天津印发通知:农贸市场要这样进行新冠病毒环境监测

近日,天津市防控指挥部发布通知,转发国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组《关于印发农贸(集贸)市场新型冠状病毒环境监测技术规范的通知》,要求市防控指挥部各工作组、各成员单位,各区防控指挥部认真参照执行。

关于转发《关于印发农贸(集贸)市场
新型冠状病毒环境监测
技术规范的通知》的通知

市防控指挥部各工作组、各成员单位,各区防控指挥部:

根据市防控指挥部领导同志批示要求,现将国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组《关于印发农贸(集贸)市场新型冠状病毒环境监测技术规范的通知》转发给你们,请认真参照执行。

各区防控指挥部以及市市场监管委、市商务局、市农业农村委、市卫生健康委等部门要切实负起各自责任,加强协同配合,严格按照技术规范进一步明确监测对象和监测内容,改进优化采样方法,做好样本采集,科学规范做好检测工作,确保检测结果真实有效;严格按照《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》相关要求做好实验室生物安全管理;规范填写、及时报送《新型冠状病毒环境检测标本送检表》,做到第一时间发现、第一时间处置、第一时间布防,最大限度降低农贸(集贸)市场疫情传播潜在风险。

市防控指挥部
2020年8月1日

农贸(集贸)市场新型冠状病毒
环境监测技术规范

农贸(集贸)市场是新冠肺炎疫情防控的重点场所,加强对农贸(集贸)市场新冠病毒环境监测,对于深入开展病毒溯源和疫情防控意义重大。为科学规范指导开展农贸(集贸)市场新冠病毒环境监测工作,特制定本技术规范。
一、监测对象
监测重点为具备区域辐射能力的大型农贸(集贸)市场,特别是包括冷冻、冷藏功能的肉类和海鲜水产交易摊位,或者存在潮湿、密闭空间的市场。
二、监测内容
(一)市场内重点摊位的设施、用具表面病毒检测。重点对摊位台面、面板、地面、把手,以及各种制作和使用器具等表面,包括脱毛或切割机械、刀具等,采集拭子样本。
(二)市场内重点摊位从业人员咽拭子、衣物表面、手部病毒检测。对处于工作状态的从业人员手部表面,采集拭子样本。
(三)市场内重点摊位存放食品的冰箱、冷藏柜内部表面病毒检测。对储藏食物过程中经常触及的冰箱、冷藏柜内表面,采集拭子样本。
(四)市场内销售的肉、禽类和海鲜水产类食品的病毒检测。对市场内销售的食品应当按照无包装食品和有包装食品加以区分,其中有包装类食品重点是需要冷藏运输的肉、禽类和海鲜水产类食品,采集拭子样本。
(五)市场内排水系统中污水的病毒检测。重点包括市场内海鲜水产、肉禽类产品摊位来源的污水,采集拭子样本或污水样本。
(六)市场内公共空间中人员接触较多的部位,包括主要进出口的电梯按钮、楼梯扶手、门把手表面,茶水间、卫生间等公用设备设施表面,潮湿的公共通道和卫生间地面、墩布池等采集拭子样本。
(七)市场内经常性跨区域移动的工具或物品,包括垃圾车、垃圾桶、墩布等清洁工具,转运物品的拖车等,采集拭子样本。
(八)市场内工作人员聚集、通风不良的环境,包括办公室、工具间、休息间、局部交易环境等环境拭子及气溶胶样本。
三、样本采样
(一)样本要求。
1.从业人员咽拭子、手部、衣物和其他物体表面拭子样本:要求用病毒采样管中的病毒保存液,充分浸润采样棉签后,对拟采集的手部或物体(包括公共通道的地面)的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对采样对象表面,进行多点分布式采样。
2.食品表面拭子样本:食品样本不可直接进行采集,应当首先将拟采集的食品小心分离,并存放于洁净采样袋后,再进行拭子样本的采集。要求用病毒采样管中的病毒保存液,充分浸润采样棉签后,对拟采集食物样本的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对样本表面,进行多点分布式采样。
3.污水样本:按照市场内排水系统分布情况,选取2-3处污水采样位置,重点为内部管网汇集处、水流方向的下游或与市政管网的连接处。采集拭子样本要求,用采样棉签浸入污水中,使其吸附污水并在采样管中对涮洗3次以上。采集污水样本要求,用聚乙烯塑料瓶收集30-500mL污水水样;大于500mL体积的污水采集可以使用聚乙烯塑料桶或现场水样专用富集设备。同时要满足对污水采样位置,进行多点分布式采样。
4.动物样本:对于活体动物,可分别用采样棉签采集其体表拭子、口咽拭子和肛拭子,也可以采集其排泄物或分泌物样本,并在记录单上进行相应记录。对于以经过剥皮等处理的动物样本,分别用棉签采集其体表和体腔拭子样本,要求用病毒采样管中的病毒保存液,充分浸润采样棉签后,对拟采集食物样本的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对样本表面,进行多点分布式采样。
5.其他器具:笼具或鱼缸等装运、养殖动物的容器,需首先观察或了解该容器具体存放、养殖过的动物类型,采集容器内壁拭子样本或内容物液体样本。
6.人员聚集、通风不良的局部交易区域、办公室、休息间等环境采集气溶胶样本。
(二)采样方法。
1.采样周期:对重点大型集贸市场(特别是销售生鲜类产品的市场)按照1次/周,对其余需要监测的集贸市场按照1次/月的频次进行病毒监测。
2.采样实施:现场采样由两名以上的工作人员参与完成,采样时应当穿戴防护服、防护口罩、鞋套和医用一次性手套。采样过程需开启现场采样视频记录设备。
3.采样装备:病毒采样箱、病毒采样管、气溶胶采集器、样品记录单、手消设备、洁净采样袋、冰袋、高危险生物样本转运箱和生物安全垃圾袋等。
4.采样记录:样本信息应当包括样本采集的采样时间、地点、集贸市场名称、摊位编号、采样类型、样本编号以及采样人等信息。
5.采样操作:采样开始前,要求穿戴防护服、口罩、鞋套和手套等个人防护用品进入采样现场,并使用手消进行手部消毒。拭子样本采样过程中,采样棉签只能接触当前采集的样本,避免触碰到其他物体。污水样本采集前,先充分搅匀,然后取样。污水分三层以上,不能搅匀时,可按各层量的多少的比例分层取样。气溶胶样本采集使用气溶胶采集器,设定采集高度、空气通量和采集时间,进行气溶胶采集,将采集后的吸收液或滤膜放置在特定的低温容器进行转运。采样结束后,清理废弃物后离场。
6.样品转运:采集样品连同采样记录单应当在24小时内运送至当地指定的病毒监测机构进行检测,样本建议冷藏存放于高危险生物样本转运箱中,并由专人、专车进行转运。
四、检测
(一)样本分装和保存。
1.样本分装:标本采集后应当在生物安全二级实验室生物安全柜内分装,但个人防护装备参照生物安全三级实验室的防护要求。所有采集对环境标本应当分装到大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样本采集管里,按照1000ul/管进行分装。容器(采集管)外注明样本编号、种类及采样日期。用于后续核酸提取和病毒分离等实验室检测工作。
2.样本保存:用于病毒分离和核酸检测的标本应当尽快进行检测,能在24小时内检测的标本可置于4℃保存;24小时内无法检测的标本则应当置于-70℃或以下保存(如无-70℃保存条件,则于-20℃冰箱暂存)。
(二)污水水样前期处理。
使用离心技术去除污水中杂质。先打开低温离心机,待温度降至4℃左右,建议4654离心力离心30分钟,取上清。再使用膜吸附技术或超滤技术进行上清液的浓缩。
(三)核酸提取。
新型冠状病毒的常规检测方法是通过实时荧光RT-PCR鉴定。任何新型冠状病毒的检测都必须由经过相关生物安全及技能培训的人员进行操作。对已经灭活的样本,应当在生物安全二级(BSL-2)实验室内,使用自动化核酸提取仪,配套核酸提取试剂盒进行病毒核酸的提取。核酸提取后,应当将核酸产物进行分装,用于后续核酸实时荧光定量(RT-PCR)及深度测序。核酸提取操作参考相关厂家试剂盒说明书开展。
(四)实时荧光定量PCR。
在BSL-2实验室中对所有已提取的核酸样本,应当用经CFDA批准的RT-PCR诊断试剂进行新型冠状病毒核酸检测,以保证实验结果的正确可靠。RT-PCR反应体系和操作参考相关厂家试剂盒说明。每一次RT-PCR反应均应当设置阴性对照、阳性对照和无模板空白对照,以确保扩增体系工作正常。
五、实验室生物安全
实验室安全级别参照最新版《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》的相关内容进行管理。采集的环境样本属于未经培养的感染性材料,在采用可靠的方法灭活前进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分析,以及临床样本的灭活等操作,应当在生物安全二级实验室进行,同时采用生物安全三级实验室的个人防护。环境样本在采用可靠的方法灭活后进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等操作应当在生物安全二级实验室进行。

(来源于“津云”公众号)

南昌国资入主富春环保,林芝腾讯拥抱世纪华通

 一周概览 
上周全国8家企业向发审会提交首发申请,7家通过,其中2家浙江省内企业;6家浙江公司发布并购重组公告;5家浙江公司发布再融资公告。

企业涅槃是上市

1、浙江长华汽车零部件股份有限公司

长华汽车7月31日通过上会审核:公司拟在主板发行股票不超过4,168万股,约募集资金66,700万元。公司地址为浙江省慈溪市周巷镇工业园区,2019年上半年度营业收入6.68亿元、归母净利润7460万元。

主营业务:汽车金属零部件的研发、生产、销售。

资金用途:本次募集资金将按轻重缓急顺序投资于以下项目:(1)汽车冲焊件(武汉)生产基地建设项目;(2)汽车紧固件技术升级改造及扩产项目;(3)补充营运资金项目;(4)研发中心改造升级项目。

主承销商:长城证券

2、浙江海象新材料股份有限公司

浙江海象7月31日通过上会审核:公司拟在中小板发行股票不超过1,834万股,约募集资金61,445万元。公司地址为浙江省宁海市海昌街道海丰路380号3幢,2019年上半年度营业收3.71亿元、归母净利润5633万元。

主营业务:从事PVC地板的研发、生产和销售。

资金用途:本次募集资金将按轻重缓急顺序投资于以下项目:(1)年产2,000万平方米PVC地板生产基地建设项 目;(2)研发中心建设项目;(3)补充流动资金项目。

主承销商:申万宏源

产业涅槃是并购

1、美诺华7月31日公告:

公司拟以支付现金方式收购宁波美诺华控股有限公司持有的宁波高新区美诺华医药创新研究院有限公司100%股权。

医药创新研究院系美诺华控股全资子公司,主要从事技术受托开发、项目孵化、提供公共技术服务等业务。自医药创新研究院创建以来,为公司及子公司提供了部分制剂产品研发服务。

本次交易完成后,医药创新研究院将纳入公司合并报表范围。将有助于增强公司制剂研发实力,提升公司的整体竞争力和未来盈利能力,符合公司“中间体、原料药、制剂一体化”的发展战略。

2、浙江万盛7月31日公告:

公司拟向关联人高献国先生转让控股子公司昇显微电子(苏州)有限公司59%的股权,转让价格为2065万元。

昇显微电子(苏州)有限公司评估基准日总资产账面价值为1,141.94万元,总负债账面价值为2,630.01万元,股东全部权益账面价值为-1,488.07万元,评估价值-1,071.14万元。截至公告日,公司为昇显微电子提供财务资助69,329,344.17元,昇显微电子保证最迟不晚于2020年12月31日前,向万盛股份偿还所有的财务资助本金及其利息。

交易完成后,公司不再持有昇显微电子股权,将导致公司合并报表范围变更。高献国作为昇显微电子的控股股东,将继续督促昇显微电子按照协议的约定偿还债务。

3、富春环保7月30日公告:

通信集团拟以8.80元/股的价格向水天集团转让其持有富春环保的177,242,920股股份,占本公司总股本的19.94%,交易总价1,559,737,696.00元。

收购人水天集团是南昌水投下属的六大业务板块之一,主要涉及直接投资、基金管理、供应链金融等投资类业务,南昌水投作为南昌国资委综合发展平台,主要负担南昌市水利工程建设和城市建设的资本运营和工程建设,并逐步拓展至环保和生态建设。

本次收购有助于上市公司借助国有资本的资源优势和产业优势,抓住江西省产业升级和产业承接的契机,促进公司在江西区域的业务发展,进一步扩大上市公司节能环保主营业务并继续进军危废领域,并推动公司环保业务向全国进行覆盖,对公司未来发展将会产生积极影响。

4、横店东磁7月28日公告:

公司与全资子公司东阳市东磁新能源有限公司将共同持股的会理县东磁矿业有限公司100%的股权转让给四川奇润高科贸易有限公司,转让价格800万元。

东磁矿业经营范围包括矿山机械购销、矿山技术服务。截至2019年12月31日,东磁矿业的资产总额2878.77万元,负债总额8712.76万元,净资产-5833.99万元,2019年度营业收入0万元,净利润-30.53万元(经审计)。

由于目标公司的勘探工作已处于停滞状态,经营亦出现亏损,转让股权后可减少公司亏损,有利于公司集中精力做优做强主营业务,促进公司可持续发展,符合公司和全体股东利益。

5、世纪华通7月27日公告称:

林芝腾讯通过大宗交易增持公司1792万股,占总股本0.24%。

世纪华通2011年7月在深交所上市,是国内A股市场上规模最大的游戏公司之一,主营业务为互联网游戏和汽车零部件,旗下产业包括天游、七酷、点点互动、盛趣游戏、世纪华通车业等。

本次权益变动后,林芝腾讯持股比例上升至5%,不排除林芝腾讯在未来12个月内继续增持上市公司股份的计划。至此,腾讯系在A股布局的上市公司达到5家。

6、士兰微7月25日公告:

公司拟通过发行股份方式购买大基金持有的集华投资 19.51%的股权以及士兰集昕20.38%的股权,最终,上市公司将通过直接和间接方式合计持有士兰集昕 63.74%的股权。预计募集资金不超过13亿元。

本次交易的标的公司为集华投资和士兰集昕,其中集华投资为投资型公司,无实际经营业务。士兰集昕主营业务为8英寸集成电路的制造和销售。虽然士兰集昕目前仍处于产能爬坡及高强度投入的亏损状态,但是随着士兰集昕持续优化产品结构,进一步提高芯片产出能力后,士兰集昕预计将逐渐扭亏为盈,并成为上市公司未来重要的盈利来源。

本次交易完成后,公司在标的公司的持股比例将进一步上升,预计交易完成后将提升上市公司归属于母公司所有者权益的规模,有利于提高上市资产质量、优化上市公司财务状况。

再融资

是企业发展扩大的重要工具

1、古越龙山7月30日公告:

公司拟通过非公开发行股票募集资金,募集资金净额将全部用于浙江古越龙山绍兴酒股份有限公司黄酒产业园项目(一期)工程建设。本项目建成投产后可年产 10 万千升机械化黄酒,并形成年12 万千升黄酒小包装灌装能力。黄酒产业园项目(一期)工程建成后将进一步巩固上市公司行业地位,能满足企业销售量的增长需求。

发行数量:不超过157,274,098 股

发行价格:待定

募集资金总额:不超过1,094,627,725元

2、京新药业7月28日公告:

京新药业发布非公开发行股票预案修订稿,募集资金将用于(1)年产30亿粒固体制剂产能提升项目;(2)年产50亿粒固体制剂数字化车间建设项目。

发行数量:不超过54,824,561(原定为:不超过65,789,473股)

发行价格:9.12元/股

募集资金总额:不超过50,000万元(原定为:不超过60,000万元)

3、奥翔药业7月27日公告:

公司拟通过非公开发行股票募集资金,募集资金净额将用于:特色原料药及关键医药中间体生产基地建设项目。本次募集资金投资项目的实施将形成公司新的利润增长点,预计将在未来为公司带来较好的投资收益,将有利于提高公司整体盈利水平和市场竞争力。

发行数量:不超过22,400,000股

发行价格:待定

募集资金总额:不超过42,000万元

4、兆丰股份7月25日公告:

公司拟通过非公开发行股票及可转换公司债券募集资金,募集资金净额将用于:(1)年产 48 万套商用车免维护轮毂轴承单元及远程运维平台(一期)项目;(2)年产230万套新能源汽车轮毂轴承单元项目。本次交易有利于扩大公司的市场规模,进一步提升公司市场竞争力并巩固公司的市场地位,同时紧跟行业未来发展趋势,完善公司的产品结构,进而提高公司整体竞争实力和抗风险能力。

发行数量:不超过1,000.00万股

发行价格:待定

募集资金总额:不超过60,000万元

5、士兰微7月25日公告:

公司拟通过非公开发行股票募集资金,募集资金净额将用于 8 英寸集成电路芯片生产线二期项目和补充上市公司及标的公司流动资金、偿还债务。通过本次募集资金,将有利于提高上市资产质量、优化上市公司财务状况。

发行数量:不超过本次交易前上市公司总股本的 30%

发行价格:13.62元/股

募集资金总额:不超过130,000万元

凤凰“企”飞之

高管动态

1、金龙机电7月30日公告:

董事莫云香女士辞职。

2、浙江东方7月30日公告:

董事潘英松先生辞职。

3、健盛集团7月30日公告:

聘任王立兵先生为公司副总裁。

4、日发精机7月28日公告:

副总经理兼董事会秘书张杰先生辞职。

5、爱柯迪7月25日公告:

副总经理何盛华先生辞职。

6、运达股份7月25日公告:

董事叶杭冶先生辞职。

【农贸(集贸)市场请注意!这份新冠病毒环境监测技术规范请查收】为科学规范指导开展农贸(集贸)市场新冠病毒环境监测工作,深入开展病毒溯源和疫情防控,7月31日,黑龙江省应对新型冠状病毒感染肺炎疫情工作领导小组指挥部办公室转发国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组编制《关于农贸(集贸)市场新型冠状病毒环境监测技术规范的通知》(以下简称《通知》),要求各市地应对新型冠状病毒感染肺炎疫情工作领导小组指挥部参照执行。
《通知》对监测对象、监测内容、样本采样、检测和实验室生物安全等全流程提出了技术要求。监测重点为具备区域辐射能力的大型农贸(集贸)市场,特别是包括冷冻、冷藏功能的肉类和海鲜水产交易摊位,或者存在潮湿、密闭空间的市场;监测内容包括市场内重点摊位的设施、用具表面,从业人员咽拭子、衣物表面、手部、存放食品的冰箱、冷藏柜内部表面,市场内销售的肉、禽类和海鲜水产类食品,排水系统中污水,公共空间中人员接触较多的部位,经常性跨区域移动的工具或物品,工作人员聚集、通风不良的环境的病毒检测。
《通知》要求,对重点大型集贸市场(特别是销售生鲜类产品的市场)按照1次/周,对其余需要监测的集贸市场按照1次/月的频次进行病毒监测。
关于印发农贸(集贸)市场新型冠状病毒环境监测技术规范的通知
联防联控机制综发〔2020〕221号
各省、自治区、直辖市及新疆生产建设兵团应对新冠肺炎疫情联防联控机制(领导小组、指挥部):
为科学规范指导开展农贸(集贸)市场新冠病毒环境监测工作,深入开展病毒溯源和疫情防控,我们组织编制了《农贸(集贸)市场新型冠状病毒环境监测技术规范》。现印发给你们,请参照执行。
国务院应对新型冠状病毒肺炎疫情联防联控机制综合组(代章)
2020年7月30日
农贸(集贸)市场新型冠状病毒环境监测技术规范
农贸(集贸)市场是新冠肺炎疫情防控的重点场所,加强对农贸(集贸)市场新冠病毒环境监测,对于深入开展病毒溯源和疫情防控意义重大。为科学规范指导开展农贸(集贸)市场新冠病毒环境监测工作,特制定本技术规范。
一、监测对象
监测重点为具备区域辐射能力的大型农贸(集贸)市场,特别是包括冷冻、冷藏功能的肉类和海鲜水产交易摊位,或者存在潮湿、密闭空间的市场。
二、监测内容
(一)市场内重点摊位的设施、用具表面病毒检测。重点对摊位台面、面板、地面、把手,以及各种制作和使用器具等表面,包括脱毛或切割机械、刀具等,采集拭子样本。
(二)市场内重点摊位从业人员咽拭子、衣物表面、手部病毒检测。对处于工作状态的从业人员手部表面,采集拭子样本。
(三)市场内重点摊位存放食品的冰箱、冷藏柜内部表面病毒检测。对储藏食物过程中经常触及的冰箱、冷藏柜内表面,采集拭子样本。
(四)市场内销售的肉、禽类和海鲜水产类食品的病毒检测。对市场内销售的食品应当按照无包装食品和有包装食品加以区分,其中有包装类食品重点是需要冷藏运输的肉、禽类和海鲜水产类食品,采集拭子样本。
(五)市场内排水系统中污水的病毒检测。重点包括市场内海鲜水产、肉禽类产品摊位来源的污水,采集拭子样本或污水样本。
(六)市场内公共空间中人员接触较多的部位,包括主要进出口的电梯按钮、楼梯扶手、门把手表面,茶水间、卫生间等公用设备设施表面,潮湿的公共通道和卫生间地面、墩布池等采集拭子样本。
(七)市场内经常性跨区域移动的工具或物品,包括垃圾车、垃圾桶、墩布等清洁工具,转运物品的拖车等,采集拭子样本。
(八)市场内工作人员聚集、通风不良的环境,包括办公室、工具间、休息间、局部交易环境等环境拭子及气溶胶样本。
三、样本采样
(一)样本要求。
1.从业人员咽拭子、手部、衣物和其他物体表面拭子样本:要求用病毒采样管中的病毒保存液,充分浸润采样棉签后,对拟采集的手部或物体(包括公共通道的地面)的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对采样对象表面,进行多点分布式采样。
2.食品表面拭子样本:食品样本不可直接进行采集,应当首先将拟采集的食品小心分离,并存放于洁净采样袋后,再进行拭子样本的采集。要求用病毒采样管中的病毒保存液,充分浸润采样棉签后,对拟采集食物样本的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对样本表面,进行多点分布式采样。
3.污水样本:按照市场内排水系统分布情况,选取2-3处污水采样位置,重点为内部管网汇集处、水流方向的下游或与市政管网的连接处。采集拭子样本要求,用采样棉签浸入污水中,使其吸附污水并在采样管中对涮洗3次以上。采集污水样本要求,用聚乙烯塑料瓶收集30-500mL污水水样;大于500mL体积的污水采集可以使用聚乙烯塑料桶或现场水样专用富集设备。同时要满足对污水采样位置,进行多点分布式采样。
4.动物样本:对于活体动物,可分别用采样棉签采集其体表拭子、口咽拭子和肛拭子,也可以采集其排泄物或分泌物样本,并在记录单上进行相应记录。对于以经过剥皮等处理的动物样本,分别用棉签采集其体表和体腔拭子样本,要求用病毒采样管中的病毒保存液,充分浸润采样棉签后,对拟采集食物样本的表面重复涂抹、涮洗3次以上。同时要满足对样本表面,进行多点分布式采样。
5.其他器具:笼具或鱼缸等装运、养殖动物的容器,需首先观察或了解该容器具体存放、养殖过的动物类型,采集容器内壁拭子样本或内容物液体样本。
6.人员聚集、通风不良的局部交易区域、办公室、休息间等环境采集气溶胶样本。
(二)采样方法。
1.采样周期:对重点大型集贸市场(特别是销售生鲜类产品的市场)按照1次/周,对其余需要监测的集贸市场按照1次/月的频次进行病毒监测。
2.采样实施:现场采样由两名以上的工作人员参与完成,采样时应当穿戴防护服、防护口罩、鞋套和医用一次性手套。采样过程需开启现场采样视频记录设备。
3.采样装备:病毒采样箱、病毒采样管、气溶胶采集器、样品记录单、手消设备、洁净采样袋、冰袋、高危险生物样本转运箱和生物安全垃圾袋等。
4.采样记录:样本信息应当包括样本采集的采样时间、地点、集贸市场名称、摊位编号、采样类型、样本编号以及采样人等信息。
5.采样操作:采样开始前,要求穿戴防护服、口罩、鞋套和手套等个人防护用品进入采样现场,并使用手消进行手部消毒。拭子样本采样过程中,采样棉签只能接触当前采集的样本,避免触碰到其他物体。污水样本采集前,先充分搅匀,然后取样。污水分三层以上,不能搅匀时,可按各层量的多少的比例分层取样。气溶胶样本采集使用气溶胶采集器,设定采集高度、空气通量和采集时间,进行气溶胶采集,将采集后的吸收液或滤膜放置在特定的低温容器进行转运。采样结束后,清理废弃物后离场。
6.样品转运:采集样品连同采样记录单应当在24小时内运送至当地指定的病毒监测机构进行检测,样本建议冷藏存放于高危险生物样本转运箱中,并由专人、专车进行转运。
四、检测
(一)样本分装和保存。
1.样本分装:标本采集后应当在生物安全二级实验室生物安全柜内分装,但个人防护装备参照生物安全三级实验室的防护要求。所有采集对环境标本应当分装到大小适合的带螺旋盖内有垫圈、耐冷冻的样本采集管里,按照1000ul/管进行分装。容器(采集管)外注明样本编号、种类及采样日期。用于后续核酸提取和病毒分离等实验室检测工作。
2.样本保存:用于病毒分离和核酸检测的标本应当尽快进行检测,能在24小时内检测的标本可置于4℃保存;24小时内无法检测的标本则应当置于-70℃或以下保存(如无-70℃保存条件,则于-20℃冰箱暂存)。
(二)污水水样前期处理。使用离心技术去除污水中杂质。先打开低温离心机,待温度降至4℃左右,建议4654离心力离心30分钟,取上清。再使用膜吸附技术或超滤技术进行上清液的浓缩。
(三)核酸提取。新型冠状病毒的常规检测方法是通过实时荧光RT-PCR鉴定。任何新型冠状病毒的检测都必须由经过相关生物安全及技能培训的人员进行操作。对已经灭活的样本,应当在生物安全二级(BSL-2)实验室内,使用自动化核酸提取仪,配套核酸提取试剂盒进行病毒核酸的提取。核酸提取后,应当将核酸产物进行分装,用于后续核酸实时荧光定量(RT-PCR)及深度测序。核酸提取操作参考相关厂家试剂盒说明书开展。
(四)实时荧光定量PCR。在BSL-2实验室中对所有已提取的核酸样本,应当用经CFDA批准的RT-PCR诊断试剂进行新型冠状病毒核酸检测,以保证实验结果的正确可靠。RT-PCR反应体系和操作参考相关厂家试剂盒说明。每一次RT-PCR反应均应当设置阴性对照、阳性对照和无模板空白对照,以确保扩增体系工作正常。
五、实验室生物安全
实验室安全级别参照最新版《新型冠状病毒实验室生物安全指南(第二版)》的相关内容进行管理。采集的环境样本属于未经培养的感染性材料,在采用可靠的方法灭活前进行的病毒抗原检测、血清学检测、核酸提取、生化分析,以及临床样本的灭活等操作,应当在生物安全二级实验室进行,同时采用生物安全三级实验室的个人防护。环境样本在采用可靠的方法灭活后进行的核酸检测、抗原检测、血清学检测、生化分析等操作应当在生物安全二级实验室进行。链接: https://t.cn/A6UUgW2U


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