Cre-LoxP系统质粒验证，快来看看吧[太开心]

Cre是一种在噬菌体中发现的重组酶，能够识别特异性位点（LoxP），使2个LoxP位点之间的DNA序列发生精确重组。LoxP位点是噬菌体中长度为34bp的回文结构序列，具有方向性，LoxP的方向影响DNA重组的结果。目前已发现多种LoxP位点，均可被Cre酶识别。Cre-LoxP系统经常被用于化学遗传激活和基因敲除领域。

DIO-mCherry质粒是基于Cre重组酶活性报告质粒。该质粒包含CAG启动子、正向LoxP、正向LoxP 2272、反向mCherry、反向LoxP、反向LoxP 2272、WPRE等结构。在Cre重组酶的作用下，反向mCherry序列会发生翻转，进而正常翻译mCherry红色荧光蛋白（见图1）。

在本案例中，我们将DIO-mCherry（质粒A）、pLVX-EGFP-CRE（质粒B）、pAAV-EGFP-CRE（质粒C）单独或组合转染至肝癌Huh7细胞中。转染48h后，在荧光显微镜下观察。其中4组和5组可以观察到红色荧光，表明CRE酶在细胞中发挥作用，将反向mCherry基因序列翻转，从而使其正常表达（见图2）。
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《Dao De Jing·Lao Zi》-059章
杨鹏先生对啬（穑se）的本义复原和翻译，应当是老子的根本之义，而非如多人望文生义的附会。huh！有些不仅误人子弟，确也误了历史长河里的邦*国。
In governing people and serving Tian, nothing is more important than producing and harvesting.
Only the production and harvest are important so cultivate early the land.
Cultivating early can be called "valuing the
accumulation of virtue.

@杨鹏掌上国学 谢谢！

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