猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
一、粪便病毒检测
l 非突变的FCoV感染特征是肠道细胞持续性进行病毒复制以及经粪便排泌病毒。通过反转录多聚酶链反应（RT-PCR）或电镜检测病毒可确定粪便病毒排泌。这两种诊断方法都可能出现假阴性。
l 粪便排毒量呈波动变化，因此理想的情况是在确定猫是非病毒排泌者前应连续4~5天对粪便进行检查。
二、肠道活组织检查
l 肠道活组织检查显示肠绒毛顶端非特异性损伤，绒毛变钝和融合。
l 肠道活组织免疫荧光或免疫组化染色进行病毒抗原检查可进行确诊。
三、猫传染性腹膜炎的诊断
根据临床症状和常规实验室检测结果可怀疑FIP，没有单个能确诊FIP的检测，所以应该根据实验室评估（例如，血常规、血清生化、细胞学、血清学和病毒学）、影像诊断和组织病理检测结果进行综合性诊断。
关键点：FIP患猫临床症状和实验室异常对该病来说并不具有特异性；不过，根据这些综合分析可进行FIP假定性诊断。
猫传染性腹膜炎诊断特征
参数或程序
暗示FIP的发现
年龄
6月龄至3岁龄（但所有年龄都可能发生）
居住环境
猫舍或多猫家庭
症状
发热（非反应性）
渗出液（腹部、胸腔）
肝脏疾病（黄疸等）
肾脏疾病（肾肿大）
肠道疾病（胃肠道症状）
眼睛疾病（葡萄膜炎）
中枢神经疾病（多灶性）
肺部疾病（咳嗽）
临床过程
进行性
全血细胞计数
贫血（非再生性）
嗜中性粒细胞增多或减少；核左移
淋巴细胞减少
嗜中性粒细胞包涵体（免疫复合体？）
血浆蛋白
总血浆蛋白浓度升高
高球蛋白血症（γ、α2）
A/G<0.8
高纤维蛋白原血症（400-700mg/dl）
血清生化
肝脏检测异常（ALT、ALP、胆汁酸、胆红素升高）
氮质血症（尿素氮、肌酐浓度升高）
胰脂肪酶免疫反应性升高（胰腺炎）
尿液分析
蛋白尿、胆红素尿
放射学和超声波检查
渗出（腹部、胸腔）
器官肿大（肝脏、肾脏、肠道等）
器官浸润（肺脏）
CT和MRI脑影像检查
脑积水、脑膜反差增强
渗出液分析：
黄色、清亮、粘性、泡沫性、纤维素性
蛋白质
40~ 100g/L（A/G<0.8，球蛋白>50%，γ球蛋白>32%）
白细胞
1000~2000个/μl
细胞学
脓性肉芽肿性渗出
脑脊液分析：
蛋白质
50~350mg/dl
白细胞
100~10000个/μl
细胞学
嗜中性粒细胞>单核细胞
血清学
高FCoV抗体滴度
RT-PCR试验
FCoV核酸（血液、渗出液或组织）
组织病理学
血管炎和脓性肉芽肿性炎症
免疫荧光和免疫组化阳性
四、常规实验室检查
l 血常规检测通常揭示非特异性异常，反映的是慢性炎性反应，诸如非再生性贫血、嗜中性粒细胞性白细胞增多或减少、应激性淋巴细胞减少。
l 由于长期免疫刺激，70%非渗出性病例和50%渗出性病例总血清蛋白浓度和血清球蛋白浓度（特别是γ和α2）升高，而血清白蛋白浓度经常下降。一项研究显示白球比（A/G<0.8）高度暗示存在FIP（92%阳性预测值），然而A/G>0.8暗示FIP不太可能（61%阴性预测值）。血清蛋白电泳通常无必要。
l 血清生化可能检测腹部受影响器官诸如肝脏（血清肝酶活性、胆红素浓度和胆汁酸浓度升高）、肾脏（肌酐和尿素氮浓度升高）或胰腺（胰脂肪酶免疫反应性升高）。
l 尿液分析结果可能包括蛋白尿或胆红素尿。
l FIP有时出现弥散性血管内凝血，引起凝血时间延长、血小板下降以及纤维蛋白降解产物增加。
五、影像学诊断
在查找受影响器官方面影像学诊断是有用的，也利于诊断渗出液或活组织采样。
放射学和超声波
放射学检查在确诊腹部或胸腔渗出、腹部器官膨大（例如，肾脏和肝脏）或肺部浸润方面是有用的。受损器官（肝脏、肾脏、脾脏、胰腺、肠道、网膜和淋巴结）也可使用超声波进行扫描、抽吸以及活组织检查。
六、中枢神经系统CT和MRI检查
神经性FIP，CT和MRI检查常见继发性堵塞性脑积水。MRI也可见脑膜和室管膜反差增强。
七、渗出液分析
关键点：对于渗出性FIP临床诊断液体分析通常是有用的。渗出性FIP典型的液体是高蛋白性脓性肉芽肿性渗出液。
l FIP液体外观清亮、粘性、草黄色或金黄色，可能呈粘性，含有斑块状或条状纤维蛋白。由于含有高浓度蛋白所以摇晃时起泡，冷藏可出现凝结。
l FIP液体蛋白浓度很高，接近血浆，介于40~100g/L。如果液体内总蛋白浓度高于35g/L，球蛋白浓度超过50%，则很可能是渗出性FIP。如果A/G比大于0.8，或白蛋白比例高于50%，则更可能是FIP以外的其它疾病。
l FIP液体有核细胞数量通常介于1000~20000个/μl，与其它渗出液相比数量较低。
l FIP液体细胞学特征是脓性肉芽肿性渗出液。细胞类型主要是非退变的嗜中性粒细胞和巨噬细胞，以及数量不定的浆细胞和淋巴细胞。
l 渗出液其它检查包括抗FCoV抗体试验和RT-PCR试验检测冠状病毒核酸。渗出液内抗体和RT-PCR检测较血清检测诊断价值更高。
l 使用免疫荧光或免疫组化检查渗出液巨噬细胞内FCoV抗原是确诊渗出性FIP最准的方法，阳性预测值为100%。
A, Rivalta test粘蛋白定性试验：醋酸溶液上层出现一层凝胶表明试验阳性。液体来自一只PCR确诊为猫传染性腹膜炎的猫。该猫中度黄疸，注意试管中部漂浮的物质所呈现的凝胶黄纹。Photo by Sam Royer, Purdue University.
猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
B, FCoV immunofluorescence test猫冠状病毒免疫荧光检测：猫传染性腹膜炎特异性细胞学检测包括细胞内猫冠状病毒免疫荧光检查。图示表明有三个感染的完整的巨噬细胞（绿色）出现在腹水中，腹水来自一只传染性腹膜炎的猫。Courtesy of Jacqueline Norris, University of Sydney, Australia.
猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
C：猫传染性腹膜炎患猫浓缩的腹水涂片。注意中度嗜碱性巨噬细胞和非退变的嗜中性粒细胞。背景出现嗜碱性粗糙的颗粒蛋白，以及嗜碱性蛋白新月体和纤维蛋白丝。
猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
D：非败血性渗出液。猫传染性腹膜炎腹水。液体内含有泡沫状空泡化的巨噬细胞、轻度退变的嗜中性粒细胞和中等至大淋巴细胞。一些猫传染性腹膜炎病例淋巴细胞呈中等大小，并呈反应性。载玻片上也出现颗粒状沉淀的蛋白。
猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
脑脊液和房水
l 神经性FIP脑脊液和眼型FIP前房内房水分析具有很高的诊断价值，其内蛋白浓度和有核细胞数量（嗜中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞）均升高。
l 脑脊液和前房液也用于评估抗FCoV抗体的出现。对于FIP，通常脑脊液或房水内抗体与血清中抗体比值较脑脊液或房水总蛋白浓度与血清总蛋白浓度比值更高。
l 脑脊液和房水PCR检查冠状病毒核酸意义有限。
关键点：当并发出现进行性神经症状（特别是多灶性）、脑脊液蛋白和白细胞增加（特别是嗜中性粒细胞）、影像检测存在脑积水时，更可能是神经性FIP。
八、聚合酶链式反应
关键点：RT-PCR检测结果应与其它临床发现综合判读，不要使用该试验作为FIP诊断的唯一根据。
l RT-PCR病毒试验用于检测血液、渗出液、组织或粪便中的冠状病毒核酸。
l 阳性检测结果表明存在FCoV，但不能鉴别变异的致FIP的突变体和非突变的FCoV。病毒血症不仅仅发生于FIP，也发生于健康的FCoV携带者。一项研究显示，流行区猫舍高达80%的猫存在病毒血症和RT-PCR检测结果阳性，这并不能预示存在FIP。因此，RT-PCR本身并不是可靠的确诊试验。
关键点：PCR试验不能鉴别突变和非突变的FCoV。
l 通常来说，渗出液和组织样本较血液来说更可能呈阳性。血浆较血清更敏感。尿液和脑脊液检测率最低，因此不应用作常规PCR检测。
l 粪便RT-PCR可用于检测FCoV排毒情况，特别对于猫舍控制计划的健康猫。连续4~5天检测粪便。几个月后复检以查找长期持续性排毒者。
l 样本RNA降解或实验室技术较差可出现RT-PCR检测结果假阴性。检测所用引物可能并不检测FCoV所有毒株。
l PCR样本需要细心处理以避免无效的检测结果。应冷冻样本并尽早进行检测。
九、组织病理学
l 组织病理学被看作是确诊FIP的“金标准”，受损组织进行活组织检测以查找FIP特异性损伤如血管炎和脓性肉芽肿性炎症。
l 通过PCR、免疫荧光抗体和免疫组化技术可查出组织样本中的冠状病毒。
十、免疫荧光和免疫组化
l 组织样本和渗出液巨噬细胞使用免疫荧光或免疫组化染色查找细胞内FCoV抗原是诊断渗出性FIP最确定的试验，阳性预测值可达100%（即，实际上无假阳性）。
检测结果为阴性不能排除FIP，这种情况常发生于样本中受感染巨噬细胞数量不足或病毒抗原被FCoV抗体竞争性结合而掩盖时。
分享：犬猫内科-王姜维博士
_曹燕硕士
一、粪便病毒检测
l 非突变的FCoV感染特征是肠道细胞持续性进行病毒复制以及经粪便排泌病毒。通过反转录多聚酶链反应（RT-PCR）或电镜检测病毒可确定粪便病毒排泌。这两种诊断方法都可能出现假阴性。
l 粪便排毒量呈波动变化，因此理想的情况是在确定猫是非病毒排泌者前应连续4~5天对粪便进行检查。
二、肠道活组织检查
l 肠道活组织检查显示肠绒毛顶端非特异性损伤，绒毛变钝和融合。
l 肠道活组织免疫荧光或免疫组化染色进行病毒抗原检查可进行确诊。
三、猫传染性腹膜炎的诊断
根据临床症状和常规实验室检测结果可怀疑FIP，没有单个能确诊FIP的检测，所以应该根据实验室评估（例如，血常规、血清生化、细胞学、血清学和病毒学）、影像诊断和组织病理检测结果进行综合性诊断。
关键点：FIP患猫临床症状和实验室异常对该病来说并不具有特异性；不过，根据这些综合分析可进行FIP假定性诊断。
猫传染性腹膜炎诊断特征
参数或程序
暗示FIP的发现
年龄
6月龄至3岁龄（但所有年龄都可能发生）
居住环境
猫舍或多猫家庭
症状
发热（非反应性）
渗出液（腹部、胸腔）
肝脏疾病（黄疸等）
肾脏疾病（肾肿大）
肠道疾病（胃肠道症状）
眼睛疾病（葡萄膜炎）
中枢神经疾病（多灶性）
肺部疾病（咳嗽）
临床过程
进行性
全血细胞计数
贫血（非再生性）
嗜中性粒细胞增多或减少；核左移
淋巴细胞减少
嗜中性粒细胞包涵体（免疫复合体？）
血浆蛋白
总血浆蛋白浓度升高
高球蛋白血症（γ、α2）
A/G<0.8
高纤维蛋白原血症（400-700mg/dl）
血清生化
肝脏检测异常（ALT、ALP、胆汁酸、胆红素升高）
氮质血症（尿素氮、肌酐浓度升高）
胰脂肪酶免疫反应性升高（胰腺炎）
尿液分析
蛋白尿、胆红素尿
放射学和超声波检查
渗出（腹部、胸腔）
器官肿大（肝脏、肾脏、肠道等）
器官浸润（肺脏）
CT和MRI脑影像检查
脑积水、脑膜反差增强
渗出液分析：
黄色、清亮、粘性、泡沫性、纤维素性
蛋白质
40~ 100g/L（A/G<0.8，球蛋白>50%，γ球蛋白>32%）
白细胞
1000~2000个/μl
细胞学
脓性肉芽肿性渗出
脑脊液分析：
蛋白质
50~350mg/dl
白细胞
100~10000个/μl
细胞学
嗜中性粒细胞>单核细胞
血清学
高FCoV抗体滴度
RT-PCR试验
FCoV核酸（血液、渗出液或组织）
组织病理学
血管炎和脓性肉芽肿性炎症
免疫荧光和免疫组化阳性
四、常规实验室检查
l 血常规检测通常揭示非特异性异常，反映的是慢性炎性反应，诸如非再生性贫血、嗜中性粒细胞性白细胞增多或减少、应激性淋巴细胞减少。
l 由于长期免疫刺激，70%非渗出性病例和50%渗出性病例总血清蛋白浓度和血清球蛋白浓度（特别是γ和α2）升高，而血清白蛋白浓度经常下降。一项研究显示白球比（A/G<0.8）高度暗示存在FIP（92%阳性预测值），然而A/G>0.8暗示FIP不太可能（61%阴性预测值）。血清蛋白电泳通常无必要。
l 血清生化可能检测腹部受影响器官诸如肝脏（血清肝酶活性、胆红素浓度和胆汁酸浓度升高）、肾脏（肌酐和尿素氮浓度升高）或胰腺（胰脂肪酶免疫反应性升高）。
l 尿液分析结果可能包括蛋白尿或胆红素尿。
l FIP有时出现弥散性血管内凝血，引起凝血时间延长、血小板下降以及纤维蛋白降解产物增加。
五、影像学诊断
在查找受影响器官方面影像学诊断是有用的，也利于诊断渗出液或活组织采样。
放射学和超声波
放射学检查在确诊腹部或胸腔渗出、腹部器官膨大（例如，肾脏和肝脏）或肺部浸润方面是有用的。受损器官（肝脏、肾脏、脾脏、胰腺、肠道、网膜和淋巴结）也可使用超声波进行扫描、抽吸以及活组织检查。
六、中枢神经系统CT和MRI检查
神经性FIP，CT和MRI检查常见继发性堵塞性脑积水。MRI也可见脑膜和室管膜反差增强。
七、渗出液分析
关键点：对于渗出性FIP临床诊断液体分析通常是有用的。渗出性FIP典型的液体是高蛋白性脓性肉芽肿性渗出液。
l FIP液体外观清亮、粘性、草黄色或金黄色，可能呈粘性，含有斑块状或条状纤维蛋白。由于含有高浓度蛋白所以摇晃时起泡，冷藏可出现凝结。
l FIP液体蛋白浓度很高，接近血浆，介于40~100g/L。如果液体内总蛋白浓度高于35g/L，球蛋白浓度超过50%，则很可能是渗出性FIP。如果A/G比大于0.8，或白蛋白比例高于50%，则更可能是FIP以外的其它疾病。
l FIP液体有核细胞数量通常介于1000~20000个/μl，与其它渗出液相比数量较低。
l FIP液体细胞学特征是脓性肉芽肿性渗出液。细胞类型主要是非退变的嗜中性粒细胞和巨噬细胞，以及数量不定的浆细胞和淋巴细胞。
l 渗出液其它检查包括抗FCoV抗体试验和RT-PCR试验检测冠状病毒核酸。渗出液内抗体和RT-PCR检测较血清检测诊断价值更高。
l 使用免疫荧光或免疫组化检查渗出液巨噬细胞内FCoV抗原是确诊渗出性FIP最准的方法，阳性预测值为100%。
A, Rivalta test粘蛋白定性试验：醋酸溶液上层出现一层凝胶表明试验阳性。液体来自一只PCR确诊为猫传染性腹膜炎的猫。该猫中度黄疸，注意试管中部漂浮的物质所呈现的凝胶黄纹。Photo by Sam Royer, Purdue University.
猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
B, FCoV immunofluorescence test猫冠状病毒免疫荧光检测：猫传染性腹膜炎特异性细胞学检测包括细胞内猫冠状病毒免疫荧光检查。图示表明有三个感染的完整的巨噬细胞（绿色）出现在腹水中，腹水来自一只传染性腹膜炎的猫。Courtesy of Jacqueline Norris, University of Sydney, Australia.
猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
C：猫传染性腹膜炎患猫浓缩的腹水涂片。注意中度嗜碱性巨噬细胞和非退变的嗜中性粒细胞。背景出现嗜碱性粗糙的颗粒蛋白，以及嗜碱性蛋白新月体和纤维蛋白丝。
猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
D：非败血性渗出液。猫传染性腹膜炎腹水。液体内含有泡沫状空泡化的巨噬细胞、轻度退变的嗜中性粒细胞和中等至大淋巴细胞。一些猫传染性腹膜炎病例淋巴细胞呈中等大小，并呈反应性。载玻片上也出现颗粒状沉淀的蛋白。
猫传染性腹膜炎（三）冠状病毒和传染性腹膜炎的诊断
脑脊液和房水
l 神经性FIP脑脊液和眼型FIP前房内房水分析具有很高的诊断价值，其内蛋白浓度和有核细胞数量（嗜中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞）均升高。
l 脑脊液和前房液也用于评估抗FCoV抗体的出现。对于FIP，通常脑脊液或房水内抗体与血清中抗体比值较脑脊液或房水总蛋白浓度与血清总蛋白浓度比值更高。
l 脑脊液和房水PCR检查冠状病毒核酸意义有限。
关键点：当并发出现进行性神经症状（特别是多灶性）、脑脊液蛋白和白细胞增加（特别是嗜中性粒细胞）、影像检测存在脑积水时，更可能是神经性FIP。
八、聚合酶链式反应
关键点：RT-PCR检测结果应与其它临床发现综合判读，不要使用该试验作为FIP诊断的唯一根据。
l RT-PCR病毒试验用于检测血液、渗出液、组织或粪便中的冠状病毒核酸。
l 阳性检测结果表明存在FCoV，但不能鉴别变异的致FIP的突变体和非突变的FCoV。病毒血症不仅仅发生于FIP，也发生于健康的FCoV携带者。一项研究显示，流行区猫舍高达80%的猫存在病毒血症和RT-PCR检测结果阳性，这并不能预示存在FIP。因此，RT-PCR本身并不是可靠的确诊试验。
关键点：PCR试验不能鉴别突变和非突变的FCoV。
l 通常来说，渗出液和组织样本较血液来说更可能呈阳性。血浆较血清更敏感。尿液和脑脊液检测率最低，因此不应用作常规PCR检测。
l 粪便RT-PCR可用于检测FCoV排毒情况，特别对于猫舍控制计划的健康猫。连续4~5天检测粪便。几个月后复检以查找长期持续性排毒者。
l 样本RNA降解或实验室技术较差可出现RT-PCR检测结果假阴性。检测所用引物可能并不检测FCoV所有毒株。
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l 组织病理学被看作是确诊FIP的“金标准”，受损组织进行活组织检测以查找FIP特异性损伤如血管炎和脓性肉芽肿性炎症。
l 通过PCR、免疫荧光抗体和免疫组化技术可查出组织样本中的冠状病毒。
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l 组织样本和渗出液巨噬细胞使用免疫荧光或免疫组化染色查找细胞内FCoV抗原是诊断渗出性FIP最确定的试验，阳性预测值可达100%（即，实际上无假阳性）。
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