信息、紫泉能源、浙江国祥、德威华泰，截至目前除了华之杰和浙江国祥，其余7家已主动撤了材料。并且在前述撤回材料的企业中，仅有蓝科环保披露了二轮问询答复，其余公司均收到问询，但未答复。
《科创板日报》记者了解到，上交所早于2019年6月启动科创板保荐业务现场督查，方式主要包括：现场询问、调阅保荐工作底稿、核对有关证据材料、访谈有关对象、要求保荐机构补充核查等方式。
现场督导之下，部分企业的确存在信披不规范等问题。
比如在对中加特的第三轮问询中，上交所针对保荐业务现场督导发现的10大问题要求公司与保荐机构提供详细说明。
上述现场督导发现的问题包括：会计师工作底稿显示，部分应收账款函证和收入函证回函盖章不是公章或财务专用章（财务章和财务科章计入财务专用章），且应收账款回函差异较大；部分研发项目存在取得安标证后继续领料的情况..........；发行人部分研发材料来自不良品库；2019年5月前，维修业务材料成本通过“其他出库单”统一归集至制造费用，未区分项目核算等。
此外，在上交所对光华科技的第三轮问询中，多个提问亦针对现场督导发现的问题，如：首轮回复中3台搅拌罐涉及“搅拌装置”，与督导发现仅1台污水处理装置运行台账显示“3#釜搅拌改造”信息前后存在矛盾原因；另外，保荐机构向现场督导组提供的一份2017年的文件显示，.......，“贾林负责调整”。而贾林入职时间为2018年10月，且保荐机构未提供2017年发行人向其支付薪酬或劳务费的证据。公司被要求说明前述情况的原因及合理性。
尽管中加特和光华科技均对现场督查的相关问题予以了回复，但两家公司最终先后终止了IPO申报。
多轮问询关注科创属性
值得注意的是，就近期证券业协会的IPO抽查下多家企业撤回申报材料，进而引发外界对于注册制下的审核是否更严格的疑问，武汉科技大学金融证券研究所所长董登新认为，这是判断不准确，或是理解上的误会。
“证券业协会对IPO信息披露质量抽查，其在抽查对象上应该是有针对性的，可能这些企业是IPO条件相对薄弱，IPO材料可能存在比较多的质疑，要去做现场检查”，董登新对《科创板日报》记者分析认为，“带着侥幸心态来排队来参与IPO的这些企业可能就缺乏底气，为了防止被处罚或纳入纳入黑名单，他们主动来撤回材料”。
而对于市场消息，科创板将更加强调“硬科技”的事项，目前尚未有相关细则的公布。但《科创板日报》记者通过梳理发现，在近期对多家公司的多轮问询中，企业的“科创属性”似乎越来越受到重视。
上文提到，在2020年12月终止IPO的15家企业中，有10家企业的问询回复在二轮以及二轮以上。在对艾索信息的第五轮问询中，上交所首个问题关注到“对广东军丰销售的商业合理性”；对健耕医药的第四轮问询中，上交所首个问题为对公司实控人认定；在对奥雷德、新朝阳的第三轮问询中，上交所首先关注收入确认政策和经销收入的情况；另外在对康代智能的二轮问询中，上交所首个问题关注实控人的相关情况，“科创属性”被安排在第9问。
与之相比，在泰森股份今年2月1日披露的第三轮回复中，上交所首个问题即指向“发行人科创属性”，上交所围绕科创属性向泰森股份提出了6个小问，包括：分析论证发行人科技创新能力是否突出；配方类、生产工艺类及安装技术类发明专利如何体现发行人科创属性等。
上交所上市委原拟于2021年2月25日审议泰森股份，后公司于2月23日终止IPO。
此外，在联动科技今年3月5日披露的二轮问询答复中，首个问题亦围绕“科创属性以及进口替代”，其中公司被要求说明，结合专利数量、研发投入、获得奖项等数据说明发行人属于《暂行规定》第五条“科技创新能力突出”情形的客观依据；结合上述事项，说明是否符合《科创属性评价指引（试行）》《上海证券交易所科创板企业发行上市申报及推荐暂行规定》规定的科创属性及科创板定位。
今年3月12日，联动科技撤回IPO材料。
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