#科学# 从“1”开始 实现“0”的突破
——大规模斑马鱼定向突变体库建成记

斑马鱼,因全身布满多条深蓝色条纹似斑马而得名。这种不起眼的生物,却是撬动许多学科发展的基础——其基因和人类基因相似度达87%,因此被应用在生命科学、健康科学和环境科学等领域的研究中,与线虫、果蝇、小鼠一样,是常用的模式生物。

从2013年开始,在中国科学院院士朱作言、孟安明的号召下,国内30多家实验室先后加入“斑马鱼1号染色体全基因敲除联盟”(ZAKOC)。经过6年协作攻关,科学家针对斑马鱼1号染色体上的1333个基因进行系统性基因敲除,成功敲除了其中1029个基因,实现了中国斑马鱼资源库“从0到1”的突破,也为相关学科开展研究奠定了基础。

在国家“十三五”科技创新成就展上,由中科院水生生物研究所(以下简称水生所)牵头完成的这一成果——“建成自主知识产权的大规模斑马鱼定向突变体库”入选基础研究展区,出现在生物科技相关成果的第一展板上。

做基础研究的基础

与小白鼠相比,斑马鱼繁殖力强、发育迅速、胚胎透明、体外受精、体外发育等生物学特征,更加便于科学研究。但在2012年前,国内对斑马鱼的研究却非常“小众”,只有少数实验室在开展相关研究。

而在同一时期,美国、欧洲都建成了斑马鱼资源中心,澳大利亚等地区也建有斑马鱼库。此前,欧美国家发起过几次“从表型到基因型”的正向遗传学突变体库构建和筛选计划,但这些突变体全部保藏在国外,中国科研人员很难获取,加之知识产权等原因,转化研究更加受限。

“没有斑马鱼研究作为基础,许多学科基础研究很难开展。”水生所研究员孙永华介绍,开展斑马鱼研究是许多“基础研究工作的基础”。因此,建立自己的斑马鱼资源库和自主知识产权的斑马鱼突变体库尤为迫切。

国家层面也意识到斑马鱼研究的重要性,2012年10月,国家斑马鱼资源中心在水生所成立,主要任务就是为国内收集、创制、整理、保藏和分享斑马鱼研究资源。

然而设立中心只是第一步,如何大规模创制和收集斑马鱼品系资源才是迫切需要解决的问题。几个月后,新一代基因编辑技术CRISPR/Cas9系统问世,让中国斑马鱼研究人员看到了曙光。

“那时,‘基因剪刀技术’刚被证实有效,大家敏锐地意识到这个技术能够非常高效地定制我们所需要的斑马鱼品系。”孙永华回忆道。

2013年2月,CRISPR/Cas9技术被成功应用于斑马鱼。在朱作言、孟安明的召集下,水生所、清华大学、中科院动物研究所、北京大学等24家机构的30多名学者迅速集结,组成了ZAKOC,开启了“从基因型到表型”的斑马鱼大规模反向遗传学筛选研究。

打造斑马鱼研究“国家队”

“当时大家已经意识到,斑马鱼是一种很重要的实验材料。只有中国积累起足够的实力,才能去谈国际合作问题。只跟在别人后面做,必定要受制于人。”北京大学生命科学学院教授张博是该联盟的发起人之一。她表示,尽管有很多不确定性,但意识到其中的战略意义,国内斑马鱼学界的力量很快以水生所为中心集结起来。

“大家一致认为要从斑马鱼的1号染色体开始敲。”孙永华表示,斑马鱼有25条染色体,其中1号染色体有1300多条基因,基因数量是25条染色体的平均数,作为样本非常合适。

虽然大家的热情高涨,但现实“捉襟见肘”。

一方面,作为重要的模式动物,斑马鱼的基因敲除技术在当时仍不成熟,极大限制了其基因功能研究。

“最大的挑战在于没有前人做过,这是‘基因剪刀技术’出现后,首次在脊椎动物身上大规模应用,谁也不知道会发生什么,只能见招拆招。”水生所高级工程师潘鲁湲2014年加入项目,在她看来,正是大家毫无保留的互相帮助,才能“逢山开路,遇水架桥”。

据介绍,先后有30多家实验室参与项目,实验室间的完成度也难免会有差异。“遇到困难,大家首先想的总是怎么配合解决问题。”孙永华表示,经常是某一家遇到瓶颈“敲不动”了,其他实验室就主动领回来接着“敲”。

每隔一段时间,所有参与计划的科研人员还会相互邀约,举行项目协调会,了解彼此进展,及时调整研究方案和策略。“具有协作精神是这支队伍最大的特点。院士作为领衔科学家把控方向,各实验室开展工作就能劲往一处使。”孙永华说。

另一方面,作为一个自发的科研联合攻关团队,这项工作并没有专项经费支持。鱼要吃饭,人要吃饭,实验室也要运转,都是最现实的问题。绝大部分时间里,能采取的方法只有一种:省吃俭用,自筹经费。

“支撑大家坚持下去的,是作为中国科学家的责任感。”张博坦言,仅她所在的实验室,前后就有二三十人参与到这项工作中。大部分人都是幕后英雄,尤其是研究生们。“通过参与这项研究,更多的青年科研人员掌握了最前沿的技术,成为我们的生力军。”

回顾这几年的工作,孙永华表示,科学探索本就充满不确定性,但通过这项研究计划,凝聚、锻炼了一支科研队伍,“这是我们最大的收获”。

发挥好建制化优势

经过6年多的研究、前后四五百人的付出,中国科学家利用CRISPR/Cas9技术,针对斑马鱼1号染色体上的1333个基因进行系统性基因敲除,成功敲除了其中1029个基因,获得针对636个基因的1039个可传代的突变型,首次实现了脊椎动物整条染色体的系统性基因敲除。

所有突变品系和遗传信息全部通过国家水生生物种质资源库——国家斑马鱼资源中心对学术界公开。不仅引领了国际斑马鱼表型组研究,而且建成了我国首个大规模斑马鱼定向突变体库。中国的国家斑马鱼资源中心也成为公认的国际三大斑马鱼资源库之一。

张博表示,回顾过去几年的付出,一切都是值得的。伴随着这一计划,中国的斑马鱼学界不但完成了“从0到1”的突破,更搭建起一个平台,吸引众多海外青年学者回国建设实验室。据统计,2020年,我国的斑马鱼研究产出的全球占比已超过29%,成为全球产出体量第一的国家。

“协作是项目成功的重要原因,几十家实验室共同协作完成这样一项工作,在国内外都是不多见的。”对于潘鲁湲和她的同事们来说,最直观的工作体验是从北京到广州、从上海到成都,把分散在全国的斑马鱼品系收集起来,然后整理归类。

而作为牵头单位,水生所也通过这一计划,建立起了斑马鱼品系保藏体系,并整合出一套工作流程。“斑马鱼1号染色体敲除计划是一个开始,帮我们理清了收集、验证、保藏等流程,为后续开展更大规模的斑马鱼反向遗传学筛选计划奠定基础。”孙永华说。

“这项自发性协作研究,以斑马鱼1号染色体全基因敲除计划为源头,团结和凝聚了中国以斑马鱼作为模式动物开展研究的群体,进一步促进了以斑马鱼为对象在发育、代谢、毒理等方面的基础研究,以及其在生物技术创新、药物研发、水产育种、水环境效应评价等领域的应用研究;以该团队为核心,承担了国家重点研发计划中‘斑马鱼发育与代谢突变体库的系统创制’项目,并在相关产业应用中展现出良好的潜质。”水生所所长殷战表示。

正如中国的斑马鱼领域的科研工作一样,如今中国的科研逐渐由并跑迈向领跑阶段,更需要能动性地发挥出建制化、大团队协同作战优势,聚焦基础领域,开展全链条、跨部门协同攻关,为实现高水平科技自立自强提供有力保障。
来源:中国科学报

【 从“一枝独秀”到“百花齐放”

从“单一养殖”到“虾贝虫藻”】
无棣县海洋经济实现高质量发展新嬗变
近日,记者跟随渤海水产的工作人员,去拍摄无棣县盐田虾出虾时的喜人场景。朝阳初升,虾池里波光粼粼,潮湿的海风裹挟着收获的喜悦,让人心醉。鳞次栉比的虾池里踯躅着几只叫“等”的鸟,时而轻啄水面,时而翘首远望,时而静静等待,让人产生一种时光恍惚之感,放松自在,诗意盎然。远处就是堆积如山的盐堆,洁白的盐堆与近处的虾池遥相呼应。开车行驶在盐池坝上,随处可见的是盐的结晶,如冰似雪布满了滩涂。此景正应“天空之镜”之美誉,绝非妄言。
这里景美,虾更美。
渤海水产的盐田虾,正成为一种美好的传说。“体色清亮,肉质紧糯、口感鲜甜、野生品质”,被广大消费者青睐。渤海水产养殖基地采用生态养殖方式,充分利用盐田特有的生态系统,尽量减少人为干预,保证盐田内生态系统的正常运作。在盐田生态系统中,初级海水养殖盐田虾,初级卤水养殖丰年虫等盐田虾的优质饵料,中级卤水提取溴素,饱和卤水制盐,苦卤提取钾镁,实现了盐田虾养殖尾水零排放,盐田生态系统各板块之间承接,凸显了海水的梯度利用与人类工业活动的完美融合。”养殖厂厂长张荣岐说。
渤海水产脊岭岛盐田虾是无棣县坚持向海、向洋、向未来,强力实施“耕海牧渔、走向深蓝”海洋发展战略,扎实推进“海洋强县”建设,持续壮大“虾贝虫藻鱼”特色渔业经济,培育打造“水港网高”现代海洋产业打造的一张靓丽名片。2020年,无棣县被自然资源部确定为全国海域自然资源统一确权登记试点县,建立海洋环境资源公益损害修复制度的经验做法在全省推广。
发展到现在,无棣县的渔业发展呈现出井喷式发展新气象。水产养殖面积达45.6万亩,其中海水养殖43.6万亩、淡水养殖2万亩、工厂化养殖30万平方米。创建农业部水产健康养殖示范场6处(友发、海城、友成、海缘、神力、渤海水产)、省级水产健康养殖示范场2处(沃达、正海);建成省级底播型海洋牧场2处(新创、正海),海参(友发)、半滑舌鳎(海城)、螠蛏(渤海水产)、对虾(海缘)省级原良种场共4处;通过无公害水产品认证24个(对虾、蛏、蛤、舌鳎、梭子蟹、海参、南美白对虾、牡蛎、大口黑鲈、鲈等),绿色食品认证14个(南美白对虾、海参、半滑舌鳎、三友梭子蟹、日本对虾、鲈鱼等),有机认证3个(虾、冻虾仁、冻虾),地理标志产品2个(汪子岛鳎麻鱼、无棣卤虫卵),国家地理标志证明商标2个(滨州金蚝、滨州文蛤)。2020年实现全县水产品总产量152399吨、渔业经济总产值50.37亿元、海洋生产总值58.88亿元,分别增长8.25%、8.32%、5.77%。先后荣获全省海洋经济先进县、首批省级海洋生态文明示范区、农业部渔业健康养殖示范县等称号。
近年来,无棣县以承担渔业项目为契机,先后实施了现代渔业园区建设、现代渔业发展平台、“海上粮仓”及海洋牧场等涉渔项目,规划建设了友发海参养殖区、海城工厂化养殖区、黄河岛休闲渔业区、沃达健康高效养殖示范区,形成了“虾贝虫藻鱼”特色渔业经济产业集群。虾产业。南美白对虾作为无棣水产养殖支柱产业,目前全县养殖面积达到28万亩,年产量5.6万吨。其中,友发公司与省海洋生物研究院合作开展工厂化循环水高位池对虾高效养殖试验示范,产量由之前的亩产几十斤提升到亩产3000多斤,建成华北海水苗种良种繁育中心、3.5万亩南美白对虾健康高效养殖示范基地、1万亩渔光一体产业园。海阔水产现代渔业经济园区建设项目,计划新建工厂化育苗养殖车间6.4万平方米,目前已建成2万平方米,共培育南美白对虾仔虾102亿尾、标粗苗26亿,培育半滑舌鳎、马面鲀规模约2000平方米。贝产业。依托正海集团,与中国海洋大学包振民院士合作,成立“正海院士工作站”,打造国内一流的贝类产业示范基地;与国家海洋局第三研究所林祥志教授合作,开发贝类苗种繁育1.5万平方米,年培育贝苗30亿尾。累计投放贝类苗种200亿粒,对牧场资源进行直接修复,并积极探索牡蛎三倍体、帘蛤等贝类新品种养殖实验,并延伸产业链,推进贝壳粉、蚝油等贝类产品深加工,全力打造国家级海洋牧场。目前,贝类品种主要涉及四角蛤、文蛤、毛蚶、牡蛎等,总面积10万亩,年产量10万吨。抓好省重大项目“渤海贝仓”建设,累计投资超3亿元,建成了贝类“北繁中心”、综合大厦、5万亩贝类设施化养殖基地、贝类清洁生产和育肥基地,已培育美国帘蛤、牡蛎等贝类苗共12000方水体,同步开展培育养殖贝类所需的饵料金藻、角毛藻。虫产业。无棣拥有盐田65万亩,其中卤虫宜生面积30万亩,年捕获鲜卵1000余吨,年产值1.5亿元,成为世界卤虫养殖和加工中心地区,无棣卤虫卵成为国家地理标志产品。引进美国马里兰大学奥迪教授、鲁东大学邹宁教授,建立了省现代海洋产业(卤虫)技术创新中心,共同实施微藻培养与卤虫增养殖试验项目,建成1万亩高产优质卤虫养殖示范基地,成虫与虫卵亩产量翻倍增长。藻产业。友发公司与天津科技大学、省海洋生物研究院合作共建山东省盐田卤虫与微藻开发工程技术协同创新中心。悦翔生物与无棣鲁东大学海洋研究院共同建设了滨州市微藻工业工程技术研究中心、烟台微藻工程技术研究中心,先后开展了裂殖壶藻高效培养与DHA油脂提取精制项目,具备年生产2100吨微藻干粉、540吨DHA油脂、920吨粉末油脂的能力;针对裂殖壶藻高效培养与DHA藻油提取项目,正海集团与西安油脂设计院、北京化工大学、中国海洋大学、厦门大学联合开发进行科技攻关。岳湖农牧与无棣鲁东大学海洋研究院进行藻类的研发合作,开发和研制出了具有世界领先水平的优势产品小球藻,海洋饵料微藻养殖示范园区项目一期工程已建成,年产小球藻达300吨;俊棣农牧与无棣鲁东大学海洋研究院合作开发小球藻,占地90亩的微藻养殖基地已建成。鱼产业。海城集团拥有省级半滑舌鳎原种场,建成半滑舌鳎工厂化循环水养殖车间6万平方米、苗种繁育车间2.5万平方米,生产的半滑舌鳎通过绿色食品认证,荣获12项国家实用新型专利。沃达水产加州鲈鱼养殖水体6.4万立方米,放苗35万尾,每池7000尾,每池年产量9000斤,总产能45万斤左右,效益显著。海缘引进海马亲本1万多尾,开展海马苗种培育,日繁育量达1000多尾,目前已繁育海马苗种6万多尾。汪子岛鳎麻鱼成为国家地理标志产品。
突出模式创新,推动多元发展。全县对虾优势主导地位日益巩固,进一步打破了粗放养殖的局面。积极推广对虾“135”二茬分级接续养殖技术,推广沿海分级养殖面积,繁育优质对虾苗种,提高对虾养殖产量。截至目前,全县推广“135”模式南美白对虾养殖2500余亩,效果良好。养殖品种也趋向多元化,由以往相对单一的对虾养殖扩大到半滑舌鳎、海参、缢蛏、梭子蟹、淡水鱼类等多个品种。同时,积极推行新品种、新模式养殖,重点推进斑石鲷、加州鲈鱼、石斑鱼等新品种规模化养殖。2020年,友发水产引进了金虎斑、珍珠龙胆、云龙斑、红斑等不同品种石斑鱼及斑石鲷开展育苗,育苗规模达6000方水体,苗种均运往南方销售,海肠子养殖试验成功,创建2处海肠子养殖基地;青岛农业大学海洋学院在友发养殖基地开展了三疣梭子蟹、金刚虾等品种的养殖试验,取得良好效果,正在扩大养殖面积,效益凸显;海缘与中国水产科学院东海水产研究所张东博士合作,开展了海马选育及池塘养殖试验项目,已顺利通过验收;海阔开展了珍珠龙胆、老虎斑等石斑鱼的养殖,其中池塘养殖面积100亩、工厂化车间养殖面积8000平方米;小泊头镇建军养殖场养殖鳄鱼90多条,2020年8月26日取得水生野生动物人工繁育许可证和经营利用许可证,是滨州市第一家鳄鱼养殖企业。正海集团利用省重大项目建设开展杂色蛤繁育试验,效果显著,正在进行大面积推广。(张相安 张静)

菲尔人格测试
菲尔人格测试概述
  这个测试是美国的菲尔·麦格劳博士在著名主持人奥普拉的节目里做的,国际上称为“菲尔人格测试”,时下被很多大公司人事部门用来测查员工的性格。

  菲尔人格的10项测试题:

1、你何时感觉最好?
A、早晨;
B、下午及傍晚;
C、夜里
2、你走路是
A、大步地快走;
B、小步地快走;
C、不快,仰着头面对着世界;
D、不快,低着头;
E、很慢
3、和人说话时你
A、手臂交叠站着;
B、双手紧握着;
C、一只手或两手放在臀部;
D、碰着或推着与你说话的人;
E、玩着你的耳朵、摸着你的下巴或用手整理头发
4、坐着休息时,你
A、两膝盖并拢;
B、两腿交叉;
C、两腿伸直;
D、一腿蜷在身下
5、碰到令你发笑的事情时,你的反应是
A、欣赏地大笑;
B、笑着,但不大声;
C、轻声地笑;
D、羞怯地微笑
6、当你去一个聚会或社交场合时你
A、很大声地入场以引起注意;
B、安静地入场,找你认识的人;
C、非常安静地入场,尽量保持不被人注意
7、当你非常专心工作时,有人打断你你会
A、欢迎他;
B、感到非常恼怒;
C、在上述两极端之间
8、下列颜色中,你最喜欢哪一种颜色?
A、红或桔黄色;
B、黑色;
C、黄色或浅蓝色;
D、绿色;
E、深蓝色或紫色;
F、白色;
G、棕色或灰色
9、临入睡的前几分钟,你在床上的姿势是
A、仰躺,伸直;
B、俯卧,伸直;
C、侧躺,微蜷;
D、头睡在一条手臂上;
E、被子盖过头
10、你经常梦到自己
A、落下;
B、打架或挣扎;
C、找东西或人;
D、飞或漂浮;
E、你平常不做梦;
F、你的梦都是愉快的
菲尔人格测试的得分标准
01 02 03 04 05 06 07 08 09 10
A 2 6 4 4 6 6 6 6 7 4
B 4 4 2 6 4 4 2 7 6 2
C 6 7 5 2 3 2 4 5 4 3
D - 2 7 1 5 - - 4 2 5
E - 1 6 - - - - 3 1 6
F - - - - - - - 2 - 1
G - - - - - - - 1 - -
菲尔人格测试的结果评测
总分低于21分:内向的悲观者。大多数公司不喜欢这类性格。
  人们认为你是一个害羞的、神经质的、优柔寡断的人,是需人照顾、永远要别人为你做决定、不想与任何事或任何人有关的人。他们认为你是一个杞人忧天者,一个永远看到不存在的问题的人。有些人认为你令人乏味,只有那些深知你的人知道你不是这样的人。

21分到30分:缺乏信心的挑剔者。适合编辑、会计等数字和稽核工作。
  你的朋友认为你勤勉刻苦、很挑剔。他们认为你是一个谨慎的、十分小心的人,一个缓慢而稳定辛勤工作的人。如果你做任何冲动的事或无准备的事。你会令他们大吃一惊。他们认为你会从各个角度仔细地检查一切之后仍经常决定不做。他们认为这种反应一部分是因为你的小心的天性所引起的。

31分到40分:以牙还牙的自我保护者。有最广泛的适应性。
  别人认为你是一个明智、谨慎、注重实效的人。也认为你是一个伶俐、有天赋有才干且谦虚的人。你不会很快、很容易和人成为朋友,但是是一个对朋友非常忠诚的人,同时要求朋友对你也有忠诚的回报。那些真正有机会了解你的人会知道要动摇你对朋友的信任是很难的,但相等的,一旦这信任被破坏,会使你很难熬过。

41分到50分:平衡的中道者。适合人力资源工作。
  别人认为你是一个新鲜的、有活力的、有魅力的、好玩的、讲究实际的、而永远有趣的人;一个经常是群众注意力的焦点,但是你是一个足够平衡的人,不至于因此而昏了头。他们也认为你亲切、和蔼、体贴、能谅解人;一个永远会使人高兴起来并会帮助别人的人。

51分到60分:吸引人的冒险家。适合市场开发与销售工作,适合独当一面。
  别人认为你是一个令人兴奋的、高度活泼的、相当易冲动的个性;你是一个天生的领袖、一个做决定会很快的人,虽然你的决定不总是对的。他们认为你是大胆的和冒险的,会愿意试做任何事至少一次;是一个愿意尝试机会而欣赏冒险的人。因为你散发的刺激,他们喜欢跟你在一起。

60分以上:傲慢的孤独者。通常很有才华,但与人沟通功夫欠佳,可做研发指导工作。
  别人认为对你必须“小心处理”。在别人的眼中,你是自负的、自我中心的、是个极端有支配欲、统治欲的。别人可能钦佩你,希望能多像你一点,但不会永远相信你,会对与你更深人的来往有所踌躇及犹豫。世界本来就是层层嵌套,周而复始,不以任何的意志而改变。


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