DNA的合成:方式有2,复制与逆转录
复制
原核生物
以dNTP为原料,DNA一条单链为模板,由一系列酶催化
起始:解链由几种蛋白质参与,dnaa踩点,dnab破氢键解双螺旋,dnac协助b,ssb稳定解开的dna单链,拓扑异构酶解超螺旋,防止缠绕,解开并连接3,5-磷酸二酯键。
由于dna-pol不能催化游离dntp连接,dnag引物酶从5'→3'催化引物合成,引物是一段RNA,提供3'OH端。注意区分引物酶,rna酶,rnapol。
因为半不连续复制,形成边解链边复制的前导链,解一段合成一段的后随链,上为冈崎片段,二者都是子链。原核一个复制起点两个复制叉。
延长由dnapol3催化
终止任务有3,dnapol1切除引物并填补空缺,连接酶连接缺口。
真核生物
染色体dna末端形成端粒,其是一段富含TG的短序列,端粒可以维持dna复制中结构完整性。
端粒的合成依靠端粒酶,端粒酶成分有rna,端粒酶协同蛋白,端粒酶逆转录酶。以端粒酶rna为模板,母链为引物,端粒酶逆转录酶催化形成端粒dna。端粒酶本质是逆转录酶。
看逆转录,逆转录被用于基因工程获取目的基因(cdna法)并且是某些rna病毒如HIV把自身遗传物质整合在宿主细胞dna上。过程是依赖dna的rna聚合酶→rna酶(rnase)→依赖dna的dna聚合酶。
转录
原核生物
起始首先由rnapol(原核有1)的6亚基识别转录起始点,α决定哪些基因被转录,全酶首先疏松结合在-35区,随后向前移动与-10区紧密结合,-10区为原核生物转录启动子也称Pribnow盒,之后β'催化解链,随着第一个ntp,常为gtp结合上来(此过程不需引物),转录起始复合物形成,dna-rnapol-5'pppgpn-oh-3'。
6亚基脱落,核心酶沿模板链3'-5'前移,催化延长,期间形成转录泡,转录泡中可见杂化双链。
原核生物转录翻译同时进行,且多个转录同时进行,形成多个rna即多顺反子结构。转录产物呈羽毛状。
终止有2,依赖p因子者,p因子与polyc结合使rnapol构象改变,同时作为解旋酶拆开杂化双链释放rna终止转录。
非依赖p因子者通过rna自身形成鼓槌状的茎环(发夹)结构终止转录
真核生物
rnapol有3,1催化转录45srrna后加工成5.8,28,18srrna;2催化转录mrna;3催化转录trna,5srrna,snrna。
与原核生物rnapol直接结合DNA模板链不同,真核生物需要由反式作用因子即转录因子与模板链顺式作用元件结合后,rnapol再结合上去启动转录。
rnapol结合的DNA部位为启动子,原核生物是-10区的Pribnow盒,真核生物是转录起始点上游(在此看到启动子并非转录起始点)的TATA盒也称hognest盒。
转录因子有4,不同的rnapol对应不同的转录因子,rnapol1→tf1,2→tf2,3→tf3。不同的顺式作用元件结合特定的转录因子,
⭐️TATA盒结合TF2D的TBP
⭐️CAAT盒结合C/EBP
⭐️GC盒结合SP1
⭐️增强子结合可诱导因子如HIF-1和肌肉细胞中MyoD
与原核转录翻译同时进行不同,因真核生物有核膜无法同时进行。
转录生成的前体rna需要经过加工修饰才能成为成熟rna,hnrna经snrna加帽(m7gppp)加尾(polya,思考polyc在哪)去除内含子连接外显子
复制
原核生物
以dNTP为原料,DNA一条单链为模板,由一系列酶催化
起始:解链由几种蛋白质参与,dnaa踩点,dnab破氢键解双螺旋,dnac协助b,ssb稳定解开的dna单链,拓扑异构酶解超螺旋,防止缠绕,解开并连接3,5-磷酸二酯键。
由于dna-pol不能催化游离dntp连接,dnag引物酶从5'→3'催化引物合成,引物是一段RNA,提供3'OH端。注意区分引物酶,rna酶,rnapol。
因为半不连续复制,形成边解链边复制的前导链,解一段合成一段的后随链,上为冈崎片段,二者都是子链。原核一个复制起点两个复制叉。
延长由dnapol3催化
终止任务有3,dnapol1切除引物并填补空缺,连接酶连接缺口。
真核生物
染色体dna末端形成端粒,其是一段富含TG的短序列,端粒可以维持dna复制中结构完整性。
端粒的合成依靠端粒酶,端粒酶成分有rna,端粒酶协同蛋白,端粒酶逆转录酶。以端粒酶rna为模板,母链为引物,端粒酶逆转录酶催化形成端粒dna。端粒酶本质是逆转录酶。
看逆转录,逆转录被用于基因工程获取目的基因(cdna法)并且是某些rna病毒如HIV把自身遗传物质整合在宿主细胞dna上。过程是依赖dna的rna聚合酶→rna酶(rnase)→依赖dna的dna聚合酶。
转录
原核生物
起始首先由rnapol(原核有1)的6亚基识别转录起始点,α决定哪些基因被转录,全酶首先疏松结合在-35区,随后向前移动与-10区紧密结合,-10区为原核生物转录启动子也称Pribnow盒,之后β'催化解链,随着第一个ntp,常为gtp结合上来(此过程不需引物),转录起始复合物形成,dna-rnapol-5'pppgpn-oh-3'。
6亚基脱落,核心酶沿模板链3'-5'前移,催化延长,期间形成转录泡,转录泡中可见杂化双链。
原核生物转录翻译同时进行,且多个转录同时进行,形成多个rna即多顺反子结构。转录产物呈羽毛状。
终止有2,依赖p因子者,p因子与polyc结合使rnapol构象改变,同时作为解旋酶拆开杂化双链释放rna终止转录。
非依赖p因子者通过rna自身形成鼓槌状的茎环(发夹)结构终止转录
真核生物
rnapol有3,1催化转录45srrna后加工成5.8,28,18srrna;2催化转录mrna;3催化转录trna,5srrna,snrna。
与原核生物rnapol直接结合DNA模板链不同,真核生物需要由反式作用因子即转录因子与模板链顺式作用元件结合后,rnapol再结合上去启动转录。
rnapol结合的DNA部位为启动子,原核生物是-10区的Pribnow盒,真核生物是转录起始点上游(在此看到启动子并非转录起始点)的TATA盒也称hognest盒。
转录因子有4,不同的rnapol对应不同的转录因子,rnapol1→tf1,2→tf2,3→tf3。不同的顺式作用元件结合特定的转录因子,
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⭐️CAAT盒结合C/EBP
⭐️GC盒结合SP1
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