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【自体脂肪填充CAL技术中的SVF如何提取？】

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SVF可以从吸脂得到的脂肪组织中提取，具体过程是:将得到的脂肪组织经0.075%胶原酶37 C消化30 min,然后以800xg、10 min离心以除去成熟的脂肪细胞；底部沉淀的细胞团重悬后，用100μum的滤网过滤去除纤维结缔组织后即为SVF。

另外，SVF也可以从吸脂的脂水混合物液体中提取，方法是:将静止分层后的下层液体进行400xg、10 min的离心，得到的沉淀用红细胞裂解液作用5 min, 再用100 μm的滤器去除红细胞，细胞悬液再次离心，重悬得到SVF细胞。

虽然两种方法得到的细胞总数相差无几，但脂肪源性干细胞在得到的细胞混合物中所占比例却相差悬殊，从脂肪组织中获得的比例高达15% ~ 40%，而从吸脂后下层液体中获得的比例低至3% ~ 10%。因此，临床上主要从脂肪组织中提取SVF来使用。

自从CAL技术提出以来，目前已经在临床得到了广泛应用，而且取得了较好的效果。但是对于加入的SVF细胞与脂肪移植物的比例目前尚无定论，是否加入的SVF成分比例越高，脂肪的移植效果就越好？还是在SVF与要准备移植的脂肪量之间有合适的比例关系？关于这些，目前还不是很清楚。

Yoshimura等人的做法是把获取脂肪的一半用于提取SVF，然后添加到剩余的另一半脂肪中用于移植，把移植物中脂肪源性干细胞的量提高了1倍，获得了显著效果。

【#执法大练兵# |#省生态环境厅公布第一批生态环境执法典型案例#】案例四：开封某环保科技有限公司私设暗管、干扰自动监测设施涉嫌刑事犯罪案

01案情简介
2022年3月8日，开封市生态环境局禹王台分局执法人员对开封某环保科技有限公司进行现场检查发现，该企业在微过滤器和沉淀池之间私设暗管，污水经过微过滤器后通过暗管绕过沉淀池直接排放；微过滤器和沉淀池之间主排水管道上私设自来水管道，自来水通过私设管道进入沉淀池稀释污水浓度后排放。

02查处情况
该公司私设暗管的行为违反了《中华人民共和国水污染防治法》第三十九条之规定。依据《中华人民共和国水污染防治法》第八十三条第（三）项之规定，参照《河南省生态环境行政处罚裁量基准》，开封市生态环境局对该公司作出罚款柒拾叁万（730，000）元处罚。

该公司通过稀释排放干扰自动监测设施的行为，符合《最高人民法院、最高人民检察院关于办理环境污染刑事案件适用法律若干问题的解释》第一条第七项规定的“严重污染环境”情形，禹王台分局将案件移交公安机关调查处理。

03案件启示
开封某环保科技有限公司承担着整个化工园区的污水处理任务，其处理后污水排向淮河支流马家河，是园区几十家化工企业化工污水排放外环境最后一道关卡。在日常的检查中，私设暗管排放一般比较隐蔽，不容易被发现，对暗管的完整取证也有较大的工作量，此类案件办理起来较为复杂。该公司利用暗管稀释化工污水干扰在线数据的违法行为，性质恶劣，作为重点排污单位，涉嫌污染环境犯罪。开封市生态环境局禹王台分局执法人员认真研判现场情况，积极组织3台挖机对该公司的暗管进行全面开挖，最终，把该企业私设暗管全部展现出来，做了完整的取证，在铁证面前使得企业负责人无话可说，既对该企业进行了行政处罚，又依法打击了违法犯罪人员。