今天的槽点真的很多[并不简单]首先,我要给环艺班的艺术生小孩上一大本的理论课,还要给完全0⃣️设计基础,连图纸长啥样都不知道的园艺班小孩上规划设计课;其次,今天的天气在教室待一天的待遇差不多就是蒸了个桑拿的出汗量;再者,第一节课前就报销了一个重要的文件U盘;最后就是,开学第一天挑战这么大课时量的后果应该就是明天我可以禁言了[裂开][裂开][裂开]

【“万能钥匙”解锁马铃薯自交不亲和】马铃薯是世界上最重要的块茎类粮食作物,全球有13亿人口以马铃薯为主食。与大多数谷物类粮食作物不同,马铃薯靠种薯繁殖。

2013年起,中国农业科学院深圳农业基因组研究所(以下简称基因组所)研究员黄三文团队联合云南师范大学(以下简称云师大)等团队,发起“优薯计划”,即以二倍体育种替代四倍体育种,以杂交种子繁殖替代薯块繁殖。

图1:二倍体马铃薯的茎叶和种子,以及横切的彩色马铃薯块茎。云师大供图

二倍体马铃薯是一种自交不亲和的作物,培育二倍体自交系首先要克服自交不亲和。23年前,日本和美国科学家发布了一种可以自交的野生马铃薯,并证实这是由某个基因控制的。此后,很多科学家想找到这个基因却无功而返。

2021年7月6日,《自然—通讯》在线发表了云师大和基因组所合作克隆的马铃薯自交亲和基因Sli及其调控机制https://t.cn/A6fS6y4h。

中国农业大学教授李天中告诉《中国科学报》:“打破自交不亲和性的技术瓶颈,多代自交获得纯合自交系,利用选择的自交系育成的优新品种杂交种子生产,一直是马铃薯育种家的工作目标和努力方向。”

南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室教授吴巨友在接受《中国科学报》采访时说,这项成果将在创制二倍体马铃薯自交系、丰富其杂交亲本遗传基础中发挥重要作用,也将为其他配子体型自交不亲和性物种,如梨、苹果等的自交亲和品种选育提供新途径。

△ 表型难鉴定 基因难克隆

1998年,日本和美国科学家合作发布了一株自交亲和的野生材料,并确定了这个材料的自交亲和性状受单个位点调控。

论文共同通讯作者尚轶告诉《中国科学报》,由于前人报道马铃薯1号染色体上的S位点调控了自交不亲和过程,所以他们推测这个位点通过抑制S位点起作用,并把这个位点命名为Sli,可以理解为S位点抑制子。

“在马铃薯中,平均每条染色体上存在3000多个编码基因。如果把基因组当做一个宝藏,基因就相当于里面的一颗宝石。发现基因,代表知道有这颗宝石的存在;把基因初步定位在某个染色体上类似于知道这颗宝石位于宝藏的哪一部分,但并不清楚具体位置;而成功地克隆这个基因则意味着准确找到了这颗宝石。”论文共同第一作者、岭南现代农业科学与技术广东省实验室深圳分中心研究员张春芝说。

国际上多个实验室一直在尝试克隆Sli基因。然而,鉴定自交是否亲和首先需要进行大量自交授粉工作,通过授粉后是否坐果进行判断是否自交亲和。

张春芝介绍,植株坐果与否受到多种环境因素的影响。如果自交不亲和的植株授粉时发生了串粉,就会导致坐果。比如一阵风把其他植株的花粉吹到柱头上,或者授粉时镊子没有清理干净,粘上了其他植株的花粉,都可以让本身自交不亲和的植株自花授粉后坐果。

而那些自交授粉后不坐果的,也有可能是温度太低或者太高,或者花粉育性出了问题,而不是由于自交不亲和。

“这就导致表型鉴定特别困难,且鉴定结果也不准确,给Sli基因的克隆工作带来了很大的困难。”论文第一作者、云师大助理研究员马玲介绍,不仅表型难鉴定,前人还认为Sli基因与马铃薯的致死基因相连。所以当Sli位点纯合后,会导致后代致死,这让他们无法得到Sli基因的纯合体。

“由于马铃薯自交亲和的表型易受外界环境干扰,该基因一直未被克隆。”黄三文说。

图2:彩色马铃薯的横切面上放着二倍体马铃薯种子。云师大供图

△ 神奇的偏分离现象

在含有Sli位点的马铃薯植株自交后代中,会出现一种偏分离现象。马玲解释道,正常情况下杂合的基因型(A/a)自交后代中应该出现A/A、A/a、a/a三种基因型,比例分别是1:2:1。而含有Sli基因的杂合个体自交后只出现Sli/Sli和Sli/sli两种基因型,比例为1:1,找不到sli/sli基因型的个体。

“后代在12号染色体上出现了极端的偏分离比例。”马玲说。

尽管前人也发现了这一偏分离现象,但他们认为原因是Sli与致死基因连锁,所以当Sli位点纯合后就会导致后代致死。

“然而,我们发现偏分离的原因是受精造成的,即只有含Sli基因的花粉才能够完成受精,因此后代中有Sli/Sli和Sli/sli基因型,没有sli/sli个体。”马玲说。

于是,含有Sli基因的杂合个体自交产生的后代全部含有Sli基因,都是自交亲和的。“这样我们就不用对后代再进行繁琐的亲和表型鉴定,并利用这个特点扩大我们的后代群体用于基因定位,群体越大对基因定位帮助越大。”尚轶说。

吴巨友告诉《中国科学报》,利用后代均为自交亲和表型的特点,他们将遗传群体扩大至6624个植株,最终从花粉RNA中克隆了Sli基因。

“我们发现了配子体导致的自交不亲和性,其后代均为自交亲和表型,不用去做表型鉴定,这样就可以扩大遗传定位群体数量,因而快速克隆了Sli基因。”黄三文告诉《中国科学报》。

△ 一把“万能钥匙”

找到了马铃薯自交亲和基因,但它究竟是如何实现这一机制的呢?

吴巨友向《中国科学报》解释,植物自交不亲和的遗传位点称为S位点,分别编码雌蕊决定因子和花粉决定因子。

在分子水平上,马铃薯属于配子体型自交不亲和性作物,表现为花粉管在花柱中部停止生长,不能进入子房完成受精。该系统中,雌蕊的决定因子是S-RNase蛋白,它是一种细胞毒性蛋白,仅在花柱中表达,并被分泌到花柱传导组织中;而花粉的决定因子是位于S-locus上的SLF蛋白,它们在花粉中特异表达,不能识别自身的S-RNase,因此S-RNase的毒性作用存在,表现出自交不亲和。

当花粉管在花柱引导组织生长时,亲和与不亲和的S-RNase蛋白都可以进入花粉管。亲和的S-RNase在花粉胞质中被花粉SLF蛋白识别并降解;而不亲和的S-RNase被保留在胞质中发挥其毒性作用,引起花粉管的细胞程序性死亡而停止生长。

“如果认为S-RNase蛋白是雌蕊阻断花粉管进入的‘锁’,那么SLF蛋白就是打开这把‘锁’的‘钥匙’。”吴巨友说,通常,一种SLF只能识别1-2种类型的S-RNase,类似于一把钥匙开一把锁,如果一把钥匙能开多把锁,就可以产生广泛的自交亲和。

尚轶告诉《中国科学报》,他们鉴定到的Sli蛋白不是S位点上的SLF蛋白,且能识别超过10种类型的S-RNase,从而打破自交不亲和性,表现出“万能钥匙”的作用,可广泛应用于打破二倍体马铃薯的自交不亲和性,对于培育马铃薯自交系有重要作用。

图3:打破二倍体马铃薯自交不亲和的“万能钥匙”Sli基因。云师大供图

“马铃薯自交亲和基因Sli的进化有其特殊意义,现在还未知。”黄三文说,目前也不清楚别的作物里是否也有类似的基因存在。

李天中说,该研究突破了马铃薯自交不亲和性技术瓶颈,为自交系杂交育种提供了全新策略,是植物自交不亲和性理论研究并应用于产业的成功范例。相较于传统策略,该方法创制自交亲和马铃薯具有广谱性强、效率高等优势,为优薯计划提供了重要工具。

该研究也为遗传背景高度杂合、杂交育种随机性强、多种优良性状聚合难的其他自交不亲和性园艺作物育种提供了借鉴和思路。https://t.cn/A6fofOgb

#你不知道的科学那些事儿# 【“桃李满天下”的遗传学证据找到了![哆啦A梦吃惊]】
3月10日,《基因组研究》(Genome Research)在线发表了中国农业科学院郑州果树研究所研究员王力荣团队领衔完成的多个环境因子对桃基因组影响的遗传分析,给“桃李满天下”赋予了遗传学含义,可帮助育种家建立应对气候变化品种适应性改良的新模式。传送门:https://t.cn/A6tH2qOZ

【来自气候变化的压力】

不同生态型桃果实拥有丰富的遗传多样性。中国农科院郑果所供图

论文共同通讯作者王力荣长期从事桃树研究。在河南省郑州市,她带领团队建立的国家园艺种质资源库桃资源圃,保存有1430份桃种质资源,是全世界保存桃种质最多的资源库。

通过对资源圃中89个桃种质长期监测数据进行分析,王力荣团队发现,桃的开花时间较30年前提前了10天。

“桃对环境变化十分敏感,花期提前会受到‘倒春寒’的威胁。”王力荣说,气候变化对农业生产影响巨大。在过去几十年中,气候变化降低了许多粮食作物的产量,改变了农作物的物候期,并使得一些作物的分布范围缩小。

许多研究已经鉴定出使水稻、大豆和其他粮食作物适应当地环境的基因。但是,很少有研究关注水果作物,例如桃树,而桃的全球年产量为2450万吨,是世界主要果树种类。

现在的桃树品种能不能适应未来的气候变化?这让王力荣产生了研究桃这种适应性强的果树如何与环境发生相互作用的想法。

她告诉《中国科学报》,桃起源于我国,适应性强,是研究植物环境适应性的良好材料。桃分布范围广泛,在我国,除东北地区仅有野生近缘种以外,大部分地区都种植栽培桃。由于桃分布地涵盖多种环境类型,如高原、平原,寒带、温带、热带,干旱、潮湿等,能够体现出对不同环境适应性的进化。

此外,“桃基因组较小,是二倍体,倍性低;桃树自花授粉结实,因而基因组杂合度低;童期短,仅为2~3年,育种所需时间较其他果树短;桃进化史上没有发生过全基因组复制事件,基因组简单,冗余基因相对较少。因此桃被认为是蔷薇科果树研究的模式物种。”王力荣说。

桃树的特殊地位和特点,使得在桃树研究中获得的结论有可能给其他果树研究提供借鉴。这也是王力荣团队坚持研究桃树的原因之一。

“基因是分子育种的关键,发掘桃适应不同环境条件的基因,明确桃响应气候变化的基因,能够促使新培育的品种适应能力始终领先于环境变化的速度,进而减小环境变化对粮食安全带来的威胁。”王力荣说。

论文共同通讯作者、美国康奈尔大学教授费章君告诉《中国科学报》,研究桃树和环境互作的遗传基础可以帮助人们培育在许多不同的恶劣环境中生长的桃树新品种,将其地理范围扩展到新的地区,从而促进当地经济发展,并为当地市场带来更多优质果品。

【追溯桃子的原生地环境】

由于人们专注于风味、甜度和其他口感品质,许多桃品种中与环境适应相关的基因已经丢失。

费章君说,不过,桃子的野生近缘种和地方品种很多,并且它们长期以来已适应特定的当地条件,具有巨大的遗传多样性,这可为改善其“表亲”的适应力提供资源。

但是,通过什么方法可以更快的找到这些基因呢?

通常,科学家研究作物与环境的互作关系,会选择在几个不同的典型环境下,同时种植若干种质资源,观察并记录这些作物种质在三到五年间呈现出的不同的表型性状,然后通过大数据分析和基因组分析,获得表型与基因型之间的对应关系,从而筛选出与环境适应的相关基因。

如果采用上述方法研究桃树与环境的互作,成本高、周期长。

“我们的种质资源库中保存了非常完善的基本信息。”王力荣说,每一个桃种质都可以追溯到其采集地点,也就是说,科学家能够借此知道它的适生环境在哪里。

传统上,桃品种按照地理分布和性状特征划分为7个类型,分别为云贵高原生态型、华南亚热带生态型、长江中下游生态型、华北平原生态型、东北高寒生态型、西北干旱生态型、青藏高原生态型。

王力荣认为,利用当地的气候条件和当地品种的基因型进行关联分析,就能找到其中适应当地环境的相关基因。这大大降低了实验难度,也能保证实验结果的准确性。

【2700个环境相关位点】

于是,该团队研究人员对覆盖上述7个地理区域的263种桃种质资源进行了全基因组环境关联研究(GWEAS)。

结果证实,这些种质确实可以划分为7个与地理分布匹配的类群。论文第一作者李勇告诉《中国科学报》,进一步分析环境、基因组和地理位置三者之间的相关性,发现环境与基因组具有很高的相关性,说明基因组之间的差异是由环境造成的,基因组随着环境的变化而变化。

图2:桃不同分布环境对比。中国农科院郑果所供图

“也就是说,由于受到环境的自然选择,桃为了适应不同的环境发生不同的变异,导致7个生态型的桃品种的基因组特点不同,形成了适应不同环境条件的基因组模式。”李勇说。

他们还确定了2700多个环境关联基因位点,这些位点与影响这些地区气候的51个环境因素密切相关。

图3:桃适应性相关基因及其功能分析。中国农科院郑果所供图

例如,发现来自东北高寒地区的桃树在组氨酸磷酸转移蛋白基因AHP5中有一个特有的遗传变异,该变异赋予了这些品种抵御严寒的能力。

来自干旱地区的桃树中,与抗旱密切相关的脱落酸调控途径的一系列基因受到自然选择。进一步实验表明,在干旱胁迫下,脱落酸诱导了更高水平的蔗糖合成酶,从而解释了为什么干旱地区桃果实的糖含量高于其他地区桃子。

费章君说:“当桃子这样的果树在干旱等胁迫条件下生长时,果实就会变得更甜。在这项研究中,我们发现了干旱与桃子糖含量之间的直接遗传联系。”

而在青藏高原的桃样本中,研究小组发现了查尔酮合酶基因CHS2的一个变异,导致其对高海拔地区强烈的紫外线辐射具有耐受性。该基因高表达增加了植物新生组织中花色苷的含量,从而保护了它们免受紫外线辐射伤害。

他们也提出了桃树花期提前的潜在遗传学解释:昼夜节律基因LNK1的变异。该变异在温度升高时上调表达,从而导致花开。费章君说:“这一发现最终可能使育种者控制果树的开花时间,以便在种植者和市场准备就绪时收获桃子。”

【千桃基因组计划】

“我们的研究提供了许多候选基因,表明桃子如何适应各种环境压力和刺激。”王力荣说, “育种者可以利用这些信息培育出更具广泛适应性的桃树品种,从而更好地应对极端温度、干旱和气候变化。”

这项工作是王力荣团队发起的“千桃基因组”(1000 Peach Genome)计划的阶段性成果之一。王力荣告诉记者,该计划以1000余份全球范围内分布的桃野生近缘种、地方品种和培育品种为材料,对其进行全基因组测序,发掘控制重要农艺性状、抗性性状和环境适应性的关键基因,解析桃进化驯化机理、重要农艺性状形成机制和环境适应性遗传基础,开发实用分子育种标记,为分子设计育种奠定基础。

此前,该团队已经在桃基因组变异特征、人工选择对桃基因组的修饰、驯化和农艺性状关联分析方面取得重要进展。

而这项最新研究则主要揭示了自然选择对桃基因组的影响,以及桃适应不同环境的遗传学基础。

王力荣表示,下一步,他们将利用丰富的种质资源,开展蔷薇科果树如何适应环境的遗传学研究,为培育适应气候变化的果树新品种奠定理论基础。https://t.cn/A6tH2qOA


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