记录一下这让我不知如何表达的三天
说实话其实我到现在都还有点没回过神来，突然不知道发生了啥有点接不住的感觉，起因是两天前第一局比赛后对小巴的表现，在群里表达了一些当下情绪的，然后被群里的某些朋友把话传了出去，至此婊了一遍又一遍，当天晚上我仅在那一个微博群进行了输出，以及此小号，并未在另一个号有过任何言论。
第二天我看到澄清很难过的时候，一群人突然冲上来发朋友圈骂，指着我骂，让我道歉，我一下火就上来了，且不说在我看来已经道歉了，对于误解她我很难过，这是我和我爱豆两个人的事，我都没有人身攻击她，你们又凭什么来人身攻击我？？？
然而事实就是，早在前一天晚上看了第二局比赛，在还没有任何澄清视频的时候，我就已经自己和解了，觉得怼了小巴很不应该，因此用大号发了朋友圈。没想到第二天被好友圈朋友截图此条消息，不仅不被认可我是带着歉意和爱意发了一条睡前微博，反而恶意曲解我在评论中诋毁小巴。
可我不想再纠缠，所以和几人争吵过后我再次公开道了歉，进而我知道又有人说我是看到澄清视频了，被锤了所以道歉，也有人说我是因为被jv了所以低头，都挺好笑的，我也一点都不想解释。
———————————————————————
第二天开始陆陆续续一些人都双了好友，我也都没在意，直到下午发现在意的两个好朋友双了我，我一下子就着急上火了，我去询问缘由，得到了一些意料之内的回答，即使我有些难过，可简单直白的答案让我没了脾气，特别是冰冰那句你可以表达，但是我不想看。
紧接着dou告诉我chuichui因为我的话昨天哭了一整夜，我满头疑问，我和她根本不在一个群，她怎么知道我说了啥？？才知道原来群里的话早就被传到了各个人的耳朵里，我这才赶快去找chui道歉，我的抱歉是我没想到居然是因为我的那几句话，让她难过了，我一下子不知道该怎么办，唯有道歉，我从来都不希望有人因为我难过（至此我都没想到我的几句话被截图出去传播了，并且造成了这么大的伤害）
———————————————————————
第三天也就是今天，当我已经消化这些事的时候
早上有事找小焦，她并不回复我消息，继而告诉
我她不想搭理我。
下午我打开微博更是满头雾水，发现我的微信好友居然在好友圈辱骂诅咒赵/小/棠，明知道我磕大/虞/海/棠 喜欢 赵/小/棠（即使只是所谓的墙头）
我经常和朋友在微信群里互怼互吵都好，从来都是吵过就过了，我也从不会因为这些生气是因为我觉得我得尊重我朋友的喜好，换而言之，你们可以不喜欢，甚至嘴她也并不会让我觉得我不被尊重，在我看来只是朋友间的互怼和各自表达（同理千玺也是）可我好友圈突然刷到非常愤怒的在"诅咒她去世"还挺尴尬的。
最让我觉得匪夷所思的是听到的一些回答：
"骂了赵/小/棠 可能你会比较容易get到 被自己信赖的好朋友 骂了自己喜欢的人的感受"。。。。。
由于那天我情绪比较激动，所以我再次去确认了一下我那天是否有人身攻击的话语存在，后发现我始终表达的思想都是："为什么不准备一下，这样上去什么都不会真的尊重人么？？"
还有即使我再讨厌这个人，我也从来没有对我朋友也好，或者仅仅是认识互关的人也罢，她们曾经对我说过喜欢/好感的任何人，我都绝不会进行这样的人身攻击，我看着那条微博就真挺不知道怎么表达的[黑线]
只能说事情发生到今天，有这样的结果我是完全没料到的，一些认识的朋友这样对待我，我也确实偷偷伤心抱怨过的。
直到我认真想了想，没有人应该无条件承受我来去一阵风的情绪，我不放在心上不代表别人也是，我有我自己的情绪，别人也有自己的情绪，我觉得受到这样的对待很委屈，没有想别人是不是也委屈，反而是我把大家弄得都挺不愉快的。
现在这一切我也都欣然接受，也都是我发疯嘴小巴的报应吧，挺好的，认为我我发疯也好，经常性辱骂也罢，甚至不爱她和疯逼没差也行。
我不想再争论这些无聊的事了，追星好累哦，既然得罪完所有人道歉之后，就应该自觉离开的，别让大家都不开心，更别让自己变得不开心。
一些人问我她就这么不值得你信任么？？为什么有了澄清以后也一点都感觉不到你因为当天第一局比赛冲动的嘴了小巴而后悔。
其实这个答案只对我有意义，对你们没有。因为问这种话的人我只能说你可能从来没有真的了解过我，从我认识一些人开始到现在始终都是我，从来没变过，我承认那些严重的情绪化，口无遮拦，可如果把这些全都理解成我和疯逼没有区别，那我也无话可说，因为我的爱也不需要任何人认可。
至于我的朋友，你们在我心里早就是脱离饭圈的朋友了，我希望我们不会因为追星，或者一些粉圈琐事的矛盾而坍塌（所以其实大家各自选择自己舒服的方式很好）
最后 祝大家生活愉快，麻烦大家取关
说实话其实我到现在都还有点没回过神来，突然不知道发生了啥有点接不住的感觉，起因是两天前第一局比赛后对小巴的表现，在群里表达了一些当下情绪的，然后被群里的某些朋友把话传了出去，至此婊了一遍又一遍，当天晚上我仅在那一个微博群进行了输出，以及此小号，并未在另一个号有过任何言论。
第二天我看到澄清很难过的时候，一群人突然冲上来发朋友圈骂，指着我骂，让我道歉，我一下火就上来了，且不说在我看来已经道歉了，对于误解她我很难过，这是我和我爱豆两个人的事，我都没有人身攻击她，你们又凭什么来人身攻击我？？？
然而事实就是，早在前一天晚上看了第二局比赛，在还没有任何澄清视频的时候，我就已经自己和解了，觉得怼了小巴很不应该，因此用大号发了朋友圈。没想到第二天被好友圈朋友截图此条消息，不仅不被认可我是带着歉意和爱意发了一条睡前微博，反而恶意曲解我在评论中诋毁小巴。
可我不想再纠缠，所以和几人争吵过后我再次公开道了歉，进而我知道又有人说我是看到澄清视频了，被锤了所以道歉，也有人说我是因为被jv了所以低头，都挺好笑的，我也一点都不想解释。
———————————————————————
第二天开始陆陆续续一些人都双了好友，我也都没在意，直到下午发现在意的两个好朋友双了我，我一下子就着急上火了，我去询问缘由，得到了一些意料之内的回答，即使我有些难过，可简单直白的答案让我没了脾气，特别是冰冰那句你可以表达，但是我不想看。
紧接着dou告诉我chuichui因为我的话昨天哭了一整夜，我满头疑问，我和她根本不在一个群，她怎么知道我说了啥？？才知道原来群里的话早就被传到了各个人的耳朵里，我这才赶快去找chui道歉，我的抱歉是我没想到居然是因为我的那几句话，让她难过了，我一下子不知道该怎么办，唯有道歉，我从来都不希望有人因为我难过（至此我都没想到我的几句话被截图出去传播了，并且造成了这么大的伤害）
———————————————————————
第三天也就是今天，当我已经消化这些事的时候
早上有事找小焦，她并不回复我消息，继而告诉
我她不想搭理我。
下午我打开微博更是满头雾水，发现我的微信好友居然在好友圈辱骂诅咒赵/小/棠，明知道我磕大/虞/海/棠 喜欢 赵/小/棠（即使只是所谓的墙头）
我经常和朋友在微信群里互怼互吵都好，从来都是吵过就过了，我也从不会因为这些生气是因为我觉得我得尊重我朋友的喜好，换而言之，你们可以不喜欢，甚至嘴她也并不会让我觉得我不被尊重，在我看来只是朋友间的互怼和各自表达（同理千玺也是）可我好友圈突然刷到非常愤怒的在"诅咒她去世"还挺尴尬的。
最让我觉得匪夷所思的是听到的一些回答：
"骂了赵/小/棠 可能你会比较容易get到 被自己信赖的好朋友 骂了自己喜欢的人的感受"。。。。。
由于那天我情绪比较激动，所以我再次去确认了一下我那天是否有人身攻击的话语存在，后发现我始终表达的思想都是："为什么不准备一下，这样上去什么都不会真的尊重人么？？"
还有即使我再讨厌这个人，我也从来没有对我朋友也好，或者仅仅是认识互关的人也罢，她们曾经对我说过喜欢/好感的任何人，我都绝不会进行这样的人身攻击，我看着那条微博就真挺不知道怎么表达的[黑线]
只能说事情发生到今天，有这样的结果我是完全没料到的，一些认识的朋友这样对待我，我也确实偷偷伤心抱怨过的。
直到我认真想了想，没有人应该无条件承受我来去一阵风的情绪，我不放在心上不代表别人也是，我有我自己的情绪，别人也有自己的情绪，我觉得受到这样的对待很委屈，没有想别人是不是也委屈，反而是我把大家弄得都挺不愉快的。
现在这一切我也都欣然接受，也都是我发疯嘴小巴的报应吧，挺好的，认为我我发疯也好，经常性辱骂也罢，甚至不爱她和疯逼没差也行。
我不想再争论这些无聊的事了，追星好累哦，既然得罪完所有人道歉之后，就应该自觉离开的，别让大家都不开心，更别让自己变得不开心。
一些人问我她就这么不值得你信任么？？为什么有了澄清以后也一点都感觉不到你因为当天第一局比赛冲动的嘴了小巴而后悔。
其实这个答案只对我有意义，对你们没有。因为问这种话的人我只能说你可能从来没有真的了解过我，从我认识一些人开始到现在始终都是我，从来没变过，我承认那些严重的情绪化，口无遮拦，可如果把这些全都理解成我和疯逼没有区别，那我也无话可说，因为我的爱也不需要任何人认可。
至于我的朋友，你们在我心里早就是脱离饭圈的朋友了，我希望我们不会因为追星，或者一些粉圈琐事的矛盾而坍塌（所以其实大家各自选择自己舒服的方式很好）
最后 祝大家生活愉快，麻烦大家取关
天津印发通知：农贸市场要这样进行新冠病毒环境监测
近日，天津市防控指挥部发布通知，转发国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组《关于印发农贸（集贸）市场新型冠状病毒环境监测技术规范的通知》，要求市防控指挥部各工作组、各成员单位，各区防控指挥部认真参照执行。
关于转发《关于印发农贸（集贸）市场
新型冠状病毒环境监测
技术规范的通知》的通知
市防控指挥部各工作组、各成员单位，各区防控指挥部：
根据市防控指挥部领导同志批示要求，现将国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组《关于印发农贸（集贸）市场新型冠状病毒环境监测技术规范的通知》转发给你们，请认真参照执行。
各区防控指挥部以及市市场监管委、市商务局、市农业农村委、市卫生健康委等部门要切实负起各自责任，加强协同配合，严格按照技术规范进一步明确监测对象和监测内容，改进优化采样方法，做好样本采集，科学规范做好检测工作，确保检测结果真实有效；严格按照《新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）》相关要求做好实验室生物安全管理；规范填写、及时报送《新型冠状病毒环境检测标本送检表》，做到第一时间发现、第一时间处置、第一时间布防，最大限度降低农贸（集贸）市场疫情传播潜在风险。
市防控指挥部
2020年8月1日
农贸（集贸）市场新型冠状病毒
环境监测技术规范
农贸（集贸）市场是新冠肺炎疫情防控的重点场所，加强对农贸（集贸）市场新冠病毒环境监测，对于深入开展病毒溯源和疫情防控意义重大。为科学规范指导开展农贸（集贸）市场新冠病毒环境监测工作，特制定本技术规范。
一、监测对象
监测重点为具备区域辐射能力的大型农贸（集贸）市场，特别是包括冷冻、冷藏功能的肉类和海鲜水产交易摊位，或者存在潮湿、密闭空间的市场。
二、监测内容
（一）市场内重点摊位的设施、用具表面病毒检测。重点对摊位台面、面板、地面、把手，以及各种制作和使用器具等表面，包括脱毛或切割机械、刀具等，采集拭子样本。
（二）市场内重点摊位从业人员咽拭子、衣物表面、手部病毒检测。对处于工作状态的从业人员手部表面，采集拭子样本。
（三）市场内重点摊位存放食品的冰箱、冷藏柜内部表面病毒检测。对储藏食物过程中经常触及的冰箱、冷藏柜内表面，采集拭子样本。
（四）市场内销售的肉、禽类和海鲜水产类食品的病毒检测。对市场内销售的食品应当按照无包装食品和有包装食品加以区分，其中有包装类食品重点是需要冷藏运输的肉、禽类和海鲜水产类食品，采集拭子样本。
（五）市场内排水系统中污水的病毒检测。重点包括市场内海鲜水产、肉禽类产品摊位来源的污水，采集拭子样本或污水样本。
（六）市场内公共空间中人员接触较多的部位，包括主要进出口的电梯按钮、楼梯扶手、门把手表面，茶水间、卫生间等公用设备设施表面，潮湿的公共通道和卫生间地面、墩布池等采集拭子样本。
（七）市场内经常性跨区域移动的工具或物品，包括垃圾车、垃圾桶、墩布等清洁工具，转运物品的拖车等，采集拭子样本。
（八）市场内工作人员聚集、通风不良的环境，包括办公室、工具间、休息间、局部交易环境等环境拭子及气溶胶样本。
三、样本采样
（一）样本要求。
1．从业人员咽拭子、手部、衣物和其他物体表面拭子样本：要求用病毒采样管中的病毒保存液，充分浸润采样棉签后，对拟采集的手部或物体（包括公共通道的地面）的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对采样对象表面，进行多点分布式采样。
2．食品表面拭子样本：食品样本不可直接进行采集，应当首先将拟采集的食品小心分离，并存放于洁净采样袋后，再进行拭子样本的采集。要求用病毒采样管中的病毒保存液，充分浸润采样棉签后，对拟采集食物样本的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对样本表面，进行多点分布式采样。
3．污水样本：按照市场内排水系统分布情况，选取2-3处污水采样位置，重点为内部管网汇集处、水流方向的下游或与市政管网的连接处。采集拭子样本要求，用采样棉签浸入污水中，使其吸附污水并在采样管中对涮洗3次以上。采集污水样本要求，用聚乙烯塑料瓶收集30-500mL污水水样；大于500mL体积的污水采集可以使用聚乙烯塑料桶或现场水样专用富集设备。同时要满足对污水采样位置，进行多点分布式采样。
4．动物样本：对于活体动物，可分别用采样棉签采集其体表拭子、口咽拭子和肛拭子，也可以采集其排泄物或分泌物样本，并在记录单上进行相应记录。对于以经过剥皮等处理的动物样本，分别用棉签采集其体表和体腔拭子样本，要求用病毒采样管中的病毒保存液，充分浸润采样棉签后，对拟采集食物样本的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对样本表面，进行多点分布式采样。
5．其他器具：笼具或鱼缸等装运、养殖动物的容器，需首先观察或了解该容器具体存放、养殖过的动物类型，采集容器内壁拭子样本或内容物液体样本。
6．人员聚集、通风不良的局部交易区域、办公室、休息间等环境采集气溶胶样本。
（二）采样方法。
1．采样周期：对重点大型集贸市场（特别是销售生鲜类产品的市场）按照1次/周，对其余需要监测的集贸市场按照1次/月的频次进行病毒监测。
2．采样实施：现场采样由两名以上的工作人员参与完成，采样时应当穿戴防护服、防护口罩、鞋套和医用一次性手套。采样过程需开启现场采样视频记录设备。
3．采样装备：病毒采样箱、病毒采样管、气溶胶采集器、样品记录单、手消设备、洁净采样袋、冰袋、高危险生物样本转运箱和生物安全垃圾袋等。
4．采样记录：样本信息应当包括样本采集的采样时间、地点、集贸市场名称、摊位编号、采样类型、样本编号以及采样人等信息。
5．采样操作：采样开始前，要求穿戴防护服、口罩、鞋套和手套等个人防护用品进入采样现场，并使用手消进行手部消毒。拭子样本采样过程中，采样棉签只能接触当前采集的样本，避免触碰到其他物体。污水样本采集前，先充分搅匀，然后取样。污水分三层以上，不能搅匀时，可按各层量的多少的比例分层取样。气溶胶样本采集使用气溶胶采集器，设定采集高度、空气通量和采集时间，进行气溶胶采集，将采集后的吸收液或滤膜放置在特定的低温容器进行转运。采样结束后，清理废弃物后离场。
6．样品转运：采集样品连同采样记录单应当在24小时内运送至当地指定的病毒监测机构进行检测，样本建议冷藏存放于高危险生物样本转运箱中，并由专人、专车进行转运。
四、检测
（一）样本分装和保存。
1．样本分装：标本采集后应当在生物安全二级实验室生物安全柜内分装，但个人防护装备参照生物安全三级实验室的防护要求。所有采集对环境标本应当分装到大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样本采集管里，按照1000ul/管进行分装。容器（采集管）外注明样本编号、种类及采样日期。用于后续核酸提取和病毒分离等实验室检测工作。
2．样本保存：用于病毒分离和核酸检测的标本应当尽快进行检测，能在24小时内检测的标本可置于4℃保存；24小时内无法检测的标本则应当置于-70℃或以下保存（如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。
（二）污水水样前期处理。
使用离心技术去除污水中杂质。先打开低温离心机，待温度降至4℃左右，建议4654离心力离心30分钟，取上清。再使用膜吸附技术或超滤技术进行上清液的浓缩。
（三）核酸提取。
新型冠状病毒的常规检测方法是通过实时荧光RT-PCR鉴定。任何新型冠状病毒的检测都必须由经过相关生物安全及技能培训的人员进行操作。对已经灭活的样本，应当在生物安全二级（BSL-2）实验室内，使用自动化核酸提取仪，配套核酸提取试剂盒进行病毒核酸的提取。核酸提取后，应当将核酸产物进行分装，用于后续核酸实时荧光定量（RT-PCR）及深度测序。核酸提取操作参考相关厂家试剂盒说明书开展。
（四）实时荧光定量PCR。
在BSL-2实验室中对所有已提取的核酸样本，应当用经CFDA批准的RT-PCR诊断试剂进行新型冠状病毒核酸检测，以保证实验结果的正确可靠。RT-PCR反应体系和操作参考相关厂家试剂盒说明。每一次RT-PCR反应均应当设置阴性对照、阳性对照和无模板空白对照，以确保扩增体系工作正常。
五、实验室生物安全
实验室安全级别参照最新版《新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）》的相关内容进行管理。采集的环境样本属于未经培养的感染性材料，在采用可靠的方法灭活前进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分析，以及临床样本的灭活等操作，应当在生物安全二级实验室进行，同时采用生物安全三级实验室的个人防护。环境样本在采用可靠的方法灭活后进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等操作应当在生物安全二级实验室进行。
（来源于“津云”公众号）
近日，天津市防控指挥部发布通知，转发国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组《关于印发农贸（集贸）市场新型冠状病毒环境监测技术规范的通知》，要求市防控指挥部各工作组、各成员单位，各区防控指挥部认真参照执行。
关于转发《关于印发农贸（集贸）市场
新型冠状病毒环境监测
技术规范的通知》的通知
市防控指挥部各工作组、各成员单位，各区防控指挥部：
根据市防控指挥部领导同志批示要求，现将国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组《关于印发农贸（集贸）市场新型冠状病毒环境监测技术规范的通知》转发给你们，请认真参照执行。
各区防控指挥部以及市市场监管委、市商务局、市农业农村委、市卫生健康委等部门要切实负起各自责任，加强协同配合，严格按照技术规范进一步明确监测对象和监测内容，改进优化采样方法，做好样本采集，科学规范做好检测工作，确保检测结果真实有效；严格按照《新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）》相关要求做好实验室生物安全管理；规范填写、及时报送《新型冠状病毒环境检测标本送检表》，做到第一时间发现、第一时间处置、第一时间布防，最大限度降低农贸（集贸）市场疫情传播潜在风险。
市防控指挥部
2020年8月1日
农贸（集贸）市场新型冠状病毒
环境监测技术规范
农贸（集贸）市场是新冠肺炎疫情防控的重点场所，加强对农贸（集贸）市场新冠病毒环境监测，对于深入开展病毒溯源和疫情防控意义重大。为科学规范指导开展农贸（集贸）市场新冠病毒环境监测工作，特制定本技术规范。
一、监测对象
监测重点为具备区域辐射能力的大型农贸（集贸）市场，特别是包括冷冻、冷藏功能的肉类和海鲜水产交易摊位，或者存在潮湿、密闭空间的市场。
二、监测内容
（一）市场内重点摊位的设施、用具表面病毒检测。重点对摊位台面、面板、地面、把手，以及各种制作和使用器具等表面，包括脱毛或切割机械、刀具等，采集拭子样本。
（二）市场内重点摊位从业人员咽拭子、衣物表面、手部病毒检测。对处于工作状态的从业人员手部表面，采集拭子样本。
（三）市场内重点摊位存放食品的冰箱、冷藏柜内部表面病毒检测。对储藏食物过程中经常触及的冰箱、冷藏柜内表面，采集拭子样本。
（四）市场内销售的肉、禽类和海鲜水产类食品的病毒检测。对市场内销售的食品应当按照无包装食品和有包装食品加以区分，其中有包装类食品重点是需要冷藏运输的肉、禽类和海鲜水产类食品，采集拭子样本。
（五）市场内排水系统中污水的病毒检测。重点包括市场内海鲜水产、肉禽类产品摊位来源的污水，采集拭子样本或污水样本。
（六）市场内公共空间中人员接触较多的部位，包括主要进出口的电梯按钮、楼梯扶手、门把手表面，茶水间、卫生间等公用设备设施表面，潮湿的公共通道和卫生间地面、墩布池等采集拭子样本。
（七）市场内经常性跨区域移动的工具或物品，包括垃圾车、垃圾桶、墩布等清洁工具，转运物品的拖车等，采集拭子样本。
（八）市场内工作人员聚集、通风不良的环境，包括办公室、工具间、休息间、局部交易环境等环境拭子及气溶胶样本。
三、样本采样
（一）样本要求。
1．从业人员咽拭子、手部、衣物和其他物体表面拭子样本：要求用病毒采样管中的病毒保存液，充分浸润采样棉签后，对拟采集的手部或物体（包括公共通道的地面）的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对采样对象表面，进行多点分布式采样。
2．食品表面拭子样本：食品样本不可直接进行采集，应当首先将拟采集的食品小心分离，并存放于洁净采样袋后，再进行拭子样本的采集。要求用病毒采样管中的病毒保存液，充分浸润采样棉签后，对拟采集食物样本的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对样本表面，进行多点分布式采样。
3．污水样本：按照市场内排水系统分布情况，选取2-3处污水采样位置，重点为内部管网汇集处、水流方向的下游或与市政管网的连接处。采集拭子样本要求，用采样棉签浸入污水中，使其吸附污水并在采样管中对涮洗3次以上。采集污水样本要求，用聚乙烯塑料瓶收集30-500mL污水水样；大于500mL体积的污水采集可以使用聚乙烯塑料桶或现场水样专用富集设备。同时要满足对污水采样位置，进行多点分布式采样。
4．动物样本：对于活体动物，可分别用采样棉签采集其体表拭子、口咽拭子和肛拭子，也可以采集其排泄物或分泌物样本，并在记录单上进行相应记录。对于以经过剥皮等处理的动物样本，分别用棉签采集其体表和体腔拭子样本，要求用病毒采样管中的病毒保存液，充分浸润采样棉签后，对拟采集食物样本的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对样本表面，进行多点分布式采样。
5．其他器具：笼具或鱼缸等装运、养殖动物的容器，需首先观察或了解该容器具体存放、养殖过的动物类型，采集容器内壁拭子样本或内容物液体样本。
6．人员聚集、通风不良的局部交易区域、办公室、休息间等环境采集气溶胶样本。
（二）采样方法。
1．采样周期：对重点大型集贸市场（特别是销售生鲜类产品的市场）按照1次/周，对其余需要监测的集贸市场按照1次/月的频次进行病毒监测。
2．采样实施：现场采样由两名以上的工作人员参与完成，采样时应当穿戴防护服、防护口罩、鞋套和医用一次性手套。采样过程需开启现场采样视频记录设备。
3．采样装备：病毒采样箱、病毒采样管、气溶胶采集器、样品记录单、手消设备、洁净采样袋、冰袋、高危险生物样本转运箱和生物安全垃圾袋等。
4．采样记录：样本信息应当包括样本采集的采样时间、地点、集贸市场名称、摊位编号、采样类型、样本编号以及采样人等信息。
5．采样操作：采样开始前，要求穿戴防护服、口罩、鞋套和手套等个人防护用品进入采样现场，并使用手消进行手部消毒。拭子样本采样过程中，采样棉签只能接触当前采集的样本，避免触碰到其他物体。污水样本采集前，先充分搅匀，然后取样。污水分三层以上，不能搅匀时，可按各层量的多少的比例分层取样。气溶胶样本采集使用气溶胶采集器，设定采集高度、空气通量和采集时间，进行气溶胶采集，将采集后的吸收液或滤膜放置在特定的低温容器进行转运。采样结束后，清理废弃物后离场。
6．样品转运：采集样品连同采样记录单应当在24小时内运送至当地指定的病毒监测机构进行检测，样本建议冷藏存放于高危险生物样本转运箱中，并由专人、专车进行转运。
四、检测
（一）样本分装和保存。
1．样本分装：标本采集后应当在生物安全二级实验室生物安全柜内分装，但个人防护装备参照生物安全三级实验室的防护要求。所有采集对环境标本应当分装到大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样本采集管里，按照1000ul/管进行分装。容器（采集管）外注明样本编号、种类及采样日期。用于后续核酸提取和病毒分离等实验室检测工作。
2．样本保存：用于病毒分离和核酸检测的标本应当尽快进行检测，能在24小时内检测的标本可置于4℃保存；24小时内无法检测的标本则应当置于-70℃或以下保存（如无-70℃保存条件，则于-20℃冰箱暂存）。
（二）污水水样前期处理。
使用离心技术去除污水中杂质。先打开低温离心机，待温度降至4℃左右，建议4654离心力离心30分钟，取上清。再使用膜吸附技术或超滤技术进行上清液的浓缩。
（三）核酸提取。
新型冠状病毒的常规检测方法是通过实时荧光RT-PCR鉴定。任何新型冠状病毒的检测都必须由经过相关生物安全及技能培训的人员进行操作。对已经灭活的样本，应当在生物安全二级（BSL-2）实验室内，使用自动化核酸提取仪，配套核酸提取试剂盒进行病毒核酸的提取。核酸提取后，应当将核酸产物进行分装，用于后续核酸实时荧光定量（RT-PCR）及深度测序。核酸提取操作参考相关厂家试剂盒说明书开展。
（四）实时荧光定量PCR。
在BSL-2实验室中对所有已提取的核酸样本，应当用经CFDA批准的RT-PCR诊断试剂进行新型冠状病毒核酸检测，以保证实验结果的正确可靠。RT-PCR反应体系和操作参考相关厂家试剂盒说明。每一次RT-PCR反应均应当设置阴性对照、阳性对照和无模板空白对照，以确保扩增体系工作正常。
五、实验室生物安全
实验室安全级别参照最新版《新型冠状病毒实验室生物安全指南（第二版）》的相关内容进行管理。采集的环境样本属于未经培养的感染性材料，在采用可靠的方法灭活前进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分析，以及临床样本的灭活等操作，应当在生物安全二级实验室进行，同时采用生物安全三级实验室的个人防护。环境样本在采用可靠的方法灭活后进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等操作应当在生物安全二级实验室进行。
（来源于“津云”公众号）
.......太多的话想说却不知该对谁述说，在无穷的省略号中倾述吧，伴随着这么多年的经常性失眠，感叹着大多数人平常看到的只是表象，而事关自己生活的内在，却从未去面对与思考！就是这么的残酷无情吧！真正感受到冷暴力和表情或语言暴力，比见面掏上一架，还要残忍和伤害千倍万倍！.................................................................................................................................
✋热门推荐