【一种基于腋芽离体再生技术的柑橘黄龙病菌快速增殖系统的构建】
柑橘黄龙病（Huanglongbing，HLB)是世界柑橘生产上最具毁灭性的病害，其病原为韧皮部限制性寄生的革兰氏阴性细菌，迄今未获得纯培养。
本研究旨在建立一种快速富集柑橘黄龙病菌的培养方法。以感染黄龙病菌亚洲种（‘Candidatus Liberibacter asiaticus’, CLas）的长叶橙（Citrus sinensis Osbeck）为材料，建立CLas侵染长叶橙的茎段培养方法，利用PCR和荧光定量PCR检测分析腋芽离体再生嫩梢中CLas的增殖情况。在此基础上，取CLas侵染长叶橙枝条进行表面消毒处理，切取腋芽嫁接于柑橘试管砧木，进行试管培养，利用PCR和荧光定量PCR检测腋芽再生嫩梢中CLas的增殖规律；采用直接组织印迹免疫法（Direct tissue blot immune assay，DTBIA）对试管苗中CLas的分布进行检测。培养基中添加适合浓度的激素可促进感病柑橘茎段离体培养的萌芽，萌芽率最高的培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+ GA 0.2 mg·L-1+ IAA 0.2 mg·L-1。茎段萌芽30 d时，嫩梢病原PCR检测的阳性率达75%，其CLas浓度平均为温室条件下培养茎段原叶片中脉的28.2倍，最高为484.2倍。试管嫁接苗萌芽10、15、20、25、30和40 d时，嫩梢CLas PCR检测的阳性率分别为10%、15%、15%、20%、55%和70%，CLas浓度分别为7.5×104 、2.2×106 、1.4×107、2.2×107 、1.2×108和1.4×108 cells μg-1 DNA；萌芽30和40 d的试管苗中CLas浓度超过108的比例分别达30%和40%。DTBIA检测结果显示，试管苗中黄龙病菌的分布比温室保存的感病柑橘中均匀。CLas侵染柑橘试管苗的主要症状为嫩梢枯死、停止生长、叶黄和落叶。感病试管苗的死亡率在萌芽40 d后会急剧升高，60 d时死亡率达82.0%。CLas在通过腋芽嫁接的柑橘试管苗中能快速增殖，该方法的建立为深入开展柑橘黄龙病病原生物学、病原-寄主互作及抗菌药物快速筛选等研究奠定一定基础。
本研究建立了一种快速增殖和高浓度富集柑橘黄龙病菌的培养方法。
文章链接：https://t.cn/A6xtIfDP
引用本文 >>>LEI Tian-gang, HE Yong-rui, ZOU Xiu-ping, WANG Xue-feng, FU Shi-min, PENG Ai-hong, XU Lan-zhen, YAO Li-xiao, CHEN Shan-chun, ZHOU Chang-yong. 2021. A rapid multiplication system for Candidatus Liberibacter asiaticus through regeneration of axillary buds in vitro. Journal of Integrative Agriculture, in press.
柑橘黄龙病（Huanglongbing，HLB)是世界柑橘生产上最具毁灭性的病害，其病原为韧皮部限制性寄生的革兰氏阴性细菌，迄今未获得纯培养。
本研究旨在建立一种快速富集柑橘黄龙病菌的培养方法。以感染黄龙病菌亚洲种（‘Candidatus Liberibacter asiaticus’, CLas）的长叶橙（Citrus sinensis Osbeck）为材料，建立CLas侵染长叶橙的茎段培养方法，利用PCR和荧光定量PCR检测分析腋芽离体再生嫩梢中CLas的增殖情况。在此基础上，取CLas侵染长叶橙枝条进行表面消毒处理，切取腋芽嫁接于柑橘试管砧木，进行试管培养，利用PCR和荧光定量PCR检测腋芽再生嫩梢中CLas的增殖规律；采用直接组织印迹免疫法（Direct tissue blot immune assay，DTBIA）对试管苗中CLas的分布进行检测。培养基中添加适合浓度的激素可促进感病柑橘茎段离体培养的萌芽，萌芽率最高的培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L-1+ GA 0.2 mg·L-1+ IAA 0.2 mg·L-1。茎段萌芽30 d时，嫩梢病原PCR检测的阳性率达75%，其CLas浓度平均为温室条件下培养茎段原叶片中脉的28.2倍，最高为484.2倍。试管嫁接苗萌芽10、15、20、25、30和40 d时，嫩梢CLas PCR检测的阳性率分别为10%、15%、15%、20%、55%和70%，CLas浓度分别为7.5×104 、2.2×106 、1.4×107、2.2×107 、1.2×108和1.4×108 cells μg-1 DNA；萌芽30和40 d的试管苗中CLas浓度超过108的比例分别达30%和40%。DTBIA检测结果显示，试管苗中黄龙病菌的分布比温室保存的感病柑橘中均匀。CLas侵染柑橘试管苗的主要症状为嫩梢枯死、停止生长、叶黄和落叶。感病试管苗的死亡率在萌芽40 d后会急剧升高，60 d时死亡率达82.0%。CLas在通过腋芽嫁接的柑橘试管苗中能快速增殖，该方法的建立为深入开展柑橘黄龙病病原生物学、病原-寄主互作及抗菌药物快速筛选等研究奠定一定基础。
本研究建立了一种快速增殖和高浓度富集柑橘黄龙病菌的培养方法。
文章链接：https://t.cn/A6xtIfDP
引用本文 >>>LEI Tian-gang, HE Yong-rui, ZOU Xiu-ping, WANG Xue-feng, FU Shi-min, PENG Ai-hong, XU Lan-zhen, YAO Li-xiao, CHEN Shan-chun, ZHOU Chang-yong. 2021. A rapid multiplication system for Candidatus Liberibacter asiaticus through regeneration of axillary buds in vitro. Journal of Integrative Agriculture, in press.
如何面对冤憎之人与苦恼之境——达摩大师的“二入四行”（上）
作为中国禅宗的奠定者，达摩大师不仅仅是从法脉传承上建立了一个宗派，更以他自己的思想宗旨和修行法门深深地影响着这一宗派。
大师有一篇法语，名为《略辨大乘入道四行》，又叫《略辨大乘四行观》、《入道四行观》。这篇法语专门阐述了入禅之门的方法，也就是“二入四行”。事实上，这也是菩提达摩大师禅法的基本内容。
所谓“二入”，就是理入和行入，这是悟入佛法的两种途径。就禅宗的修行实践来加以区别，理入可理解为解悟，行入可理解为证悟。
具体来说，理入就是“藉教悟宗，深信含生同一真性，但为客尘妄想所覆，不能显了。若也舍妄归真，凝住壁观，无自无他，凡圣等一，坚住不移，更不随于文教，此即与理冥符，无有分别，寂然无为，名之理入。”
行入则是通过实践来验证自己的悟境，加深悟境的层次。行入包括四个方面：一报冤行，二随缘行，三无所求行，四称法行。这四行，既可作为悟后起修的实践方便，也可作为一般求悟佛法的入门路径。所以说，达摩大师开示的这四行非常重要，为我们制定了修行的范围和标准。下面我们具体来看这四行的内容。
一 、报冤行
修道行人，若受苦时，当自念言：我往昔无数劫中，弃本从末，流浪诸有，多起冤憎，违害无限，今虽无犯，是我宿殃，恶业果熟，非天非人所能见与，甘心甘受，都无冤诉。经曰：逢苦不忧。何以故？识达故。此心生时，与理相应，体冤进道，故说言报冤行。
冤就是冤家债主的冤，而不是怨恨的怨。不过这里的报不是报复，而是对待的意思。我们在生活中、修行中会遇到种种障缘和障碍，种种阻挠，时时刻刻都有不如意的事情发生。遇到这些事情以后怎么办呢？是一定要跟对方弄个水落石出、鱼死网破呢？还是包容忍让、以德报怨呢？
达摩大师说，我们“修道行人，若受苦时，当自念言：我从往昔，无数劫中，弃本从末，流浪诸有，多起冤憎，违害无限。今虽无犯，是我宿殃恶业果熟，非天非人所能见与，甘心忍受，都无冤诉”。
也就是说，在佛弟子的心目中，当下的一切遭遇都不过是历劫业因种子的现行而已，事到临头，一切的怨尤都是多余的。对待冤家，我们要秉持佛教忍辱的精神、忍让的精神、包容的精神、化解的精神，不要针锋相对，而应对那些从语言上、行为上加害于我们的人，都要发起同情心、怜悯心，加强自我克制、自我修养，化解烦恼和敌意。
同时，大师引述经文“逢苦不忧”，旨在说明一个修行者、求道者要能够这样对待日常生活中和修行中遇到的种种不如意的事情，使“此心生时，与理相应”，注重令心念与道相应、与法相应、与理相应，唯有如此，才能够减少许多烦恼，“体冤进道”，借助逆境来成就自己的忍辱波罗蜜，在道业上不断进步。
不过这里有一点需要说明，佛教的思想学说是以人为本，从个人出发，更多的是针对个人身心性命的修养。这点与一般的社会学说不同，“报冤行”没有详讲到这个群体对待那个群体应该怎么样，也没有讲到对于个别人的不法行为应该如何利用法律加以制裁。假设我们把“报冤行”这样的思想运用于社会生活，就容易被人误解为没有原则的怯懦忍让，甚至是敌我不分。
但事实上，佛教是告诉我们每一个人应该怎么做，如果我们每一个人都能秉承着“逢苦不忧”、“体冤进道”的态度，把自己个人之间的矛盾化解了，大事化小，小事化了，社会自然就会安定团结，人际关系自然就会和谐，社会风气也会逐步地有所改善。
所谓净化人心、祥和社会是要从每一个人做起，然后形成一种风气。所以佛教的一切精神是重在从自我做起、从现在做起、从当下做起，所以说报冤行看似消极、实际上最为积极，可以用它来化解一切人我是非矛盾。从佛法的因果观念上来看，这其实也是最根本的化解矛盾的方法。
—— 待续 —— #佛法看世间##修行##佛学大智慧##佛教#
作为中国禅宗的奠定者，达摩大师不仅仅是从法脉传承上建立了一个宗派，更以他自己的思想宗旨和修行法门深深地影响着这一宗派。
大师有一篇法语，名为《略辨大乘入道四行》，又叫《略辨大乘四行观》、《入道四行观》。这篇法语专门阐述了入禅之门的方法，也就是“二入四行”。事实上，这也是菩提达摩大师禅法的基本内容。
所谓“二入”，就是理入和行入，这是悟入佛法的两种途径。就禅宗的修行实践来加以区别，理入可理解为解悟，行入可理解为证悟。
具体来说，理入就是“藉教悟宗，深信含生同一真性，但为客尘妄想所覆，不能显了。若也舍妄归真，凝住壁观，无自无他，凡圣等一，坚住不移，更不随于文教，此即与理冥符，无有分别，寂然无为，名之理入。”
行入则是通过实践来验证自己的悟境，加深悟境的层次。行入包括四个方面：一报冤行，二随缘行，三无所求行，四称法行。这四行，既可作为悟后起修的实践方便，也可作为一般求悟佛法的入门路径。所以说，达摩大师开示的这四行非常重要，为我们制定了修行的范围和标准。下面我们具体来看这四行的内容。
一 、报冤行
修道行人，若受苦时，当自念言：我往昔无数劫中，弃本从末，流浪诸有，多起冤憎，违害无限，今虽无犯，是我宿殃，恶业果熟，非天非人所能见与，甘心甘受，都无冤诉。经曰：逢苦不忧。何以故？识达故。此心生时，与理相应，体冤进道，故说言报冤行。
冤就是冤家债主的冤，而不是怨恨的怨。不过这里的报不是报复，而是对待的意思。我们在生活中、修行中会遇到种种障缘和障碍，种种阻挠，时时刻刻都有不如意的事情发生。遇到这些事情以后怎么办呢？是一定要跟对方弄个水落石出、鱼死网破呢？还是包容忍让、以德报怨呢？
达摩大师说，我们“修道行人，若受苦时，当自念言：我从往昔，无数劫中，弃本从末，流浪诸有，多起冤憎，违害无限。今虽无犯，是我宿殃恶业果熟，非天非人所能见与，甘心忍受，都无冤诉”。
也就是说，在佛弟子的心目中，当下的一切遭遇都不过是历劫业因种子的现行而已，事到临头，一切的怨尤都是多余的。对待冤家，我们要秉持佛教忍辱的精神、忍让的精神、包容的精神、化解的精神，不要针锋相对，而应对那些从语言上、行为上加害于我们的人，都要发起同情心、怜悯心，加强自我克制、自我修养，化解烦恼和敌意。
同时，大师引述经文“逢苦不忧”，旨在说明一个修行者、求道者要能够这样对待日常生活中和修行中遇到的种种不如意的事情，使“此心生时，与理相应”，注重令心念与道相应、与法相应、与理相应，唯有如此，才能够减少许多烦恼，“体冤进道”，借助逆境来成就自己的忍辱波罗蜜，在道业上不断进步。
不过这里有一点需要说明，佛教的思想学说是以人为本，从个人出发，更多的是针对个人身心性命的修养。这点与一般的社会学说不同，“报冤行”没有详讲到这个群体对待那个群体应该怎么样，也没有讲到对于个别人的不法行为应该如何利用法律加以制裁。假设我们把“报冤行”这样的思想运用于社会生活，就容易被人误解为没有原则的怯懦忍让，甚至是敌我不分。
但事实上，佛教是告诉我们每一个人应该怎么做，如果我们每一个人都能秉承着“逢苦不忧”、“体冤进道”的态度，把自己个人之间的矛盾化解了，大事化小，小事化了，社会自然就会安定团结，人际关系自然就会和谐，社会风气也会逐步地有所改善。
所谓净化人心、祥和社会是要从每一个人做起，然后形成一种风气。所以佛教的一切精神是重在从自我做起、从现在做起、从当下做起，所以说报冤行看似消极、实际上最为积极，可以用它来化解一切人我是非矛盾。从佛法的因果观念上来看，这其实也是最根本的化解矛盾的方法。
—— 待续 —— #佛法看世间##修行##佛学大智慧##佛教#
#加州大学旧金山分校医疗中心# #UCSF# 是神经系统及大脑研究诺贝尔奖获得者的摇篮。近日，UCSF校园内的UCSF Joan & Sanford I. Weill神经科学大楼正式启用。启用后，该大楼将成为全世界最大、最全面#神经科学# 中心之一的协作枢纽，标志着一个新时代的开端。
该大楼的建立旨在促进神经病学、神经外科和精神病学领域的科学家与临床医生之间的沟通与协作，并将成为难治性脑疾病创新疗法的开发研究人员的集结地。
UCSF医疗中心的神经内科和神经外科医院在全美排名第一。该大楼将成为UCSF医疗中心神经病学诊疗发展的奠基石。#神经内外科全美第一#
https://t.cn/A6xLG5D8
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