三气培养箱的常见问题
三气培养箱为什么没有氮气的控制?
三气培养箱通过控制O2或N2的输入量，来实现对三种气体O2、N2及CO2三气分别控制。三气培养箱箱体中只含N2、O2、CO2，三种气体比例加起来按1**%计，只用精确控制其中两种气体的含量即可控制三种气体含量。
由于CO2及O2传感器技术成熟及兼顾成本，同时节约了制造成本，所以没有氮气的控制。氮气含量计算方法：氮气=1**%-CO2浓度-O2浓度。
三气培养箱可以常规用来养细胞吗?气体怎么调节呢?
三气培养箱可以培养细胞的，用于细胞的缺氧培养。
气体调节的话是通过调节氧气跟CO2来达到所需要的，一般实验要求都是5%的CO2+95%N2。所以CO2的调节直接设置在5%即可，而95%的N2则通过调节O2来实现，即设置成0%的O2。也就是说只需要设置0%的O2与5%的CO2 就可到达实验要求。
三气培养箱为什么没有氮气的控制?
三气培养箱通过控制O2或N2的输入量，来实现对三种气体O2、N2及CO2三气分别控制。三气培养箱箱体中只含N2、O2、CO2，三种气体比例加起来按1**%计，只用精确控制其中两种气体的含量即可控制三种气体含量。
由于CO2及O2传感器技术成熟及兼顾成本，同时节约了制造成本，所以没有氮气的控制。氮气含量计算方法：氮气=1**%-CO2浓度-O2浓度。
三气培养箱可以常规用来养细胞吗?气体怎么调节呢?
三气培养箱可以培养细胞的，用于细胞的缺氧培养。
气体调节的话是通过调节氧气跟CO2来达到所需要的，一般实验要求都是5%的CO2+95%N2。所以CO2的调节直接设置在5%即可，而95%的N2则通过调节O2来实现，即设置成0%的O2。也就是说只需要设置0%的O2与5%的CO2 就可到达实验要求。
#化学每日一文#
【中药分析与质量评价专题|小叶黄杨的化学成分及心肌细胞保护作用研究】
引用本文：王瑞，张岩，MUHAMMAD Ishaq，等. 小叶黄杨的化学成分及心肌细胞保护作用研究[J]. 化学试剂, 2022,44(8)：1111-1117
DOI: 10.13822 /j.cnki.hxsj.2022.0232
投稿网址：https://t.cn/A6Sbk8xU
背景介绍
小叶黄杨作为心脑宁胶囊药物组成之一，有行气活血，祛湿通络之功效。对小叶黄杨的研究主要集中在植物学、农学以及生物碱成分的提取和临床应用方面，而在生物碱成分的富集处理过程中，大量其他成分被忽略。因此开展小叶黄杨干燥叶化学成分分离工作可以进一步补充小叶黄杨临床应用的药效物质基础。心肌梗死、动脉粥样硬化、缺血/再灌注等心脑血管疾病仍然是危害世界各国人民健康和生命的最严重疾病，心血管疾病的发病机制也复杂多样。心肌细胞是一种高度分化的细胞，心肌细胞的凋亡会导致心功能下降，最终导致心衰。因此，寻找能够减少心肌细胞凋亡的新药是目前治疗心血管疾病的一种直接有效的方法。本文对小叶黄杨干燥叶中的化学成分进行研究，并对提取各部位和分离得到的化合物进行体外心肌细胞保护作用测试。
文章亮点
从小叶黄杨干燥叶中共分离得到14个化合物，化合物2、5、6为首次从该植物中分离得到；
体外实验表明乙酸乙酯部位和化合物14（松脂素）可显著改善H2O2诱导的心肌细胞损伤，几种多羟基的芳香类成分也显示出一定的心肌细胞保护作用；
研究结果有利于进一步揭示作为心脑宁胶囊药物组成之一的小叶黄杨能够减少心肌细胞凋亡进而治疗心血管疾病。
内容介绍
1实验部分
1.1 提取与分离
50.0 kg小叶黄杨（B. sinica var. parvifolia M. Cheng）干燥叶用95%乙醇加热回流提取3次（70 ℃，每次回流2 h），3次提取液合并减压浓缩得到4.8 kg乙醇浸膏。乙醇浸膏加适量水充分混悬后，依次用乙酸乙酯和正丁醇分别萃取3 ~ 5次，减压浓缩得到乙酸乙酯部位（EA部位，1.0 kg）和正丁醇部位（878.0 g）。
1.2心肌细胞保护作用测试
H9c2细胞常规培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，、37 ºC恒温培养箱、5% CO2条件下培养。在10 cm培养皿中培养的细胞生长至对数期后，用PBS缓冲溶液冲洗细胞2次，再在培养皿中加入1 mL 0.25%胰酶，转移至37 ºC、5% CO2培养箱消化3 min。取出细胞在显微镜下观察，当细胞失去贴壁形态变成圆形后，弃去胰酶后，加入3 mL含10%胎牛血清的DMEM完全培养基终止消化并制成细胞混悬液。
2结果与讨论
2.1 体外心肌细胞保护作用结果
小叶黄杨提取萃取部位对H2O2诱导的H9c2细胞存活率的影响：与正常对照组相比，H2O2诱导的H9c2细胞损伤模型组（CH）细胞存活率降低至42.5%（p < 0.0001）；与模型组相比，乙酸乙酯部位（BS-EA）样品干预，H9c2细胞存活率显著提高到84.1%（p < 0.001），可显著改善H2O2诱导的心肌细胞损伤（图1）。
分离得到的单体化合物对H2O2诱导的H9c2细胞存活率的影响：与正常对照组相比，模型组（CH）H9c2细胞存活率显著降低至42.5%（p < 0.01）。化合物14（松脂素）干预，H9c2细胞存活率显著提高到77.7%（p < 0.01）；化合物1、2、4 ~ 7、9、10的干预下，均可将H9c2细胞存活率提高，存活率分别为49.2%、44.3%、51.7%、44.6%、57.0%、52.3%、55.5%和60.9%；这些单体化合物显现较好的心肌细胞保护作用。化合物3、8、11 ~ 13使细胞存活率显著降低（图2）。
3结论
本文对小叶黄杨的化学成分进行研究，从小叶黄杨干燥叶95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离鉴定了14个化合物，包括6个芳香类、3个三萜类、2个黄酮类、1个香豆素类、1个木脂素类和1个其他类化合物。其中化合物2、5和6为首次从该植物中分离得到。同时，对小叶黄杨的各部位和单体化合物进行了心肌细胞保护作用活性筛选。结果显示，乙酸乙酯部位样品干预，H9c2细胞存活率显著提高到84.1%（p < 0.001）。化合物松脂素（14）可以使过氧化氢诱导的H9c2心肌细胞存活率提高至66.08%，显示一定的心肌细胞保护作用。几种多羟基的芳香类成分也显示出一定的心肌细胞保护作用。这些研究结果有利于进一步揭示作为心脑宁胶囊药物组成之一的小叶黄杨能够减少心肌细胞凋亡进而治疗心血管疾病。但本研究只是对小叶黄杨乙酸乙酯部位及该部位中分离得到的化合物进行初步的心肌细胞保护活性研究，后期将对乙酸乙酯部位及活性成分的药理作用进行深入研究，以期为小叶黄杨的综合利用提供借鉴。
【中药分析与质量评价专题|小叶黄杨的化学成分及心肌细胞保护作用研究】
引用本文：王瑞，张岩，MUHAMMAD Ishaq，等. 小叶黄杨的化学成分及心肌细胞保护作用研究[J]. 化学试剂, 2022,44(8)：1111-1117
DOI: 10.13822 /j.cnki.hxsj.2022.0232
投稿网址：https://t.cn/A6Sbk8xU
背景介绍
小叶黄杨作为心脑宁胶囊药物组成之一，有行气活血，祛湿通络之功效。对小叶黄杨的研究主要集中在植物学、农学以及生物碱成分的提取和临床应用方面，而在生物碱成分的富集处理过程中，大量其他成分被忽略。因此开展小叶黄杨干燥叶化学成分分离工作可以进一步补充小叶黄杨临床应用的药效物质基础。心肌梗死、动脉粥样硬化、缺血/再灌注等心脑血管疾病仍然是危害世界各国人民健康和生命的最严重疾病，心血管疾病的发病机制也复杂多样。心肌细胞是一种高度分化的细胞，心肌细胞的凋亡会导致心功能下降，最终导致心衰。因此，寻找能够减少心肌细胞凋亡的新药是目前治疗心血管疾病的一种直接有效的方法。本文对小叶黄杨干燥叶中的化学成分进行研究，并对提取各部位和分离得到的化合物进行体外心肌细胞保护作用测试。
文章亮点
从小叶黄杨干燥叶中共分离得到14个化合物，化合物2、5、6为首次从该植物中分离得到；
体外实验表明乙酸乙酯部位和化合物14（松脂素）可显著改善H2O2诱导的心肌细胞损伤，几种多羟基的芳香类成分也显示出一定的心肌细胞保护作用；
研究结果有利于进一步揭示作为心脑宁胶囊药物组成之一的小叶黄杨能够减少心肌细胞凋亡进而治疗心血管疾病。
内容介绍
1实验部分
1.1 提取与分离
50.0 kg小叶黄杨（B. sinica var. parvifolia M. Cheng）干燥叶用95%乙醇加热回流提取3次（70 ℃，每次回流2 h），3次提取液合并减压浓缩得到4.8 kg乙醇浸膏。乙醇浸膏加适量水充分混悬后，依次用乙酸乙酯和正丁醇分别萃取3 ~ 5次，减压浓缩得到乙酸乙酯部位（EA部位，1.0 kg）和正丁醇部位（878.0 g）。
1.2心肌细胞保护作用测试
H9c2细胞常规培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，、37 ºC恒温培养箱、5% CO2条件下培养。在10 cm培养皿中培养的细胞生长至对数期后，用PBS缓冲溶液冲洗细胞2次，再在培养皿中加入1 mL 0.25%胰酶，转移至37 ºC、5% CO2培养箱消化3 min。取出细胞在显微镜下观察，当细胞失去贴壁形态变成圆形后，弃去胰酶后，加入3 mL含10%胎牛血清的DMEM完全培养基终止消化并制成细胞混悬液。
2结果与讨论
2.1 体外心肌细胞保护作用结果
小叶黄杨提取萃取部位对H2O2诱导的H9c2细胞存活率的影响：与正常对照组相比，H2O2诱导的H9c2细胞损伤模型组（CH）细胞存活率降低至42.5%（p < 0.0001）；与模型组相比，乙酸乙酯部位（BS-EA）样品干预，H9c2细胞存活率显著提高到84.1%（p < 0.001），可显著改善H2O2诱导的心肌细胞损伤（图1）。
分离得到的单体化合物对H2O2诱导的H9c2细胞存活率的影响：与正常对照组相比，模型组（CH）H9c2细胞存活率显著降低至42.5%（p < 0.01）。化合物14（松脂素）干预，H9c2细胞存活率显著提高到77.7%（p < 0.01）；化合物1、2、4 ~ 7、9、10的干预下，均可将H9c2细胞存活率提高，存活率分别为49.2%、44.3%、51.7%、44.6%、57.0%、52.3%、55.5%和60.9%；这些单体化合物显现较好的心肌细胞保护作用。化合物3、8、11 ~ 13使细胞存活率显著降低（图2）。
3结论
本文对小叶黄杨的化学成分进行研究，从小叶黄杨干燥叶95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位中分离鉴定了14个化合物，包括6个芳香类、3个三萜类、2个黄酮类、1个香豆素类、1个木脂素类和1个其他类化合物。其中化合物2、5和6为首次从该植物中分离得到。同时，对小叶黄杨的各部位和单体化合物进行了心肌细胞保护作用活性筛选。结果显示，乙酸乙酯部位样品干预，H9c2细胞存活率显著提高到84.1%（p < 0.001）。化合物松脂素（14）可以使过氧化氢诱导的H9c2心肌细胞存活率提高至66.08%，显示一定的心肌细胞保护作用。几种多羟基的芳香类成分也显示出一定的心肌细胞保护作用。这些研究结果有利于进一步揭示作为心脑宁胶囊药物组成之一的小叶黄杨能够减少心肌细胞凋亡进而治疗心血管疾病。但本研究只是对小叶黄杨乙酸乙酯部位及该部位中分离得到的化合物进行初步的心肌细胞保护活性研究，后期将对乙酸乙酯部位及活性成分的药理作用进行深入研究，以期为小叶黄杨的综合利用提供借鉴。
气调包装贮存方法
应考虑贮存温度、包装材料、脱氧剂和乙烯吸附剂。实验和预测表明，包装膜孔面积对氧浓度的影响远大于对RH的影响，这使得调节包装袋中的RH以降低果实重量损失和保持芒果生理活动所需的最小气体含量成为可能。该模型指出了氧浓度、RH和包装膜参数对MAP贮存的影响。为MAP的贮存提供了最佳的氧浓度和RH值。另外，采用0.06mm厚的聚乙烯袋进行包装和密封，并在袋中加入适当的脱氧剂和乙烯吸附剂，使氧气浓度为3%-5%，CO2浓度为2.5%-5%。在10～12℃下保鲜30天左右。
应考虑贮存温度、包装材料、脱氧剂和乙烯吸附剂。实验和预测表明，包装膜孔面积对氧浓度的影响远大于对RH的影响，这使得调节包装袋中的RH以降低果实重量损失和保持芒果生理活动所需的最小气体含量成为可能。该模型指出了氧浓度、RH和包装膜参数对MAP贮存的影响。为MAP的贮存提供了最佳的氧浓度和RH值。另外，采用0.06mm厚的聚乙烯袋进行包装和密封，并在袋中加入适当的脱氧剂和乙烯吸附剂，使氧气浓度为3%-5%，CO2浓度为2.5%-5%。在10～12℃下保鲜30天左右。
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