#慕梓的电子日记簿[超话]#
D44 12. 12周日
给p3小鼠洗笼子,换垫料
给所有小鼠加水
提取DNA第二天。提取基因型说明书见p1p2.
主要是离心机的使用......
PCR
把程序p4设置好后就可以去制胶准备跑琼脂糖凝胶电泳了
20μL的反应体系,配方见p3
琼脂糖凝胶电泳
①制胶
1.5%的琼脂糖-1×TAE溶液,
微波炉高热-2min,加热1min后拿出来摇一下,然后每20s(沸腾起来)摇一下
加核酸染料,100mL的溶液加10μL核酸染料。⚠️枪头伸进液面以下加,节省资源[单身狗]
摇匀,直到核酸染料完全染匀
插梳子
从梳子的另一侧把溶液缓缓倒进去,如果有气泡,赶走它
等它凝固,30min以上,等PCR跑完就可以了
②电泳
电泳槽里加1×TAE,把胶放进去,胶板背面那些脏东西丢掉,电泳液要没过胶的表面。⚠️注意胶的方向,DNA都是从负极往正极跑,所以有孔的那一面放在近负极端。
加样 先加marker!可以有效检查胶有没有什么问题,以免浪费样品
合上盖子,注意为防止短路,把电源接触的地方擦干。
正负极一定不要接反
开机子,120V以上,140左右,正计时,一般半个小时左右就可以了,只要条带能跑出来,跑到胶的一半就行
③看结果
同时开第一和第二个紫外灯
一般把上样的那边放在近门口的一边
今天的结果见p5p6
最下面那四个是我的小鼠的,最后一个的第一对引物没跑出来,即缺失
D44 12. 12周日
给p3小鼠洗笼子,换垫料
给所有小鼠加水
提取DNA第二天。提取基因型说明书见p1p2.
主要是离心机的使用......
PCR
把程序p4设置好后就可以去制胶准备跑琼脂糖凝胶电泳了
20μL的反应体系,配方见p3
琼脂糖凝胶电泳
①制胶
1.5%的琼脂糖-1×TAE溶液,
微波炉高热-2min,加热1min后拿出来摇一下,然后每20s(沸腾起来)摇一下
加核酸染料,100mL的溶液加10μL核酸染料。⚠️枪头伸进液面以下加,节省资源[单身狗]
摇匀,直到核酸染料完全染匀
插梳子
从梳子的另一侧把溶液缓缓倒进去,如果有气泡,赶走它
等它凝固,30min以上,等PCR跑完就可以了
②电泳
电泳槽里加1×TAE,把胶放进去,胶板背面那些脏东西丢掉,电泳液要没过胶的表面。⚠️注意胶的方向,DNA都是从负极往正极跑,所以有孔的那一面放在近负极端。
加样 先加marker!可以有效检查胶有没有什么问题,以免浪费样品
合上盖子,注意为防止短路,把电源接触的地方擦干。
正负极一定不要接反
开机子,120V以上,140左右,正计时,一般半个小时左右就可以了,只要条带能跑出来,跑到胶的一半就行
③看结果
同时开第一和第二个紫外灯
一般把上样的那边放在近门口的一边
今天的结果见p5p6
最下面那四个是我的小鼠的,最后一个的第一对引物没跑出来,即缺失
#慕梓的电子日记簿[超话]#
D38. (✧∇✧)11. 24
1⃣️细胞实验 解冻 传代
拿钥匙,去-80℃冰库拿细胞,然后直接放室温,进细胞室做,还是SW1353细胞
给另一罐细胞,C28 用的是DMEM-F12培养基传代
2⃣️制胶
今天是纯纯地由我来啦~开熏[鼓掌]
▸先取出架子,从2楼拿玻璃板,10%SDS
把玻璃板套在架子上,对齐,然后卡上去
▸配胶 4块,12%的,用5mL的×2。共10mL的量
❌好好算吧孩子,可别825mL的还要165×5的加了,直接825加进去不香吗[笑cry][污][笑cry]我要被自己蠢死了[污]丢死人了[污][污][污]
▸灌胶 用1mL的枪头吸,打进去,先打4mL,再把其他的补补
▸等30min
▸制上层胶 一样一样的
然后我就撤了
3⃣️关于管小鼠...
师兄给了我一个本儿,以后就用它来记录各鼠的实验记录了,或者说,这就是的命运簿叭[笑哈哈][偷乐]
斛珠上头啊[awsl][awsl][awsl][awsl]
D38. (✧∇✧)11. 24
1⃣️细胞实验 解冻 传代
拿钥匙,去-80℃冰库拿细胞,然后直接放室温,进细胞室做,还是SW1353细胞
给另一罐细胞,C28 用的是DMEM-F12培养基传代
2⃣️制胶
今天是纯纯地由我来啦~开熏[鼓掌]
▸先取出架子,从2楼拿玻璃板,10%SDS
把玻璃板套在架子上,对齐,然后卡上去
▸配胶 4块,12%的,用5mL的×2。共10mL的量
❌好好算吧孩子,可别825mL的还要165×5的加了,直接825加进去不香吗[笑cry][污][笑cry]我要被自己蠢死了[污]丢死人了[污][污][污]
▸灌胶 用1mL的枪头吸,打进去,先打4mL,再把其他的补补
▸等30min
▸制上层胶 一样一样的
然后我就撤了
3⃣️关于管小鼠...
师兄给了我一个本儿,以后就用它来记录各鼠的实验记录了,或者说,这就是的命运簿叭[笑哈哈][偷乐]
斛珠上头啊[awsl][awsl][awsl][awsl]
#慕梓的电子日记簿[超话]#
D32
1⃣️换脱钙液
在2楼细胞室拿两个5mL枪头,
把四个板子从37℃摇床上拿下来,
把旧液体吸走,然后加2mL新的17%EDTA脱钙液
❌
1.把一个骨头忘切了,还完完整整地放在里面![二哈][二哈][二哈]救大命了大失误[失望][失望]师兄补救的时候说骨头都已经软了不好切了
2.用5mL枪的时候稳一点,慢吸慢打。不然像我今天一样,给冲出去了
3.注意枪的数,本来调好的2mL打着打着变成2.8mL了,再打着打着变成3mL了[污]救命我太愚钝了
摇床的参数的设定
D32
1⃣️换脱钙液
在2楼细胞室拿两个5mL枪头,
把四个板子从37℃摇床上拿下来,
把旧液体吸走,然后加2mL新的17%EDTA脱钙液
❌
1.把一个骨头忘切了,还完完整整地放在里面![二哈][二哈][二哈]救大命了大失误[失望][失望]师兄补救的时候说骨头都已经软了不好切了
2.用5mL枪的时候稳一点,慢吸慢打。不然像我今天一样,给冲出去了
3.注意枪的数,本来调好的2mL打着打着变成2.8mL了,再打着打着变成3mL了[污]救命我太愚钝了
摇床的参数的设定
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