【方案参考 | 微生物蛋白纯化实验室搭建模版】
一级学科:生物学
二级学科:生物化学、微生物学
简述:方案包含重组载体构建、蛋白纯化、蛋白性质分析等3大部分3个流程,涉及21种设备。
核心设备:高压破碎仪、蛋白纯化仪、高速冷冻离心机、紫外可见分光光度计、高效液相色谱
关键词:重组载体构建、蛋白纯化、亲和层析、疏水层析、离子交换层析、尺寸排阻层析、生理生化性质鉴定。
基本概念:重组载体构建、蛋白纯化、亲和层析、疏水层析、离子交换层析、尺寸排阻层析、蛋白性质分析。
实验流程:
蛋白纯化主要包括三个步骤:1)重组载体的构建;2)蛋白的上柱纯化;3)蛋白性质分析。
1、重组载体的构建
蛋白纯化主要分为异源表达纯化和野生菌纯化。其中异源表达纯化在蛋白上柱纯化之前需要构建目的基因的重组载体,并且在载体构建过程中给目的基因添加特殊的标签,如His-Tag、GST、Strep等,最终通过相应的亲和层析柱获得目的蛋白.此方法为蛋白纯化最常用的方法。
而野生菌纯化则是通过离子交换层析、疏水层析、尺寸排阻层析(凝胶过滤)等方法原理,从野生菌中直接获得某种蛋白的蛋白纯化方法。
其中重组载体的构建主要由分为三个步骤:1)目的基因片段的获得;2)酶切及切胶回收;3)酶连、转化及保存等
1.1目的基因片段的获得(对应编号1-1)
选用合适的质粒作为载体,并选择合适的双酶切位点。
以相应菌株的基因组为模板,设计相应引物,利用PCR仪对目的基因进行扩增,获得大量的目的基因片段。
1.2酶切及切胶回收(对应编号1-2)
将PCR获得的目的基因片段和提取的质粒同时进行双酶切处理,该过程需要在恒温水浴槽中37℃中酶切40 min。
对酶切之后的反应液利用水平电泳仪进行TAE琼脂糖凝胶电泳,在凝胶成像系统下切下目的片段及酶切后的载体片段,用DNA纯化回收试剂盒进行纯化回收,该回收过程需要多次用到小型高速离心机。
1.3酶连、转化及保存(对应编号1-3、1-4)
用T4 DNA Ligase对切胶回收后的目的片段和载体质粒进行酶连实验,该过程需要在恒温水浴槽中25℃中酶连30 min左右,最终将酶连产物通过转化转入克隆宿主。
转化的方法有两种,第一种方法是通过电转化法,直接通过电转仪将重组后的质粒转入克隆宿主,省时高效;另一种方法是将连接液加入到感受态细胞中,冰浴30 min,之后37℃水浴5 min,冰上放置3 min,之后超净台中加入500 μL LB培养基,37℃振荡培养箱振荡培养约1 h。
将上述培养液在超净工作台进行平板涂布,过夜培养观察平板菌落生长情况。
通过PCR验证与测序挑选正确的转化子,并将正确的转化子转入到表达宿主中,经PCR验证后将含有重组质粒的表达宿主甘油处理,并保存在超低温冰箱的-80℃环境中。
2、蛋白的上柱纯化
蛋白的上柱纯化主要分为四个步骤组成:1)目的细胞的培养;2)目的细胞的破碎及离心;3)目的蛋白上柱纯化及浓缩脱盐等。
2.1 目的细胞的培养(对应编号2-1)
对于异源表达纯化来说,需对上述含有重组质粒的表达宿主进行诱导表达。
一般方法如下(假设表达宿主为BL21(DE3),载体为pET28b(+)):将测序成功的含有重组质粒的表达宿主在超净工作台接种至LB培养基,在大容量恒温振荡器中37℃、170 rpm培养至OD值达到0.8-1.0时,加入诱导剂IPTG(终浓度一般为0.5 mM),降低温度和转速至30℃、130 rpm,过夜诱导后利用大容量高速冷冻离心机收菌,并用pH 7.0的50 mM磷酸钠清洗两遍,-20℃保存细胞。
而对于野生菌纯化来说,只需在该菌株最适生长条件之下培养获得大量菌体,以备下一步试验所需。
该过程中培养基以及以下步骤所需的缓冲液均需要pH计来调剂pH。如果所需目的细胞为厌氧细胞,需用厌氧手套箱进行培养基的配制。
2.2 目的细胞的破碎及离心(对应编号2-2、2-3)
将目的细胞用缓冲液重悬,并用高压细胞破碎仪破碎目的细胞,如果是革兰氏染色阳性的细胞,需在菌悬液中添加溶菌酶,并在37℃下恒温水浴30 min。
细胞破碎液用高速冷冻离心机在35000 ×g、4℃下离心30 min,将上清用0.22 μm滤头过滤,最终获得上清粗酶液。
对于膜蛋白组分,需用超速离心机进行离心。
2.3 目的蛋白上柱纯化(对应编号2-4、2-5)
对于异源表达纯化来说,将上述步骤制备的粗酶液通过蠕动泵上样到以亲和层析为主的蛋白纯化柱上(此处以常用的His-Tag和Ni柱为例)。
将上样完成的Ni柱利用蛋白纯化仪进行咪唑梯度蛋白洗脱,并将每个梯度的样品分别收取,并利用浓缩管和高速冷冻离心机对蛋白进行浓缩脱盐,用于目的蛋白的验证和表征。
相比异源表达纯化,野生菌纯化要复杂得多。首先需知道所要纯化蛋白的基本性质,比如所催化的基础反应。
利用此反应,依据不同的纯化原理来进一步捕获和纯化蛋白,该过程需要蛋白纯化仪的支持。
如首先通过蠕动泵上样离子交换层析柱(通常用Q柱或DEAE柱),该层析柱通过逐步提高盐浓度洗脱蛋白,依据目的蛋白所催化的基础反应捕获蛋白,该过程通常需要用到电脑实时监测的双光束紫外可见分光光度计。
当监测到目的蛋白所在梯度后,对该梯度进行蛋白浓缩,并将缓冲液换成疏水层析柱(一般为苯基柱)的缓冲液。
将上述样品通过蠕动泵上样苯基柱,该层析柱需要逐步降低盐浓度来洗脱蛋白,依据目的蛋白所催化的基础反应进一步蛋白,并将目的蛋白梯度浓缩脱盐。
再将上一步样品利用尺寸排阻层析柱(分子筛)进一步纯化蛋白样品,最终获得较纯的蛋白样品,用于蛋白生理生化性质的分析,还可通过分子筛测定蛋白的分子量,并预测蛋白亚基的聚合形式。
3、蛋白性质分析
对于蛋白的生理生化性质的测定,主要包括以下几个方面:1)蛋白浓度测定及SDS-PAGE电泳;2)催化性质及其产物测定;3)辅基测定;4)蛋白结构解析等。
3.1 蛋白浓度测定及SDS-PAGE电泳(对应编号3-1)
对于蛋白浓度的测定,一般以牛血清白蛋白为标准品,用Bradford法进行测定,该测定须使用紫外可见分光光度计。
SDS-PAGE电泳首先对蛋白样品进行处理,选择合适浓度的蛋白样品,加入蛋白loading,100℃金属浴10 min,经小型高速离心机离心后,在垂直电泳槽中点样,最终完成蛋白电泳。
3.2 催化性质及其产物测定(对应编号3-2、3-4)
对于目的蛋白催化性质的测定,一般可使用电脑实时监测的双光束紫外可见分光光度计来完成,通过监测底物的消耗或产物的生成监测反应进行,并可通过计算酶活曲线的斜率计算比酶活。
有的反应因底物产物较为相似,无法用紫外可见分光光度计分开,这时需要高效液相色谱(HPLC)来监测反应的进行,一般通过监测单位时间内产物的生成来计算比酶活。
3.3 辅基测定(对应编号3-3)
对于蛋白辅基的测定,测定方法多种多样。
如Fe含量的测定,通常使用 Ferene法,该方法需用到紫外可见分光光度计和金属浴。
对于蛋白中其他离子的鉴定与定量如Zn、Mo、W和S等,其最便捷高效的方法就是使用原子吸收光谱进行测定。
而对于其他辅基如FAD、FMN等,其最简便的鉴别定量方法是利用HPLC进行监测。
3.3 蛋白结构解析(对应编号3-5、3-6)
目前对于蛋白质二级结构的研究,其主要手段之一是利用圆二色光谱进行鉴定,该方法广泛应用于蛋白质的构象研究中。
而对于蛋白质三级结构的解析,主要的方法包括X-射线衍射法、核磁共振和冷冻电镜。
其中X-射线衍射法需要先对蛋白进行结晶,然后利用X-射线衍射仪进行结构分析,因此适用于较小分子蛋白质的结构解析,因为大分子蛋白很难结晶,该方法同样很难捕捉蛋白质动态变化过程;
核磁共振依据强磁场中原子和对射频辐射的吸收作用,需要用到核磁共振波谱仪进行研究,该方法可以捕捉蛋白质分子动力学,但是仅适用于小分子蛋白;
冷冻电镜是近年来兴起的蛋白质结构测定方法,难以结晶的膜蛋白以及生物大分子复合体可用此方法进行解析。#木木西里# #实验方案# #微生物蛋白#
一级学科:生物学
二级学科:生物化学、微生物学
简述:方案包含重组载体构建、蛋白纯化、蛋白性质分析等3大部分3个流程,涉及21种设备。
核心设备:高压破碎仪、蛋白纯化仪、高速冷冻离心机、紫外可见分光光度计、高效液相色谱
关键词:重组载体构建、蛋白纯化、亲和层析、疏水层析、离子交换层析、尺寸排阻层析、生理生化性质鉴定。
基本概念:重组载体构建、蛋白纯化、亲和层析、疏水层析、离子交换层析、尺寸排阻层析、蛋白性质分析。
实验流程:
蛋白纯化主要包括三个步骤:1)重组载体的构建;2)蛋白的上柱纯化;3)蛋白性质分析。
1、重组载体的构建
蛋白纯化主要分为异源表达纯化和野生菌纯化。其中异源表达纯化在蛋白上柱纯化之前需要构建目的基因的重组载体,并且在载体构建过程中给目的基因添加特殊的标签,如His-Tag、GST、Strep等,最终通过相应的亲和层析柱获得目的蛋白.此方法为蛋白纯化最常用的方法。
而野生菌纯化则是通过离子交换层析、疏水层析、尺寸排阻层析(凝胶过滤)等方法原理,从野生菌中直接获得某种蛋白的蛋白纯化方法。
其中重组载体的构建主要由分为三个步骤:1)目的基因片段的获得;2)酶切及切胶回收;3)酶连、转化及保存等
1.1目的基因片段的获得(对应编号1-1)
选用合适的质粒作为载体,并选择合适的双酶切位点。
以相应菌株的基因组为模板,设计相应引物,利用PCR仪对目的基因进行扩增,获得大量的目的基因片段。
1.2酶切及切胶回收(对应编号1-2)
将PCR获得的目的基因片段和提取的质粒同时进行双酶切处理,该过程需要在恒温水浴槽中37℃中酶切40 min。
对酶切之后的反应液利用水平电泳仪进行TAE琼脂糖凝胶电泳,在凝胶成像系统下切下目的片段及酶切后的载体片段,用DNA纯化回收试剂盒进行纯化回收,该回收过程需要多次用到小型高速离心机。
1.3酶连、转化及保存(对应编号1-3、1-4)
用T4 DNA Ligase对切胶回收后的目的片段和载体质粒进行酶连实验,该过程需要在恒温水浴槽中25℃中酶连30 min左右,最终将酶连产物通过转化转入克隆宿主。
转化的方法有两种,第一种方法是通过电转化法,直接通过电转仪将重组后的质粒转入克隆宿主,省时高效;另一种方法是将连接液加入到感受态细胞中,冰浴30 min,之后37℃水浴5 min,冰上放置3 min,之后超净台中加入500 μL LB培养基,37℃振荡培养箱振荡培养约1 h。
将上述培养液在超净工作台进行平板涂布,过夜培养观察平板菌落生长情况。
通过PCR验证与测序挑选正确的转化子,并将正确的转化子转入到表达宿主中,经PCR验证后将含有重组质粒的表达宿主甘油处理,并保存在超低温冰箱的-80℃环境中。
2、蛋白的上柱纯化
蛋白的上柱纯化主要分为四个步骤组成:1)目的细胞的培养;2)目的细胞的破碎及离心;3)目的蛋白上柱纯化及浓缩脱盐等。
2.1 目的细胞的培养(对应编号2-1)
对于异源表达纯化来说,需对上述含有重组质粒的表达宿主进行诱导表达。
一般方法如下(假设表达宿主为BL21(DE3),载体为pET28b(+)):将测序成功的含有重组质粒的表达宿主在超净工作台接种至LB培养基,在大容量恒温振荡器中37℃、170 rpm培养至OD值达到0.8-1.0时,加入诱导剂IPTG(终浓度一般为0.5 mM),降低温度和转速至30℃、130 rpm,过夜诱导后利用大容量高速冷冻离心机收菌,并用pH 7.0的50 mM磷酸钠清洗两遍,-20℃保存细胞。
而对于野生菌纯化来说,只需在该菌株最适生长条件之下培养获得大量菌体,以备下一步试验所需。
该过程中培养基以及以下步骤所需的缓冲液均需要pH计来调剂pH。如果所需目的细胞为厌氧细胞,需用厌氧手套箱进行培养基的配制。
2.2 目的细胞的破碎及离心(对应编号2-2、2-3)
将目的细胞用缓冲液重悬,并用高压细胞破碎仪破碎目的细胞,如果是革兰氏染色阳性的细胞,需在菌悬液中添加溶菌酶,并在37℃下恒温水浴30 min。
细胞破碎液用高速冷冻离心机在35000 ×g、4℃下离心30 min,将上清用0.22 μm滤头过滤,最终获得上清粗酶液。
对于膜蛋白组分,需用超速离心机进行离心。
2.3 目的蛋白上柱纯化(对应编号2-4、2-5)
对于异源表达纯化来说,将上述步骤制备的粗酶液通过蠕动泵上样到以亲和层析为主的蛋白纯化柱上(此处以常用的His-Tag和Ni柱为例)。
将上样完成的Ni柱利用蛋白纯化仪进行咪唑梯度蛋白洗脱,并将每个梯度的样品分别收取,并利用浓缩管和高速冷冻离心机对蛋白进行浓缩脱盐,用于目的蛋白的验证和表征。
相比异源表达纯化,野生菌纯化要复杂得多。首先需知道所要纯化蛋白的基本性质,比如所催化的基础反应。
利用此反应,依据不同的纯化原理来进一步捕获和纯化蛋白,该过程需要蛋白纯化仪的支持。
如首先通过蠕动泵上样离子交换层析柱(通常用Q柱或DEAE柱),该层析柱通过逐步提高盐浓度洗脱蛋白,依据目的蛋白所催化的基础反应捕获蛋白,该过程通常需要用到电脑实时监测的双光束紫外可见分光光度计。
当监测到目的蛋白所在梯度后,对该梯度进行蛋白浓缩,并将缓冲液换成疏水层析柱(一般为苯基柱)的缓冲液。
将上述样品通过蠕动泵上样苯基柱,该层析柱需要逐步降低盐浓度来洗脱蛋白,依据目的蛋白所催化的基础反应进一步蛋白,并将目的蛋白梯度浓缩脱盐。
再将上一步样品利用尺寸排阻层析柱(分子筛)进一步纯化蛋白样品,最终获得较纯的蛋白样品,用于蛋白生理生化性质的分析,还可通过分子筛测定蛋白的分子量,并预测蛋白亚基的聚合形式。
3、蛋白性质分析
对于蛋白的生理生化性质的测定,主要包括以下几个方面:1)蛋白浓度测定及SDS-PAGE电泳;2)催化性质及其产物测定;3)辅基测定;4)蛋白结构解析等。
3.1 蛋白浓度测定及SDS-PAGE电泳(对应编号3-1)
对于蛋白浓度的测定,一般以牛血清白蛋白为标准品,用Bradford法进行测定,该测定须使用紫外可见分光光度计。
SDS-PAGE电泳首先对蛋白样品进行处理,选择合适浓度的蛋白样品,加入蛋白loading,100℃金属浴10 min,经小型高速离心机离心后,在垂直电泳槽中点样,最终完成蛋白电泳。
3.2 催化性质及其产物测定(对应编号3-2、3-4)
对于目的蛋白催化性质的测定,一般可使用电脑实时监测的双光束紫外可见分光光度计来完成,通过监测底物的消耗或产物的生成监测反应进行,并可通过计算酶活曲线的斜率计算比酶活。
有的反应因底物产物较为相似,无法用紫外可见分光光度计分开,这时需要高效液相色谱(HPLC)来监测反应的进行,一般通过监测单位时间内产物的生成来计算比酶活。
3.3 辅基测定(对应编号3-3)
对于蛋白辅基的测定,测定方法多种多样。
如Fe含量的测定,通常使用 Ferene法,该方法需用到紫外可见分光光度计和金属浴。
对于蛋白中其他离子的鉴定与定量如Zn、Mo、W和S等,其最便捷高效的方法就是使用原子吸收光谱进行测定。
而对于其他辅基如FAD、FMN等,其最简便的鉴别定量方法是利用HPLC进行监测。
3.3 蛋白结构解析(对应编号3-5、3-6)
目前对于蛋白质二级结构的研究,其主要手段之一是利用圆二色光谱进行鉴定,该方法广泛应用于蛋白质的构象研究中。
而对于蛋白质三级结构的解析,主要的方法包括X-射线衍射法、核磁共振和冷冻电镜。
其中X-射线衍射法需要先对蛋白进行结晶,然后利用X-射线衍射仪进行结构分析,因此适用于较小分子蛋白质的结构解析,因为大分子蛋白很难结晶,该方法同样很难捕捉蛋白质动态变化过程;
核磁共振依据强磁场中原子和对射频辐射的吸收作用,需要用到核磁共振波谱仪进行研究,该方法可以捕捉蛋白质分子动力学,但是仅适用于小分子蛋白;
冷冻电镜是近年来兴起的蛋白质结构测定方法,难以结晶的膜蛋白以及生物大分子复合体可用此方法进行解析。#木木西里# #实验方案# #微生物蛋白#
#oppo reno6# 我的评分:[星星][星星][星星][星星][星星]
把夏日晴海装进口袋,年轻人的真“甜品”手机
在OPPO手机的产品线中,Reno系列一直以时尚新潮的外观和强大的自拍功能著称,也因此颇受年轻用户青睐,其最新产品Reno6 Pro也继承了这一设计思路,通过新一代晶钻工艺让手机的颜值和手感都上升到了新的层次,6400万像素水光人像镜头和3200万像素前置自拍镜头赋予了其更强大的影像能力,还和全球裸妆大师Bobbi Brown联合推出了五套美妆滤镜,实现素颜一秒上妆的自拍效果。在追求颜值的同时,也对年轻用户钟爱的游戏功能进行了针对性加强,使其成为了一款没有明显短板的准旗舰级“甜品”机。
轻薄细腻,把夏天装进口袋
你没看错!这款策略手游,开局一座城,你能守住几波?
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你没看错!这款策略手游,开局一座城,你能守住几波?
电科技拿到的这款OPPO Reno6 Pro是“夏日晴海”配色,淡蓝色的机身给人一种清爽的感觉,仿佛把夏天握在了手中,装进了口袋里。
外观:
OPPO Reno6 Pro采用了晶钻工艺3.0,使得机身在光线下看起来有种波光粼粼的效果,而摸上去的手感也非常细腻,又不会光滑到握不住,同时还不会沾染指纹,这使得手感在如今的手机中绝对处于第一梯队,因此也比较推荐大家至少尝试不“戴套”使用一段时间,感受一下这种绝美的柔嫩手感。
OPPO Reno6 Pro采用了一块6.55英寸的OLED屏幕,全局亮度最高可达800尼特,即使在室外也能清晰显示。这块屏幕还支持180Hz最高触控采样率和90Hz刷新率,让用户在使用时感到顺滑无阻。
虽然使用了6.55英寸的大屏,但OPPO Reno6的体积控制得十分到位,机身重量仅177克,厚度也仅有7.6毫米,这使得整机有着十分舒适的握持感,同时也显得更有质感。
整体上说,OPPO Reno6 Pro的外观让人感到惊艳,其手感和握持感也都十分出色,第一眼就能让人产生购买欲,使用后也会爱不释手。
自研美妆算法加大师定制妆容,突出你的美
作为一款手机,外观和手感只是第一步,真正体现其竞争力的还是手机内在的东西。OPPO Reno6 Pro就继承了影像这一Reno系列的一贯特点,并做出了更多升级,将其继续发扬光大。
OPPO Reno6 Pro采用了800万超广角+6400万主摄+200万微距+200万肖像风格的后置镜头模组以及3200万的前置水光镜头,虽然镜头有着极高的参数,但并没有突兀到影响手机两面的整体观感,在这点上要给予好评。
OPPO Reno6 Pro在自拍功能上做足了文章。和一般手机夸张的美颜效果不同,OPPO Reno6 Pro的美颜功能显得更为柔和,拍出的图片也更加自然。
OPPO Reno6 Pro还加入了特色的“光斑人像”模式,开启这种模式后,景深将会变浅,背景中的点光源也将被处理为更加柔和的光斑,从而让人物显得更加突出
在OPPO手机的产品线中,Reno系列一直以时尚新潮的外观和强大的自拍功能著称,也因此颇受年轻用户青睐,其最新产品Reno6 Pro也继承了这一设计思路,通过新一代晶钻工艺让手机的颜值和手感都上升到了新的层次,6400万像素水光人像镜头和3200万像素前置自拍镜头赋予了其更强大的影像能力,还和全球裸妆大师Bobbi Brown联合推出了五套美妆滤镜,实现素颜一秒上妆的自拍效果。在追求颜值的同时,也对年轻用户钟爱的游戏功能进行了针对性加强,使其成为了一款没有明显短板的准旗舰级“甜品”机。
自研美妆算法加大师定制妆容,突出你的美
作为一款手机,外观和手感只是第一步,真正体现其竞争力的还是手机内在的东西。OPPO Reno6 Pro就继承了影像这一Reno系列的一贯特点,并做出了更多升级,将其继续发扬光大。
亮点:
OPPO Reno6 Pro采用了800万超广角+6400万主摄+200万微距+200万肖像风格的后置镜头模组以及3200万的前置水光镜头,虽然镜头有着极高的参数,但并没有突兀到影响手机两面的整体观感,在这点上要给予好评。
亮点:
OPPO Reno6 Pro在自拍功能上做足了文章。和一般手机夸张的美颜效果不同,OPPO Reno6 Pro的美颜功能显得更为柔和,拍出的图片也更加自然。
OPPO Reno6 Pro还加入了特色的“光斑人像”模式,开启这种模式后,景深将会变浅,背景中的点光源也将被处理为更加柔和的光斑,从而让人物显得更加突出。
亮点:
OPPO Reno6 Pro使用了OPPO自研的美妆算法,脸部检测点达到了635个,因此能够实现一秒上妆,且妆容和脸部完美贴合,即使移动或是出镜入镜也不会出现偏移。
OPPO Reno6 Pro共有11种美妆算法,每种都支持等级调节,用户可以根据自己的需要调整,其中有五种是和裸妆大师Bobbi Brown联合定制的裸妆滤镜。
所谓“裸妆”,指的就是自然清新的妆容,能不露痕迹地使肌肤呈现出完美无瑕的质感。这种理念也刚好和OPPO Reno6 Pro不使用夸张美颜效果的逻辑相契合,为照片带来了独特的质感。
亮点:
65W闪充加天玑旗舰芯片,畅玩游戏无压力
除了影像功能外,OPPO Reno6 Pro的核心性能也不含糊。首先,它搭配了4500毫安时的大电池以及OPPO标配的65W闪充,经测试,5分钟充电25%,17分钟充电43%,“回血”速度可见一斑。这样的电池容量和充电速度基本可以让人彻底告别续航焦虑了。
总结:年轻人的下一台手机
总体来看,OPPO Reno6 Pro无疑是一款瞄准年轻人市场的产品。它有着轻薄的机身,靓丽的外观和极具特色的强大影像系统,特别是在自拍功能上进行了非常精细的雕琢,这都使得其成为了一款尤其适合年轻人的产品。同时,OPPO Reno6 Pro也有着出色的核心性能,日常使用以及运行主流游戏都不成问题,对于有一定游戏需求的用户来说,它也是一款足够扎实的选择。
如果有年轻人最近在考虑换机的话,在3500这个价位段,OPPO Reno6 Pro绝对是最值得考虑的产品之一。
把夏日晴海装进口袋,年轻人的真“甜品”手机
在OPPO手机的产品线中,Reno系列一直以时尚新潮的外观和强大的自拍功能著称,也因此颇受年轻用户青睐,其最新产品Reno6 Pro也继承了这一设计思路,通过新一代晶钻工艺让手机的颜值和手感都上升到了新的层次,6400万像素水光人像镜头和3200万像素前置自拍镜头赋予了其更强大的影像能力,还和全球裸妆大师Bobbi Brown联合推出了五套美妆滤镜,实现素颜一秒上妆的自拍效果。在追求颜值的同时,也对年轻用户钟爱的游戏功能进行了针对性加强,使其成为了一款没有明显短板的准旗舰级“甜品”机。
轻薄细腻,把夏天装进口袋
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电科技拿到的这款OPPO Reno6 Pro是“夏日晴海”配色,淡蓝色的机身给人一种清爽的感觉,仿佛把夏天握在了手中,装进了口袋里。
外观:
OPPO Reno6 Pro采用了晶钻工艺3.0,使得机身在光线下看起来有种波光粼粼的效果,而摸上去的手感也非常细腻,又不会光滑到握不住,同时还不会沾染指纹,这使得手感在如今的手机中绝对处于第一梯队,因此也比较推荐大家至少尝试不“戴套”使用一段时间,感受一下这种绝美的柔嫩手感。
OPPO Reno6 Pro采用了一块6.55英寸的OLED屏幕,全局亮度最高可达800尼特,即使在室外也能清晰显示。这块屏幕还支持180Hz最高触控采样率和90Hz刷新率,让用户在使用时感到顺滑无阻。
虽然使用了6.55英寸的大屏,但OPPO Reno6的体积控制得十分到位,机身重量仅177克,厚度也仅有7.6毫米,这使得整机有着十分舒适的握持感,同时也显得更有质感。
整体上说,OPPO Reno6 Pro的外观让人感到惊艳,其手感和握持感也都十分出色,第一眼就能让人产生购买欲,使用后也会爱不释手。
自研美妆算法加大师定制妆容,突出你的美
作为一款手机,外观和手感只是第一步,真正体现其竞争力的还是手机内在的东西。OPPO Reno6 Pro就继承了影像这一Reno系列的一贯特点,并做出了更多升级,将其继续发扬光大。
OPPO Reno6 Pro采用了800万超广角+6400万主摄+200万微距+200万肖像风格的后置镜头模组以及3200万的前置水光镜头,虽然镜头有着极高的参数,但并没有突兀到影响手机两面的整体观感,在这点上要给予好评。
OPPO Reno6 Pro在自拍功能上做足了文章。和一般手机夸张的美颜效果不同,OPPO Reno6 Pro的美颜功能显得更为柔和,拍出的图片也更加自然。
OPPO Reno6 Pro还加入了特色的“光斑人像”模式,开启这种模式后,景深将会变浅,背景中的点光源也将被处理为更加柔和的光斑,从而让人物显得更加突出
在OPPO手机的产品线中,Reno系列一直以时尚新潮的外观和强大的自拍功能著称,也因此颇受年轻用户青睐,其最新产品Reno6 Pro也继承了这一设计思路,通过新一代晶钻工艺让手机的颜值和手感都上升到了新的层次,6400万像素水光人像镜头和3200万像素前置自拍镜头赋予了其更强大的影像能力,还和全球裸妆大师Bobbi Brown联合推出了五套美妆滤镜,实现素颜一秒上妆的自拍效果。在追求颜值的同时,也对年轻用户钟爱的游戏功能进行了针对性加强,使其成为了一款没有明显短板的准旗舰级“甜品”机。
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亮点:
OPPO Reno6 Pro采用了800万超广角+6400万主摄+200万微距+200万肖像风格的后置镜头模组以及3200万的前置水光镜头,虽然镜头有着极高的参数,但并没有突兀到影响手机两面的整体观感,在这点上要给予好评。
亮点:
OPPO Reno6 Pro在自拍功能上做足了文章。和一般手机夸张的美颜效果不同,OPPO Reno6 Pro的美颜功能显得更为柔和,拍出的图片也更加自然。
OPPO Reno6 Pro还加入了特色的“光斑人像”模式,开启这种模式后,景深将会变浅,背景中的点光源也将被处理为更加柔和的光斑,从而让人物显得更加突出。
亮点:
OPPO Reno6 Pro使用了OPPO自研的美妆算法,脸部检测点达到了635个,因此能够实现一秒上妆,且妆容和脸部完美贴合,即使移动或是出镜入镜也不会出现偏移。
OPPO Reno6 Pro共有11种美妆算法,每种都支持等级调节,用户可以根据自己的需要调整,其中有五种是和裸妆大师Bobbi Brown联合定制的裸妆滤镜。
所谓“裸妆”,指的就是自然清新的妆容,能不露痕迹地使肌肤呈现出完美无瑕的质感。这种理念也刚好和OPPO Reno6 Pro不使用夸张美颜效果的逻辑相契合,为照片带来了独特的质感。
亮点:
65W闪充加天玑旗舰芯片,畅玩游戏无压力
除了影像功能外,OPPO Reno6 Pro的核心性能也不含糊。首先,它搭配了4500毫安时的大电池以及OPPO标配的65W闪充,经测试,5分钟充电25%,17分钟充电43%,“回血”速度可见一斑。这样的电池容量和充电速度基本可以让人彻底告别续航焦虑了。
总结:年轻人的下一台手机
总体来看,OPPO Reno6 Pro无疑是一款瞄准年轻人市场的产品。它有着轻薄的机身,靓丽的外观和极具特色的强大影像系统,特别是在自拍功能上进行了非常精细的雕琢,这都使得其成为了一款尤其适合年轻人的产品。同时,OPPO Reno6 Pro也有着出色的核心性能,日常使用以及运行主流游戏都不成问题,对于有一定游戏需求的用户来说,它也是一款足够扎实的选择。
如果有年轻人最近在考虑换机的话,在3500这个价位段,OPPO Reno6 Pro绝对是最值得考虑的产品之一。
【#考研#】号称"一志愿黑洞",很多考研er一生黑的211,一志愿录取人数不敌调剂名额!
之前师兄介绍了不少名声不错的宝藏院校,如大连理工大学、暨南大学、北京林业大学、上海财经大学、中国社会科学院大学、延边大学等(戳此查看),可以重点考虑一下。
同时,也有一些院校是带有黑点的,尤其是宁夏大学,20考研的人文学院疑似压分事件(戳此回顾)至今仍令人心有余悸,从风评来看,在考研圈的名声应该没有比它更差的了。
图片图片
那该校到底值不值得考?21考研的情况又是怎样的呢?
01
照顾型211大学
宁夏大学坐落于银川市,是教育部与当地政府合建高校、国家“世界一流学科建设高校”、国家“211工程”重点建设高校。截至2019年3月,有1个国家重点学科(草业科学)、1个国家重点(培育)学科(中国少数民族史),1个国家“一流学科”建设学科(化学工程与技术),18个自治区重点学科。
作为最后一批进入211行列的高校,带有一定照顾性质,在实力上处于211的末流,不仅没有A档学科,也没有B+学科,同样情况的还有青海大学、石河子大学、西藏大学。
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02
近两年考情分析
我们先来看下20考研的报录情况——
①报录比
从官网公布的报录比数据来看,101个专业共报考8119人,录取2354人,除去推免招收的246人,统考报录比3.8:1,这是一个比较正常的难度。
可如果我们把录取人数再进行分化的话,你会发现一些奇怪的事情。该校20考研一共78个专业都在接收调剂,说明77%的专业一志愿没有招满。
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(2020考研调剂部分名额)
师兄数了下,调剂名额一共有1162人,假如最终这一千多人全部被录取的话,那一志愿统考其实只招收了946人,录取率仅仅可怜的11%,淘汰率确实有点夸张了。
其中调剂名额较多的前15个专业是:材料与化工141人、土木水利84人、电子信息53人、学科教学(物理)45人、机械42人、学科教学(语文)38人、畜牧38人、生态学33人、中国语言文学专业32人、现代教育技术27人、英语笔译25人、化学22人、化学工艺20人、应用化学19人、草学18人、音乐18人。
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②报考人数最多的专业
一志愿报考人数超过200人的十大专业:工商管理(非全日制)924人、会计769人、公共管理725人、学科教学(语文)287人、电子信息(信息工程学院)270人、教育学269人、法律(非法学)234人、新闻与传播228人、农艺与种业220人、中国语言文学201人。
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其中最为瞩目的当属闹得沸沸扬扬的中国语言文学专业,20考研报考达201人之多,可楞是一志愿无一人上线,不少考生的《中国文学》专业课成绩仅为个位数甚至0分,即使是在部分考生政英成绩都不错的情况下。
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(网友爆料)
且从录取名单来看,调剂来的考生分数多在380、390分,超B区线40分左右,生源质量确实没得说(手动狗头)。
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(中国语言文学专业部分拟录取名单)
学科教学(语文)专业由于也是考的《中国文学》,情况同样槽糕,一志愿虽说9人上线,但报考了287人,就算全部被录取的话,一志愿录取率也只有3%,人文学院的这俩专业真的是难兄难弟。
③报录比较高&较低的专业
从20考研报录比来看,法律(法学)、法律(非法学)、工商管理(非全日制)、公共管理、会计、教育管理、教育学、美术、新闻与传播、学科教学(语文)、中国语言文学这几个专业较高,共报4187人,占总报考人数的51%,录取549人,统考报录比7.6:1,需谨慎报考。
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统考报录比较低的有材料与化工、畜牧电子信息(物电学院)、机械、农村发展、农艺与种业、生物学、食品加工与安全、土木水利、现代教育技术、小学教育、学科教学(物理)、资源利用与植物保护等专业,报考1394人,录取866人(包含调剂人数),统考报录比1.6:1,“可能”相较好考。
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(完整报录比可在后台回复“宁夏大学”获取)
21考研的官方报录统计目前还没有出,以下是一些关键数据:
拟录取名单上共有2710人(含推免278名),比前一年统考多招324人;
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68个专业接收调剂,虽然专业数量上比20考研少10个,但总体名额只增不减,达到1282人(同比多出120人),按已全部招满的情况来算,调剂生源占总统考录取的52%,同比下降3个百分点,意味着一志愿名额多录204人。
以下是调剂名额较多的专业:材料与化工160人、土木水利71人、机械67人、电子信息50人、学科教学(物理)47人、畜牧45人、学科教学(语文)34人、生态学34人、中国语言文学32人、现代教育技术26人、水利工程26人。
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以上专业有没有很眼熟?你没看错,因为20考研也是几乎是这些专业,像材料与化工、土木水利、电子信息、学科教学(物理)、畜牧、学科教学(语文)、生态学、中国语言文学专业、现代教育技术等专业都是老熟客了。
03
宁大还值得报考吗?
一志愿招不满的原因,无非是题目难、报考人数少、生源质量差、压分这几种原因。
第1种多出现在985高校,师兄也统计过一些→大量985专业常年一志愿招不满。受限于地理位置和经济水平,后面3个因素可能更符合某些B区院校的情况(A区也有),这些年一直在重锤,但无一例外全部失败。
例如之前分析的云南大学,该校21考研的复试线大部分就是b区国家线,包括经济、法学等一众热门专业,且复试比仅为1:1.2(招生计划较少以及生源紧缺的学科(专业)可以适当扩大差额复试比例)。
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在近2.5万人的报考情况下,上线考生肯定不会少,按理说一志愿应该是人满为患,调剂名额极度稀缺,但事实恰恰相反,云大已成为了每年的调剂大户,这难免会引来一些童鞋的怀疑与不满。
宁大20考研这起“压分”事件算是最接近实锤的了,可最终也抵不过人家一纸文书。
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至于这么做的好处是什么?我们从贵大去年的研究生新生数据(硕博)或许能找到最直接的答案:录取4566名研究生(硕博),调剂生源占1103名,其中调剂生第一志愿高校Top10全是985/211,这成分颇有些明显了。
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有网友神侃:我们知道他们在说谎,他们也知道他们在说谎。他们知道我们知道他们在说谎,我们也知道他们知道我们知道他们在说谎,但是他们仍然在说谎。多余也不说了,可自行细品。
说回主题,宁大22考研是否还值得报考呢?
由以上统计来看,近两年的数据很类似,都是一志愿上线率超低、调剂名额巨多。虽有风险,但也不能因噎废食,有些专业确实是招不满(材料与化工、土木水利、畜牧等)。
大家可以从实际专业出发,查一下历年录取线、一志愿、调剂等情况,最好再联系下未来直系学长学姐打听相关消息,这是最实际靠谱。
大家还知道哪些有黑点的院校呢?可以都拎出来“见见光”~
之前师兄介绍了不少名声不错的宝藏院校,如大连理工大学、暨南大学、北京林业大学、上海财经大学、中国社会科学院大学、延边大学等(戳此查看),可以重点考虑一下。
同时,也有一些院校是带有黑点的,尤其是宁夏大学,20考研的人文学院疑似压分事件(戳此回顾)至今仍令人心有余悸,从风评来看,在考研圈的名声应该没有比它更差的了。
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那该校到底值不值得考?21考研的情况又是怎样的呢?
01
照顾型211大学
宁夏大学坐落于银川市,是教育部与当地政府合建高校、国家“世界一流学科建设高校”、国家“211工程”重点建设高校。截至2019年3月,有1个国家重点学科(草业科学)、1个国家重点(培育)学科(中国少数民族史),1个国家“一流学科”建设学科(化学工程与技术),18个自治区重点学科。
作为最后一批进入211行列的高校,带有一定照顾性质,在实力上处于211的末流,不仅没有A档学科,也没有B+学科,同样情况的还有青海大学、石河子大学、西藏大学。
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02
近两年考情分析
我们先来看下20考研的报录情况——
①报录比
从官网公布的报录比数据来看,101个专业共报考8119人,录取2354人,除去推免招收的246人,统考报录比3.8:1,这是一个比较正常的难度。
可如果我们把录取人数再进行分化的话,你会发现一些奇怪的事情。该校20考研一共78个专业都在接收调剂,说明77%的专业一志愿没有招满。
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(2020考研调剂部分名额)
师兄数了下,调剂名额一共有1162人,假如最终这一千多人全部被录取的话,那一志愿统考其实只招收了946人,录取率仅仅可怜的11%,淘汰率确实有点夸张了。
其中调剂名额较多的前15个专业是:材料与化工141人、土木水利84人、电子信息53人、学科教学(物理)45人、机械42人、学科教学(语文)38人、畜牧38人、生态学33人、中国语言文学专业32人、现代教育技术27人、英语笔译25人、化学22人、化学工艺20人、应用化学19人、草学18人、音乐18人。
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②报考人数最多的专业
一志愿报考人数超过200人的十大专业:工商管理(非全日制)924人、会计769人、公共管理725人、学科教学(语文)287人、电子信息(信息工程学院)270人、教育学269人、法律(非法学)234人、新闻与传播228人、农艺与种业220人、中国语言文学201人。
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其中最为瞩目的当属闹得沸沸扬扬的中国语言文学专业,20考研报考达201人之多,可楞是一志愿无一人上线,不少考生的《中国文学》专业课成绩仅为个位数甚至0分,即使是在部分考生政英成绩都不错的情况下。
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(网友爆料)
且从录取名单来看,调剂来的考生分数多在380、390分,超B区线40分左右,生源质量确实没得说(手动狗头)。
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(中国语言文学专业部分拟录取名单)
学科教学(语文)专业由于也是考的《中国文学》,情况同样槽糕,一志愿虽说9人上线,但报考了287人,就算全部被录取的话,一志愿录取率也只有3%,人文学院的这俩专业真的是难兄难弟。
③报录比较高&较低的专业
从20考研报录比来看,法律(法学)、法律(非法学)、工商管理(非全日制)、公共管理、会计、教育管理、教育学、美术、新闻与传播、学科教学(语文)、中国语言文学这几个专业较高,共报4187人,占总报考人数的51%,录取549人,统考报录比7.6:1,需谨慎报考。
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统考报录比较低的有材料与化工、畜牧电子信息(物电学院)、机械、农村发展、农艺与种业、生物学、食品加工与安全、土木水利、现代教育技术、小学教育、学科教学(物理)、资源利用与植物保护等专业,报考1394人,录取866人(包含调剂人数),统考报录比1.6:1,“可能”相较好考。
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(完整报录比可在后台回复“宁夏大学”获取)
21考研的官方报录统计目前还没有出,以下是一些关键数据:
拟录取名单上共有2710人(含推免278名),比前一年统考多招324人;
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68个专业接收调剂,虽然专业数量上比20考研少10个,但总体名额只增不减,达到1282人(同比多出120人),按已全部招满的情况来算,调剂生源占总统考录取的52%,同比下降3个百分点,意味着一志愿名额多录204人。
以下是调剂名额较多的专业:材料与化工160人、土木水利71人、机械67人、电子信息50人、学科教学(物理)47人、畜牧45人、学科教学(语文)34人、生态学34人、中国语言文学32人、现代教育技术26人、水利工程26人。
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以上专业有没有很眼熟?你没看错,因为20考研也是几乎是这些专业,像材料与化工、土木水利、电子信息、学科教学(物理)、畜牧、学科教学(语文)、生态学、中国语言文学专业、现代教育技术等专业都是老熟客了。
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宁大还值得报考吗?
一志愿招不满的原因,无非是题目难、报考人数少、生源质量差、压分这几种原因。
第1种多出现在985高校,师兄也统计过一些→大量985专业常年一志愿招不满。受限于地理位置和经济水平,后面3个因素可能更符合某些B区院校的情况(A区也有),这些年一直在重锤,但无一例外全部失败。
例如之前分析的云南大学,该校21考研的复试线大部分就是b区国家线,包括经济、法学等一众热门专业,且复试比仅为1:1.2(招生计划较少以及生源紧缺的学科(专业)可以适当扩大差额复试比例)。
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在近2.5万人的报考情况下,上线考生肯定不会少,按理说一志愿应该是人满为患,调剂名额极度稀缺,但事实恰恰相反,云大已成为了每年的调剂大户,这难免会引来一些童鞋的怀疑与不满。
宁大20考研这起“压分”事件算是最接近实锤的了,可最终也抵不过人家一纸文书。
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至于这么做的好处是什么?我们从贵大去年的研究生新生数据(硕博)或许能找到最直接的答案:录取4566名研究生(硕博),调剂生源占1103名,其中调剂生第一志愿高校Top10全是985/211,这成分颇有些明显了。
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有网友神侃:我们知道他们在说谎,他们也知道他们在说谎。他们知道我们知道他们在说谎,我们也知道他们知道我们知道他们在说谎,但是他们仍然在说谎。多余也不说了,可自行细品。
说回主题,宁大22考研是否还值得报考呢?
由以上统计来看,近两年的数据很类似,都是一志愿上线率超低、调剂名额巨多。虽有风险,但也不能因噎废食,有些专业确实是招不满(材料与化工、土木水利、畜牧等)。
大家可以从实际专业出发,查一下历年录取线、一志愿、调剂等情况,最好再联系下未来直系学长学姐打听相关消息,这是最实际靠谱。
大家还知道哪些有黑点的院校呢?可以都拎出来“见见光”~
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