客户文献分享| IF=14.612，基于酶催化的Asp-Phe-Tyr三肽聚合反应癌症免疫疗
本期解读
题目：A Strategy Based on the Enzyme-Catalyzed Polymerization Reaction of Asp-Phe-Tyr Tripeptide for Cancer Immunotherapy
期刊：JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
影响因子：14.612/Q1
合作技术：iTRAQ定量蛋白组学
一、研究背景
释放免疫系统的力量被认为是治疗癌症的重要策略。尽管大多数癌症都表达肿瘤特异性抗原，但免疫疗法仍是保守的，反应低且不良反应频繁。一个主要原因是癌症已经获得了抑制抗原呈递的能力。约70-95％的人类癌细胞下调与抗原呈递相关的蛋白质的表达。这些蛋白质的系统性缺乏促使癌细胞逃脱免疫识别。激活免疫系统的努力主要集中在使用拮抗剂或抑制剂靶向某些蛋白质上。但是，单靶标药物的功效是有限的，而免疫疗法为癌症提供了一个有前景的治疗策略。然而，即使在高抗原负担的肿瘤中，全身抑制抗原提呈仍然极大地限制了免疫治疗的应用。在此，研究者构建了一种基于功能三肽Asp-Phe-Tyr (DFY)的肿瘤蛋白工程系统，该系统可以自动收集和传递靶向细胞的免疫肿瘤蛋白到免疫细胞中。通过酪氨酸酶催化聚合，DFY三肽选择性地聚集在酪氨酸酶高表达的黑色素瘤细胞中。然后将富含醌的中间体与肿瘤特异性蛋白通过Michael加成共价连接，形成携带肿瘤蛋白的微纤维，该微纤维可被抗原提呈细胞吞噬，并表现出肿瘤抗原特性以增强免疫效果。在抗原递呈不足的黑色素瘤细胞中，该系统可以成功地富集和运输含有肿瘤抗原的蛋白质到免疫细胞。此外，在小鼠黑色素瘤的体内研究中，DFY三肽经皮传递抑制肿瘤生长和术后复发。
二、技术路线
聚合肽筛选鉴定——聚合肽DFY作用机制解析——DFY作用下功能蛋白差异性分析——肿瘤蛋白交联pDFY的免疫激活机制解析——肿瘤模型DFY抗癌作用验证
三、实验结果
1. 酪氨酸酶催化聚合DFY。
首先，研究者筛选得到一种可被酪氨酸酶催化聚合的肽DFY（Asp-Phe-Tyr），并观察到在聚合过程中产生了不溶性黑色沉淀物，利用倒置显微镜和扫描电子显微镜（SEM）观察均表明是由DFY聚合成的微纤维（图1b和图1b）。然后，研究者研究了各种细胞系中酪氨酸酶基因（TYR）表达的差异，基于CCLE数据库（https://t.cn/Ev9rmGW）分析了TYR基因在740个细胞系中的表达水平，结果表明，与其他癌细胞分型相比，黑色素瘤细胞系表现出最高的TYR基因表达量（图1e）。此外，研究了酪氨酸酶过表达的黑色素瘤细胞中DFY的胞内聚合反应（图1f），结果表明DFY在黑素瘤细胞中的聚合是酪氨酸酶依赖性的。此外，研究者验证了DFY的聚合是否可以在体内原位诱导。将DFY和不可聚合肽（Asp-Phe-Phe，DFF）注射到小鼠癌旁组织中以观察其在肿瘤中的清除情况。如图1i所示，注射的DFY比DFF在肿瘤位置停留的时间更长，相比之下，大多数DFF在肿瘤中被快速清除了，因此推测DFY能在肿瘤组织中特异性聚合。
2. DFY的胞内蛋白捕获。
研究者通过MTT分析表明，DFY在33μM的浓度下可抑制小鼠B16细胞的增殖达57％（图2e），在与各种B16细胞抑制剂孵育后，发现单苯甲酮（酪氨酸酶抑制剂）和谷胱甘肽（GSH）均可将B16细胞从DFY聚合引起的细胞死亡过程中拯救出来（图2f）。Ac-DEVD-CHO（凋亡抑制剂），ferrostatin-1（促肥大症抑制剂），necrostatin-1（坏死性抑制剂），TBHQ和BHA（醌氧化还原酶诱导剂）却无法挽救DFY对细胞的伤害。得出的结论是，单苯甲酮和谷胱甘肽的解毒作用归因于GSH和DFY之间的迈克尔加成。通过荧光显微镜观察，发现长期培养后，微纤维从细胞中释放出来（图4Sd，e）。实验证明DFY收集靶细胞的胞内蛋白，并以类似于坏死的方式将它们转运出细胞，并伴随DFY聚合诱导的细胞死亡。因此，由pDFY携带的肿瘤蛋白的释放可能刺激随后的抗原触发的免疫反应。
3. 交联蛋白的蛋白质组学研究。
由于蛋白质的免疫原性因蛋白质而异，研究者研究了通过抗原工程系统收集的蛋白质类型，与金开瑞合作的串联质谱用于定量分析蛋白质含量。如图3a，b和S5所示，在DFY聚合后，确定了190个上调蛋白和346个下调蛋白（倍数变化1.5和P <0.05，超几何测试）。然后通过GO数据库富集分析了这些差异蛋白的功能。结果表明，这些蛋白质大多数与细胞代谢（氨基酸代谢，糖代谢），能量供应（糖酵解，有氧呼吸）和蛋白质合成（核糖体）相关（图3c）。发现这些蛋白质在功能上涵盖了细胞最重要的生物学功能（图3d）。差异蛋白主要来自核糖体，线粒体，细胞核和高尔基体。此外，通过STRING功能蛋白缔合网络研究了DFY聚合后减少的蛋白质之间的相互作用（图3e）。来自细胞器的蛋白质，特别是核糖体，线粒体和细胞核中的蛋白质，形成紧密的簇。该结果表明DFY可以特异性地交联来自这些细胞器的蛋白质，从而导致这些蛋白质的显着减少。另外，作为专业的产生黑色素的细胞器，还分析了在DFY处理的黑色素瘤细胞中黑色素体的蛋白质表达（图S5）。GO富集分析的结果表明，用DFY处理后，黑素体中的大多数相关蛋白也被下调。使用主成分分析（PCA）分析了Cys含量，理论等电点和差异蛋白质脂肪族指数三个指标（图3f），该结果表明被下调的蛋白质可以被DFY结构结合或化学交联。从实验上观察到，DFY处理可抑制线粒体功能，抑制蛋白质合成并损害细胞骨架形成（图S6）。这些实验结果与理论推测吻合良好。
4. 肿瘤蛋白交联pDFY的免疫激活。
为了研究B16细胞释放的纤维是否可以被APC吞噬，通过共聚焦荧光显微镜和流式细胞术检查了B16和APC（RAW264.7和DC）对DFY或pDFY的摄取（图4a，b）。荧光成像表明DFY在各种细胞中积累，但pDFY倾向于被APC吞噬。该观察证明，纤维携带的抗原蛋白更倾向于递送至APC。为了阐明pDFY携带的肿瘤蛋白是否能增强免疫反应，用流式细胞仪进一步分析了裂解物蛋白交联的pDFY在DCs成熟中的能力（图4c）。与裂解物组相比，裂解物+ pDFY在DC的成熟度上增加了2.3倍。此外，与裂解物+ pDFY相比，裂解物@pDFY诱导的DC成熟也更为显着（P = 0.0002）。然后将B16蛋白交联的经pDFY处理的B16细胞和脾细胞以1:10的比例共孵育，以研究智能抗原工程系统引发针对癌细胞的特异性免疫反应的能力（图4d），研究发现经裂解物@pDFY处理的脾细胞消除了59.3％的B16细胞。相反，裂解物或裂解物+ pDFY处理的脾细胞的混合物仅杀死了不到30％的B16细胞。携带肿瘤抗原蛋白的裂解物@ pDFY成功触发了针对B16细胞的特异性免疫杀伤。在此基础上，考虑到pDFY的佐剂作用和交联蛋白的强免疫原性，抗原工程系统可作为黑色素瘤治疗的免疫增强疫苗型材料。最后，经B16荷瘤小鼠皮下药物注射研究，证明了由于某些功能蛋白被裂解物@ pDFY富集，裂解物@ pDFY可以成功激活体内抗癌免疫反应。
5. DFY在不可切除黑色素瘤中的抗癌作用。
随后，研究者对抗原工程系统的肿瘤抑制能力进行了分析。抗PD1抗体（aPD1）或化学治疗药物已与基于DFY的抗原工程系统结合用于治疗B16荷瘤小鼠（图5a）实验结果表明DFY + aPD1的治疗抑制了91％的肿瘤生长。研究者还记录了各种治疗后小鼠的存活率（图5c）。在所有组中，用DFY + aPD1处理的小鼠的存活时间最长。该结果表明，肿瘤周围注射DFY不仅可以收集可能含有肿瘤抗原的肿瘤蛋白，而且可以将免疫原性肿瘤蛋白递送至APC并引起随后的CTL激活以抑制肿瘤进展。酶联免疫吸附试验（ELISA）显示，DFY + aPD1处理后，包括干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）在内的免疫激活标记物增加（图5f）。
6. DFY经皮给药治疗黑色素瘤。
研究者将凝胶状的DFY @ gel作为一种透皮治疗系统，粘附在皮肤上时释放DFY。如图6g所示，在相同深度下，用DFY @ gel治疗的肿瘤的平均荧光强度（MFI）高于DFY。使用V-C扩散池和荧光光谱仪研究了分离的猪皮中DFY @ gel的透皮吸收。与游离DFY相比，DFY @ gel的透皮渗透提高了1.5倍（图6h）。然后通过测量肿瘤体积评估DFY @ gel抑制肿瘤生长的能力（图6i）。在为期16天的实验中，DFY @ gel显示出与DFY（腹膜内注射）相似的治疗效果。IFN-α在临床上用于术后黑色素瘤的治疗。与临床方案相比，评估了DFY @ gel的治疗效果。IFN-α和经皮凝胶治疗均显着抑制了肿瘤的复发。该结果表明透皮DFY @ gel在预防黑素瘤复发方面具有与临床上使用的IFN-α几乎相同的治疗效果。
四、小结
在这项研究中，研究者设计了一种基于肽的肿瘤蛋白工程系统，该系统对黑素瘤治疗表现出强大的免疫原性。一旦进入恶性黑色素瘤细胞，该三肽进行酪氨酸酶催化的氧化聚合。同时，通过迈克尔加成反应还捕获了来自细胞核，线粒体和核糖体的高免疫原性功能蛋白，这引起了类似于坏死的快速细胞死亡。随后，肿瘤蛋白交联的pDFY从垂死和破裂的癌细胞中释放出来，形成的聚集纤维更易于被APC内吞。因此，设计的肿瘤蛋白质工程系统成功地收集了免疫原性蛋白质并将其递送至APC，并表现出辅助作用以增强免疫应答以消除肿瘤。DFY的经皮免疫疗法在小鼠和小型猪模型中也显示出高效率和高生物相容性，并显着延长了肿瘤小鼠的存活时间。在可切除的黑色素瘤中，发现DFY@gel具有与临床IFN-α治疗相似的复发预防效果。
了解金开瑞iTRAQ定量蛋白质组学技术：https://t.cn/A6V4xP7Y
本期解读
题目：A Strategy Based on the Enzyme-Catalyzed Polymerization Reaction of Asp-Phe-Tyr Tripeptide for Cancer Immunotherapy
期刊：JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
影响因子：14.612/Q1
合作技术：iTRAQ定量蛋白组学
一、研究背景
释放免疫系统的力量被认为是治疗癌症的重要策略。尽管大多数癌症都表达肿瘤特异性抗原，但免疫疗法仍是保守的，反应低且不良反应频繁。一个主要原因是癌症已经获得了抑制抗原呈递的能力。约70-95％的人类癌细胞下调与抗原呈递相关的蛋白质的表达。这些蛋白质的系统性缺乏促使癌细胞逃脱免疫识别。激活免疫系统的努力主要集中在使用拮抗剂或抑制剂靶向某些蛋白质上。但是，单靶标药物的功效是有限的，而免疫疗法为癌症提供了一个有前景的治疗策略。然而，即使在高抗原负担的肿瘤中，全身抑制抗原提呈仍然极大地限制了免疫治疗的应用。在此，研究者构建了一种基于功能三肽Asp-Phe-Tyr (DFY)的肿瘤蛋白工程系统，该系统可以自动收集和传递靶向细胞的免疫肿瘤蛋白到免疫细胞中。通过酪氨酸酶催化聚合，DFY三肽选择性地聚集在酪氨酸酶高表达的黑色素瘤细胞中。然后将富含醌的中间体与肿瘤特异性蛋白通过Michael加成共价连接，形成携带肿瘤蛋白的微纤维，该微纤维可被抗原提呈细胞吞噬，并表现出肿瘤抗原特性以增强免疫效果。在抗原递呈不足的黑色素瘤细胞中，该系统可以成功地富集和运输含有肿瘤抗原的蛋白质到免疫细胞。此外，在小鼠黑色素瘤的体内研究中，DFY三肽经皮传递抑制肿瘤生长和术后复发。
二、技术路线
聚合肽筛选鉴定——聚合肽DFY作用机制解析——DFY作用下功能蛋白差异性分析——肿瘤蛋白交联pDFY的免疫激活机制解析——肿瘤模型DFY抗癌作用验证
三、实验结果
1. 酪氨酸酶催化聚合DFY。
首先，研究者筛选得到一种可被酪氨酸酶催化聚合的肽DFY（Asp-Phe-Tyr），并观察到在聚合过程中产生了不溶性黑色沉淀物，利用倒置显微镜和扫描电子显微镜（SEM）观察均表明是由DFY聚合成的微纤维（图1b和图1b）。然后，研究者研究了各种细胞系中酪氨酸酶基因（TYR）表达的差异，基于CCLE数据库（https://t.cn/Ev9rmGW）分析了TYR基因在740个细胞系中的表达水平，结果表明，与其他癌细胞分型相比，黑色素瘤细胞系表现出最高的TYR基因表达量（图1e）。此外，研究了酪氨酸酶过表达的黑色素瘤细胞中DFY的胞内聚合反应（图1f），结果表明DFY在黑素瘤细胞中的聚合是酪氨酸酶依赖性的。此外，研究者验证了DFY的聚合是否可以在体内原位诱导。将DFY和不可聚合肽（Asp-Phe-Phe，DFF）注射到小鼠癌旁组织中以观察其在肿瘤中的清除情况。如图1i所示，注射的DFY比DFF在肿瘤位置停留的时间更长，相比之下，大多数DFF在肿瘤中被快速清除了，因此推测DFY能在肿瘤组织中特异性聚合。
2. DFY的胞内蛋白捕获。
研究者通过MTT分析表明，DFY在33μM的浓度下可抑制小鼠B16细胞的增殖达57％（图2e），在与各种B16细胞抑制剂孵育后，发现单苯甲酮（酪氨酸酶抑制剂）和谷胱甘肽（GSH）均可将B16细胞从DFY聚合引起的细胞死亡过程中拯救出来（图2f）。Ac-DEVD-CHO（凋亡抑制剂），ferrostatin-1（促肥大症抑制剂），necrostatin-1（坏死性抑制剂），TBHQ和BHA（醌氧化还原酶诱导剂）却无法挽救DFY对细胞的伤害。得出的结论是，单苯甲酮和谷胱甘肽的解毒作用归因于GSH和DFY之间的迈克尔加成。通过荧光显微镜观察，发现长期培养后，微纤维从细胞中释放出来（图4Sd，e）。实验证明DFY收集靶细胞的胞内蛋白，并以类似于坏死的方式将它们转运出细胞，并伴随DFY聚合诱导的细胞死亡。因此，由pDFY携带的肿瘤蛋白的释放可能刺激随后的抗原触发的免疫反应。
3. 交联蛋白的蛋白质组学研究。
由于蛋白质的免疫原性因蛋白质而异，研究者研究了通过抗原工程系统收集的蛋白质类型，与金开瑞合作的串联质谱用于定量分析蛋白质含量。如图3a，b和S5所示，在DFY聚合后，确定了190个上调蛋白和346个下调蛋白（倍数变化1.5和P <0.05，超几何测试）。然后通过GO数据库富集分析了这些差异蛋白的功能。结果表明，这些蛋白质大多数与细胞代谢（氨基酸代谢，糖代谢），能量供应（糖酵解，有氧呼吸）和蛋白质合成（核糖体）相关（图3c）。发现这些蛋白质在功能上涵盖了细胞最重要的生物学功能（图3d）。差异蛋白主要来自核糖体，线粒体，细胞核和高尔基体。此外，通过STRING功能蛋白缔合网络研究了DFY聚合后减少的蛋白质之间的相互作用（图3e）。来自细胞器的蛋白质，特别是核糖体，线粒体和细胞核中的蛋白质，形成紧密的簇。该结果表明DFY可以特异性地交联来自这些细胞器的蛋白质，从而导致这些蛋白质的显着减少。另外，作为专业的产生黑色素的细胞器，还分析了在DFY处理的黑色素瘤细胞中黑色素体的蛋白质表达（图S5）。GO富集分析的结果表明，用DFY处理后，黑素体中的大多数相关蛋白也被下调。使用主成分分析（PCA）分析了Cys含量，理论等电点和差异蛋白质脂肪族指数三个指标（图3f），该结果表明被下调的蛋白质可以被DFY结构结合或化学交联。从实验上观察到，DFY处理可抑制线粒体功能，抑制蛋白质合成并损害细胞骨架形成（图S6）。这些实验结果与理论推测吻合良好。
4. 肿瘤蛋白交联pDFY的免疫激活。
为了研究B16细胞释放的纤维是否可以被APC吞噬，通过共聚焦荧光显微镜和流式细胞术检查了B16和APC（RAW264.7和DC）对DFY或pDFY的摄取（图4a，b）。荧光成像表明DFY在各种细胞中积累，但pDFY倾向于被APC吞噬。该观察证明，纤维携带的抗原蛋白更倾向于递送至APC。为了阐明pDFY携带的肿瘤蛋白是否能增强免疫反应，用流式细胞仪进一步分析了裂解物蛋白交联的pDFY在DCs成熟中的能力（图4c）。与裂解物组相比，裂解物+ pDFY在DC的成熟度上增加了2.3倍。此外，与裂解物+ pDFY相比，裂解物@pDFY诱导的DC成熟也更为显着（P = 0.0002）。然后将B16蛋白交联的经pDFY处理的B16细胞和脾细胞以1:10的比例共孵育，以研究智能抗原工程系统引发针对癌细胞的特异性免疫反应的能力（图4d），研究发现经裂解物@pDFY处理的脾细胞消除了59.3％的B16细胞。相反，裂解物或裂解物+ pDFY处理的脾细胞的混合物仅杀死了不到30％的B16细胞。携带肿瘤抗原蛋白的裂解物@ pDFY成功触发了针对B16细胞的特异性免疫杀伤。在此基础上，考虑到pDFY的佐剂作用和交联蛋白的强免疫原性，抗原工程系统可作为黑色素瘤治疗的免疫增强疫苗型材料。最后，经B16荷瘤小鼠皮下药物注射研究，证明了由于某些功能蛋白被裂解物@ pDFY富集，裂解物@ pDFY可以成功激活体内抗癌免疫反应。
5. DFY在不可切除黑色素瘤中的抗癌作用。
随后，研究者对抗原工程系统的肿瘤抑制能力进行了分析。抗PD1抗体（aPD1）或化学治疗药物已与基于DFY的抗原工程系统结合用于治疗B16荷瘤小鼠（图5a）实验结果表明DFY + aPD1的治疗抑制了91％的肿瘤生长。研究者还记录了各种治疗后小鼠的存活率（图5c）。在所有组中，用DFY + aPD1处理的小鼠的存活时间最长。该结果表明，肿瘤周围注射DFY不仅可以收集可能含有肿瘤抗原的肿瘤蛋白，而且可以将免疫原性肿瘤蛋白递送至APC并引起随后的CTL激活以抑制肿瘤进展。酶联免疫吸附试验（ELISA）显示，DFY + aPD1处理后，包括干扰素γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）在内的免疫激活标记物增加（图5f）。
6. DFY经皮给药治疗黑色素瘤。
研究者将凝胶状的DFY @ gel作为一种透皮治疗系统，粘附在皮肤上时释放DFY。如图6g所示，在相同深度下，用DFY @ gel治疗的肿瘤的平均荧光强度（MFI）高于DFY。使用V-C扩散池和荧光光谱仪研究了分离的猪皮中DFY @ gel的透皮吸收。与游离DFY相比，DFY @ gel的透皮渗透提高了1.5倍（图6h）。然后通过测量肿瘤体积评估DFY @ gel抑制肿瘤生长的能力（图6i）。在为期16天的实验中，DFY @ gel显示出与DFY（腹膜内注射）相似的治疗效果。IFN-α在临床上用于术后黑色素瘤的治疗。与临床方案相比，评估了DFY @ gel的治疗效果。IFN-α和经皮凝胶治疗均显着抑制了肿瘤的复发。该结果表明透皮DFY @ gel在预防黑素瘤复发方面具有与临床上使用的IFN-α几乎相同的治疗效果。
四、小结
在这项研究中，研究者设计了一种基于肽的肿瘤蛋白工程系统，该系统对黑素瘤治疗表现出强大的免疫原性。一旦进入恶性黑色素瘤细胞，该三肽进行酪氨酸酶催化的氧化聚合。同时，通过迈克尔加成反应还捕获了来自细胞核，线粒体和核糖体的高免疫原性功能蛋白，这引起了类似于坏死的快速细胞死亡。随后，肿瘤蛋白交联的pDFY从垂死和破裂的癌细胞中释放出来，形成的聚集纤维更易于被APC内吞。因此，设计的肿瘤蛋白质工程系统成功地收集了免疫原性蛋白质并将其递送至APC，并表现出辅助作用以增强免疫应答以消除肿瘤。DFY的经皮免疫疗法在小鼠和小型猪模型中也显示出高效率和高生物相容性，并显着延长了肿瘤小鼠的存活时间。在可切除的黑色素瘤中，发现DFY@gel具有与临床IFN-α治疗相似的复发预防效果。
了解金开瑞iTRAQ定量蛋白质组学技术：https://t.cn/A6V4xP7Y
下周是车展周。
今年我们会看到智能电动汽车的又一次飞跃，激光雷达、L3 级别辅助驾驶、近千公里工况续航...我们即将推开下一个时代的大门。
成为新技术载体的，是各家新老车企的下一代车型，特斯拉、蔚来、小鹏、岚图、智己、上汽 R，甚至宝马、福特等等，都将在下周带来它们面向下一个十年的作品。
而在其中，有一个老面孔，似乎没有掀起它在汽油车世界那般的波澜。
我说的是奔驰，和它的全新电动旗舰 EQS。
从 2019 年法兰克福车展 Vision EQS「横空出世」以来，这款奔驰 EVA 平台首作花了超过 18 个月，才正式从幕后走向台前。
欧洲充电服务商 Ionity 已经曝光了 EQS 的销售海报，或将在今年 8 月于欧洲开启销售，预计将于今年底到 2022 年初开启交付。
和宝马的 iX，以及奥迪 E-Tron GT/Q4 E-Tron一起，BBA 的真·纯电平台首作都会在今年登场。经历了 EQC、i3、E-Tron 的折戟之后，德国人正准备着新的一轮攻势。
然而，EQS 是否具有与 2021 智能电动趋势匹配的产品力？看上去悠然自得的奔驰，真的可以挥出致命一击，拿到席位吗？
我们今天来聊聊汽车发明者，如何应对电动新纪元。
姗姗来迟的新平台
上周，奔驰公布了 EQS 的 WLTP 工况续航——770 公里。
这个成绩换算成国内使用的 NEDC 工况接近 850 公里，对于一辆 2021 年发布的电动轿车来说非常不错。考虑到 EQS 目前已知最大电池容量为 108kWh，全新 EVA 平台的能耗控制，甚至比蔚来 ET7 更好。
MEA，Modular Electric Architecture，这个早在 2019 年就和EQC 一起推出的新能源专用平台，到 EQS 的 EVA 这里已经多次「升级」。
长使英雄泪满襟的 EQC，本质上由 GLC 魔改而来，因此当时 MEA 的内核，其实更像是 MHA（GLC 所用平台）电动版——类似的还有与 V 级同平台的 EQV。
初代 MEA 还有氢燃料电池版本——奔驰 GLC F-Cell 版，但最后只生产了数百辆，最终奔驰彻底放弃了氢燃料路线。
到了去年发布的 EQA 和 EQB，其内核仍然与 GLA 使用的 MFA （Modular Front Architecture）非常相似，甚至奔驰官方都大方承认两者「基于同平台研发」。
到了 EQS，奔驰终于迎来根正苗红的纯电平台 EVA——比隔壁大众的 MEB 平台晚了一年，和「竞争队友」宝马的 iX 一样起大早赶晚集。
全新的 EVA 平台使用了如今纯电平台常用的设计：前后电机+中置电池，并且轴距和电池容量灵活可调——全新的 EQE 也将和 EQS 一样，基于 EVA 平台打造。
根据奔驰的官方图片，EVA 平台使用的是方形电池，最大容量为 12 个模组一共 107.8kWh。据 Caranddriver.com 报道，这是块 NCM811 电池。
这也让 EQS 成为特斯拉 Model S、蔚来 ET7 和 Lucid Air 之后，又一辆电池容量超越 100kWh 的纯电轿车。
400V/107.8kWh（低配版或为 90kWh）电池系统加持下，EQS 跑出了 WLTP 770 公里（479 英里）的成绩，百公里工况能耗约为 14kWh。
长续航成绩不仅来源于大电池，低至 0.20 的风阻设计也功不可没。
相比之下，电池容量 80.9kWh 的小鹏 P7 后驱超长续航智享版，WLTP 模式满电表显续航 570 公里，工况能耗约为 14.2kWh，而 P7 的风阻约为 0.236。
不惜成本的新旗舰
如果说 GLC 是出师不利，到了 EQS 上，奔驰很明显想找回「奔驰」应有的地位，首先从 EQS 专属的「MBUX Hyperscreen」就能看出。
新奔驰 S 级使用了 12.8 寸，分辨率 1888x1728 的 OLED 显示屏，这块屏幕也已经成为了 2021 年高端智能电动汽车的标配。到了 EQS 上，奔驰希望玩票更大的。
56 英寸，这当然不是屏幕尺寸，这是 MBUX Hyperscreen 一体化曲面玻璃面板的尺寸，还是抗反射硅酸铝玻璃。
这块定制面板后面，分别是 17.7 英寸的定制不规则中控屏和 12.3 英寸仪表盘+副驾娱乐屏。
和其他屏幕使用供应链公版方案不一样，这块 17.7 寸不规则屏幕是奔驰为 EQS 定制的——不仅看上去贵气逼人，驱动这套 Hyperscreen 的计算方案同样朱门绣户。
去年的「硬核时间」栏目中我们聊到过，2018 年 A 级搭载的 MBUX 计算芯片，是标准版的英伟达 Drive PX2，两个英伟达自研核心，4 个 ARM A57 核心，256 个 GPU 核心，配备 8GB 的运行内存。
到了 2020 年，奔驰将新一代 S 级的计算性能推上了新高峰配备了 PC 级别的「16GB 运行内存+320GB SSD」。
如今 EQS 上面，奔驰堆砌出了堪称「疯狂」的 24GB 运行内存，已经超越绝大多数人的电脑运行内存，奔驰的「Zero Layer」零表层UI看来挺吃硬件的。
前两天这套不惜成本内饰的实拍图曝光，质感和科技感都挺不错：
除了 Hyperscreen，奔驰的三电也「终于」跟上了时代。
上文提到的 107.8kWh 电池自然是惊喜，除此以外，EQS 还将支持 200+kW 的直流快充。根据 wardsauto.com 的报道，EQS 可以在 15 分钟内补充 186 英里（299 公里）的表显续航。
至于电机，预计 EQS 90kWh 低配版本会提供单电机版本，107.8kWh 版本则会配备双电机。多家外媒爆出的参数都是一样的：后驱低配版EQS400 功率为 245kW，四驱高配版 EQS580 4Matic 功率则是 385kW。
站在十字路口的巨人
如果定价不那么奢华的话，我们能从 EQS 上看到奔驰的诚意——但这并不代表有了 EQS，奔驰就迈进了新时代的大门。
上文提到，EQS 和 EQE 将会成为新一代 EVA 平台的首批作品。但这也意味着，已经登场的 EQA/EQB/EQC/EQV，将在很长一段时间内保持现有竞争力。
而它们并没有跟上 2021 年该有的智能电动趋势——600+ 公里级别的续航，L2+ 甚至 L3 辅助驾驶功能，FOTA，5G...主流豪华车市场电动智能化的号角已经吹起，但奔驰却明晃晃地掉队了。
甚至于，EQS 作为旗舰本身，也依然带给我们顾虑。
当老对手宝马已经抢下 Mobileye EyeQ5 芯片的首发，奥迪成为大众集团 Car.Software 部门核心的时候，奔驰的自动驾驶热度似乎与「奔驰」本身并不匹配。
即使抛开辅助驾驶，奔驰为 EQS 配备的全新三电系统，也没有汽油车世界里 S 级曾经的统治力。
蔚来 ET7 可以选 150kWh 电池，NEDC 续航破千公里；而特斯拉 Model S Plaid+ 只用一块 100kWh 电池就达到了 840 公里 EPA 工况续航。
更何况这两款车型，性能、智能、自动驾驶都比 EQS 更具「诱惑」，而 EQS 甚至可能更晚交付——曾经在汽油豪华车市场独孤求败的奔驰，如今却成为了纯电豪华车市场的追赶者。
奔驰有一个「Ambition 2039」计划，目标是 2030 年，戴姆勒旗下 PHEV 和 BEV 车型销售量将占总销量的 50%，到 2039 年，计划停止内燃机车型的销售。
推动汽油车向电动车转变，这很好。但电动汽车的核心卖点并不是电动，奔驰已经明白这一点了吗？
过去两年推出了 4 款纯电车型，却没有任何一款排在任何一个国家纯电年度销量前列，奔驰也许走在 2039 计划的路上，但似乎没有走在智能电动的趋势上。
EQS 开了个好头，但 EQA/B/C/V 的「拉胯」也有目共睹。未来与现在的十字路口，奔驰会如何选择？EQS 最终能打过 Model S 和 ET7 吗？
也许一周之后，我们就知道了。
原创 毓肥 电动星球News
今年我们会看到智能电动汽车的又一次飞跃，激光雷达、L3 级别辅助驾驶、近千公里工况续航...我们即将推开下一个时代的大门。
成为新技术载体的，是各家新老车企的下一代车型，特斯拉、蔚来、小鹏、岚图、智己、上汽 R，甚至宝马、福特等等，都将在下周带来它们面向下一个十年的作品。
而在其中，有一个老面孔，似乎没有掀起它在汽油车世界那般的波澜。
我说的是奔驰，和它的全新电动旗舰 EQS。
从 2019 年法兰克福车展 Vision EQS「横空出世」以来，这款奔驰 EVA 平台首作花了超过 18 个月，才正式从幕后走向台前。
欧洲充电服务商 Ionity 已经曝光了 EQS 的销售海报，或将在今年 8 月于欧洲开启销售，预计将于今年底到 2022 年初开启交付。
和宝马的 iX，以及奥迪 E-Tron GT/Q4 E-Tron一起，BBA 的真·纯电平台首作都会在今年登场。经历了 EQC、i3、E-Tron 的折戟之后，德国人正准备着新的一轮攻势。
然而，EQS 是否具有与 2021 智能电动趋势匹配的产品力？看上去悠然自得的奔驰，真的可以挥出致命一击，拿到席位吗？
我们今天来聊聊汽车发明者，如何应对电动新纪元。
姗姗来迟的新平台
上周，奔驰公布了 EQS 的 WLTP 工况续航——770 公里。
这个成绩换算成国内使用的 NEDC 工况接近 850 公里，对于一辆 2021 年发布的电动轿车来说非常不错。考虑到 EQS 目前已知最大电池容量为 108kWh，全新 EVA 平台的能耗控制，甚至比蔚来 ET7 更好。
MEA，Modular Electric Architecture，这个早在 2019 年就和EQC 一起推出的新能源专用平台，到 EQS 的 EVA 这里已经多次「升级」。
长使英雄泪满襟的 EQC，本质上由 GLC 魔改而来，因此当时 MEA 的内核，其实更像是 MHA（GLC 所用平台）电动版——类似的还有与 V 级同平台的 EQV。
初代 MEA 还有氢燃料电池版本——奔驰 GLC F-Cell 版，但最后只生产了数百辆，最终奔驰彻底放弃了氢燃料路线。
到了去年发布的 EQA 和 EQB，其内核仍然与 GLA 使用的 MFA （Modular Front Architecture）非常相似，甚至奔驰官方都大方承认两者「基于同平台研发」。
到了 EQS，奔驰终于迎来根正苗红的纯电平台 EVA——比隔壁大众的 MEB 平台晚了一年，和「竞争队友」宝马的 iX 一样起大早赶晚集。
全新的 EVA 平台使用了如今纯电平台常用的设计：前后电机+中置电池，并且轴距和电池容量灵活可调——全新的 EQE 也将和 EQS 一样，基于 EVA 平台打造。
根据奔驰的官方图片，EVA 平台使用的是方形电池，最大容量为 12 个模组一共 107.8kWh。据 Caranddriver.com 报道，这是块 NCM811 电池。
这也让 EQS 成为特斯拉 Model S、蔚来 ET7 和 Lucid Air 之后，又一辆电池容量超越 100kWh 的纯电轿车。
400V/107.8kWh（低配版或为 90kWh）电池系统加持下，EQS 跑出了 WLTP 770 公里（479 英里）的成绩，百公里工况能耗约为 14kWh。
长续航成绩不仅来源于大电池，低至 0.20 的风阻设计也功不可没。
相比之下，电池容量 80.9kWh 的小鹏 P7 后驱超长续航智享版，WLTP 模式满电表显续航 570 公里，工况能耗约为 14.2kWh，而 P7 的风阻约为 0.236。
不惜成本的新旗舰
如果说 GLC 是出师不利，到了 EQS 上，奔驰很明显想找回「奔驰」应有的地位，首先从 EQS 专属的「MBUX Hyperscreen」就能看出。
新奔驰 S 级使用了 12.8 寸，分辨率 1888x1728 的 OLED 显示屏，这块屏幕也已经成为了 2021 年高端智能电动汽车的标配。到了 EQS 上，奔驰希望玩票更大的。
56 英寸，这当然不是屏幕尺寸，这是 MBUX Hyperscreen 一体化曲面玻璃面板的尺寸，还是抗反射硅酸铝玻璃。
这块定制面板后面，分别是 17.7 英寸的定制不规则中控屏和 12.3 英寸仪表盘+副驾娱乐屏。
和其他屏幕使用供应链公版方案不一样，这块 17.7 寸不规则屏幕是奔驰为 EQS 定制的——不仅看上去贵气逼人，驱动这套 Hyperscreen 的计算方案同样朱门绣户。
去年的「硬核时间」栏目中我们聊到过，2018 年 A 级搭载的 MBUX 计算芯片，是标准版的英伟达 Drive PX2，两个英伟达自研核心，4 个 ARM A57 核心，256 个 GPU 核心，配备 8GB 的运行内存。
到了 2020 年，奔驰将新一代 S 级的计算性能推上了新高峰配备了 PC 级别的「16GB 运行内存+320GB SSD」。
如今 EQS 上面，奔驰堆砌出了堪称「疯狂」的 24GB 运行内存，已经超越绝大多数人的电脑运行内存，奔驰的「Zero Layer」零表层UI看来挺吃硬件的。
前两天这套不惜成本内饰的实拍图曝光，质感和科技感都挺不错：
除了 Hyperscreen，奔驰的三电也「终于」跟上了时代。
上文提到的 107.8kWh 电池自然是惊喜，除此以外，EQS 还将支持 200+kW 的直流快充。根据 wardsauto.com 的报道，EQS 可以在 15 分钟内补充 186 英里（299 公里）的表显续航。
至于电机，预计 EQS 90kWh 低配版本会提供单电机版本，107.8kWh 版本则会配备双电机。多家外媒爆出的参数都是一样的：后驱低配版EQS400 功率为 245kW，四驱高配版 EQS580 4Matic 功率则是 385kW。
站在十字路口的巨人
如果定价不那么奢华的话，我们能从 EQS 上看到奔驰的诚意——但这并不代表有了 EQS，奔驰就迈进了新时代的大门。
上文提到，EQS 和 EQE 将会成为新一代 EVA 平台的首批作品。但这也意味着，已经登场的 EQA/EQB/EQC/EQV，将在很长一段时间内保持现有竞争力。
而它们并没有跟上 2021 年该有的智能电动趋势——600+ 公里级别的续航，L2+ 甚至 L3 辅助驾驶功能，FOTA，5G...主流豪华车市场电动智能化的号角已经吹起，但奔驰却明晃晃地掉队了。
甚至于，EQS 作为旗舰本身，也依然带给我们顾虑。
当老对手宝马已经抢下 Mobileye EyeQ5 芯片的首发，奥迪成为大众集团 Car.Software 部门核心的时候，奔驰的自动驾驶热度似乎与「奔驰」本身并不匹配。
即使抛开辅助驾驶，奔驰为 EQS 配备的全新三电系统，也没有汽油车世界里 S 级曾经的统治力。
蔚来 ET7 可以选 150kWh 电池，NEDC 续航破千公里；而特斯拉 Model S Plaid+ 只用一块 100kWh 电池就达到了 840 公里 EPA 工况续航。
更何况这两款车型，性能、智能、自动驾驶都比 EQS 更具「诱惑」，而 EQS 甚至可能更晚交付——曾经在汽油豪华车市场独孤求败的奔驰，如今却成为了纯电豪华车市场的追赶者。
奔驰有一个「Ambition 2039」计划，目标是 2030 年，戴姆勒旗下 PHEV 和 BEV 车型销售量将占总销量的 50%，到 2039 年，计划停止内燃机车型的销售。
推动汽油车向电动车转变，这很好。但电动汽车的核心卖点并不是电动，奔驰已经明白这一点了吗？
过去两年推出了 4 款纯电车型，却没有任何一款排在任何一个国家纯电年度销量前列，奔驰也许走在 2039 计划的路上，但似乎没有走在智能电动的趋势上。
EQS 开了个好头，但 EQA/B/C/V 的「拉胯」也有目共睹。未来与现在的十字路口，奔驰会如何选择？EQS 最终能打过 Model S 和 ET7 吗？
也许一周之后，我们就知道了。
原创 毓肥 电动星球News
https://t.cn/R2WJCVK 我的评分：[星星][星星][星星][星星][半星]
为了这家日料店值得专门去一转北京路
很久没有在广州吃寿司了，不知道从什么时候开始，所有寿司店仿佛约好了一样，价格蹭蹭地往上飙升，去便宜的店吧不正宗不好吃。之前比较常去的是半藏，但是缺点也非常明显，品类太少了，吃过两次就不知道可以吃啥了。
后来发现了光明广场负一层的雲鹤日本料理，发现他们家的寿司刺身那些性价比都挺高，和老板闲聊了几句，说9楼还有个分店，定位相对高端一点。今天突然又想吃寿司了，于是就来到9楼探一下店，看看对比负一层是怎么个高端法，跟着会长走起～
[环境｜高端大气]
光明广场感觉已经挺破旧了，上到9楼零零星星只有几家店，在这样的商场环境下真的有高端日料吗？来到雲鹤门前马上就打消了会长的疑虑，餐厅自动门一打开，迎面就是宽敞的大厅，这么大的环境只放了一个长长的寿司吧台，真是豪气！
店里的装修时典型的暗色系日式风格，墙上的是仿真石瓷砖，要不是会长手多敲一下都不知道是仿真的，虽然不是真的石头，但是看起来非常高级。会长瞄了几眼，除了吧台大厅左右各有一个小厅是包间和四人座，整个店还蛮大的。唯一的问题是餐厅了没有自己的卫生间，虽然到外面商场的共用，这个有点不太方便。
[服务｜标准水平]
虽然是日料店，但是除了厨师身穿日式厨师傅，服务员都是中式制服，这个让会长有点出戏。下座后只是倒了茶，日料店标配的湿毛巾欠奉，这个有点扣分了。[呵呵]
下单的时候服务员介绍了当天的飞机货和推荐菜式，会长最爱吃活北极贝刺身就要了一份，结果上个厕所回来就得到消息说卖光了。这个服务员和厨房必须沟通清楚了，让人失望的感觉很影响就餐情绪呢。
不过因为坐在吧台，除了可以看到师傅制作寿司过程，还能偶尔和师傅交谈一下，交代菜式想要的做法，甚至看到隔壁桌点的菜式有兴趣的话，也可以即时让厨师给我们加一份，这个过程还是令人愉悦的。
[口味｜超出预期]
由于之前光顾过负一层的分店，会长自然会拿来做比较。相对负一层分店，9楼的店菜式种类要多一点，制作和做法也高级一点，师傅应该是同一批的（因为会长认出了当中一位师傅是之前负一层分店帮我们做寿司的），但是食材和出品都要更胜一筹。
1️⃣青龙寿司拼盘：这是最贵的寿司拼盘，398元有13贯，蓝鳍吞拿鱼的大腩、中腩、赤身都包含在内，还有池鱼王、赤贝、海胆寿司等等，光看名字就知道高级，放别家店价格起码500+。里面最有趣的是生蚝寿司，话说会长也是第一次吃，以前吃生蚝刺身比较多，没想到口感比想象中好。
2️⃣汁煮安康鱼肝：会长在日本吃过几次，对比下来他们家绝对跟得上日本的味道，师傅会撒一些橘子皮屑上去，这个是日本那边的普遍做法，不但劈去鱼肝原有的腥味，还能突出鲜味，但是在广州的其他日料店没见过，这一点必须为师傅点赞！[强]
3️⃣星鳗天妇罗：可以说是会长今晚最爱的菜品！星鳗非常新鲜，一点都没有腥味，炸得金黄酥脆，非常好吃！[色]
4️⃣池鱼王刺身：师傅应会长的要求做成薄切，个人觉得薄切的口感跟清爽，也更能尝到鱼肉的鲜甜。
5️⃣鳕鱼白子刺身：这个上次在负一层的分店也有吃，味道都差不多，就是9楼的摆盘高级好看一些，哈哈。
6️⃣鲜活赤贝刺身：因为吃不到活北极贝刺身，只能来个赤贝刺身解一下馋。
7️⃣什锦海鲜丼：因为还没吃饱而叫的主食（会长真是非常能吃），没什么特别，不过寿司饭煮得蛮对会长胃口的。
8️⃣大虾味增汤：吃海鲜丼必配味增汤啊，而且才12块一碗，超便宜！
9️⃣柔煮八爪鱼刺身：这是会长看到隔壁桌点的，师傅在我们面前拿出来细心切开，看起非常有食欲，哪怕已经吃饱了，还是忍不住加一份，结果非常不错，其实会长在日本吃怀石料理的时候有吃过，当时是作为前菜的，这家店做的味道和日本的也差不多，棒！
[总结｜4.5颗星⭐️⭐️⭐️⭐️]
进去前的猜想：中规中矩的日料寿司店
进去后的感想：北京路商圈最好的日料店
性价比：虽然会长吃得太多，最后结账1200+，2个人算下来人均600+，但是点的几乎都是最贵的菜品，对比其他日料店其实价格不算高，这里还算可以了，虽然没有第一次在负一楼感觉那么好，最后没有上的菜也收了钱（我自己埋单的时候没有认真看），但还是可以再来的。
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为了这家日料店值得专门去一转北京路
很久没有在广州吃寿司了，不知道从什么时候开始，所有寿司店仿佛约好了一样，价格蹭蹭地往上飙升，去便宜的店吧不正宗不好吃。之前比较常去的是半藏，但是缺点也非常明显，品类太少了，吃过两次就不知道可以吃啥了。
后来发现了光明广场负一层的雲鹤日本料理，发现他们家的寿司刺身那些性价比都挺高，和老板闲聊了几句，说9楼还有个分店，定位相对高端一点。今天突然又想吃寿司了，于是就来到9楼探一下店，看看对比负一层是怎么个高端法，跟着会长走起～
[环境｜高端大气]
光明广场感觉已经挺破旧了，上到9楼零零星星只有几家店，在这样的商场环境下真的有高端日料吗？来到雲鹤门前马上就打消了会长的疑虑，餐厅自动门一打开，迎面就是宽敞的大厅，这么大的环境只放了一个长长的寿司吧台，真是豪气！
店里的装修时典型的暗色系日式风格，墙上的是仿真石瓷砖，要不是会长手多敲一下都不知道是仿真的，虽然不是真的石头，但是看起来非常高级。会长瞄了几眼，除了吧台大厅左右各有一个小厅是包间和四人座，整个店还蛮大的。唯一的问题是餐厅了没有自己的卫生间，虽然到外面商场的共用，这个有点不太方便。
[服务｜标准水平]
虽然是日料店，但是除了厨师身穿日式厨师傅，服务员都是中式制服，这个让会长有点出戏。下座后只是倒了茶，日料店标配的湿毛巾欠奉，这个有点扣分了。[呵呵]
下单的时候服务员介绍了当天的飞机货和推荐菜式，会长最爱吃活北极贝刺身就要了一份，结果上个厕所回来就得到消息说卖光了。这个服务员和厨房必须沟通清楚了，让人失望的感觉很影响就餐情绪呢。
不过因为坐在吧台，除了可以看到师傅制作寿司过程，还能偶尔和师傅交谈一下，交代菜式想要的做法，甚至看到隔壁桌点的菜式有兴趣的话，也可以即时让厨师给我们加一份，这个过程还是令人愉悦的。
[口味｜超出预期]
由于之前光顾过负一层的分店，会长自然会拿来做比较。相对负一层分店，9楼的店菜式种类要多一点，制作和做法也高级一点，师傅应该是同一批的（因为会长认出了当中一位师傅是之前负一层分店帮我们做寿司的），但是食材和出品都要更胜一筹。
1️⃣青龙寿司拼盘：这是最贵的寿司拼盘，398元有13贯，蓝鳍吞拿鱼的大腩、中腩、赤身都包含在内，还有池鱼王、赤贝、海胆寿司等等，光看名字就知道高级，放别家店价格起码500+。里面最有趣的是生蚝寿司，话说会长也是第一次吃，以前吃生蚝刺身比较多，没想到口感比想象中好。
2️⃣汁煮安康鱼肝：会长在日本吃过几次，对比下来他们家绝对跟得上日本的味道，师傅会撒一些橘子皮屑上去，这个是日本那边的普遍做法，不但劈去鱼肝原有的腥味，还能突出鲜味，但是在广州的其他日料店没见过，这一点必须为师傅点赞！[强]
3️⃣星鳗天妇罗：可以说是会长今晚最爱的菜品！星鳗非常新鲜，一点都没有腥味，炸得金黄酥脆，非常好吃！[色]
4️⃣池鱼王刺身：师傅应会长的要求做成薄切，个人觉得薄切的口感跟清爽，也更能尝到鱼肉的鲜甜。
5️⃣鳕鱼白子刺身：这个上次在负一层的分店也有吃，味道都差不多，就是9楼的摆盘高级好看一些，哈哈。
6️⃣鲜活赤贝刺身：因为吃不到活北极贝刺身，只能来个赤贝刺身解一下馋。
7️⃣什锦海鲜丼：因为还没吃饱而叫的主食（会长真是非常能吃），没什么特别，不过寿司饭煮得蛮对会长胃口的。
8️⃣大虾味增汤：吃海鲜丼必配味增汤啊，而且才12块一碗，超便宜！
9️⃣柔煮八爪鱼刺身：这是会长看到隔壁桌点的，师傅在我们面前拿出来细心切开，看起非常有食欲，哪怕已经吃饱了，还是忍不住加一份，结果非常不错，其实会长在日本吃怀石料理的时候有吃过，当时是作为前菜的，这家店做的味道和日本的也差不多，棒！
[总结｜4.5颗星⭐️⭐️⭐️⭐️]
进去前的猜想：中规中矩的日料寿司店
进去后的感想：北京路商圈最好的日料店
性价比：虽然会长吃得太多，最后结账1200+，2个人算下来人均600+，但是点的几乎都是最贵的菜品，对比其他日料店其实价格不算高，这里还算可以了，虽然没有第一次在负一楼感觉那么好，最后没有上的菜也收了钱（我自己埋单的时候没有认真看），但还是可以再来的。
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