#原代细胞是如何培养的？选择组织块还是消化液培养法？

原代培养即直接从有机体取下细胞、组织或器官，让它们在体外维持与生长。原代培养的特点是细胞或组织刚离开机体，它们的生物性状尚未发生很大的改变，在一定程度上可反映它们在体内的状态，表现出来源组织或细胞的特性， 因此用于药物实验，尤其是药物对细胞活动、结构、代谢、有无毒性或杀伤作用等，是极好的工具。

那么，原代细胞是如何培养的呢？

常用的原代培养法有组织块培养法和消化培养法。

（一）组织块培养法

许多实验室喜欢用组织块培养法进行原代培养，因为方法简单，细胞也较容易生长。尤其是培养心肌，有时还可观察到心肌组织块搏动。细胞从组织块边缘向外长出并铺满培养皿或培养瓶后， 即可进行传代。

1. 设备材料

培养箱、冰箱、超净工作台／无菌间、无菌吸管、离心管、酒精灯、试管架、培养瓶、培养皿、消化液、基础培养液、胎牛血清、Hanks 溶液、双抗试液、剪刀、摄子、小烧杯。

2. 操作步骤

（1） 在无菌条件下，取待培养的组织适量，置入小烧杯中， 以适量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉组织块表面的血污。
（2）用眼科剪将组织块反复剪成0.5~ 1mm3的小块。
（3）再用Hanks 溶液反复漂洗， 直至液体不混浊为止。等组织块下沉，将烧杯倾斜，用小吸管尽量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%灭活血清及双抗溶液(200U/ml 青霉素、200μg/ml 链霉素）的培养液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培养液。
（5）用弯头吸管吸取组织小块，均匀地置于培养皿内表面，吸去多余的培养液，各组织小块之间相距0.5cm 为宜。盖好培养皿盖，做好标记， 置37°C 的CO2培养箱内。
（6） 2~4h 后，于超净工作台中，缓缓地向培养皿中加入上述含20％血清及双抗溶液( 100U/ml 青霉素及100μg/ml 链霉素）的培养液少量，以使组织块浸没在培养液中。
（7）轻轻地将培养皿及组织块移至CO2 培养箱， 如无特殊情况，不必观察。1~2 周后，可观察到细胞从组织块边缘长出，形成生长晕。
（9） 一般说来，若培养液无明显改变， 1 周换液1 次即可。待细胞长满整个培养皿内表面，即可进行传代培养。

3. 需要说明及注意的问题

（1） 如果是用培养瓶而不是培养皿，则接种组织块千培养瓶底壁后， 要轻轻地翻转培养瓶，令瓶底在上，盖好瓶盖后轻轻置入37°C 的CO2 培养箱， 2~4h 后，取出培养瓶，在超净工作台内打开瓶盖，仍令组织块在上方。在组织块对面瓶壁加入适量上述培养液。然后，轻轻翻转培养瓶，让组织块浸没于培养液中。盖好瓶盖后放回二氧化碳孵箱，继续培养。
（2） 从培养皿表面游离下来的组织块，弃去即可。
（3） 如果使用玻璃培养瓶，而不是新的塑料培养瓶，则最好在玻璃底表面包被大鼠鼠尾胶原，这样不但有利于组织块的黏附，而且可使细胞生长得更好。
（4）本方法适于各种组织的培养，操作者还可根据自己的实验需要和细胞种类加以修改。

（二）消化培养法

它与上述组织块培养法的主要区别有2 点。一要用酶制剂（最常用的是胰蛋白酶）处理组织块，除去细胞间质，使细胞相互分离，形成细胞悬液；二细胞生长方式多为单层( monolayer ) 。本方法的优点在于单层细胞更易摄取营养、排出代谢产物，因此生长较快，可较快地应用于实验研究；缺点是步骤颇为繁琐，操作不慎易污染。此外，消化处理要恰到好处，不然对细胞会有一定的损伤作用。

1. 操作程序

（1） 在无菌条件下， 取待培养的组织1cm3左右，置入平皿或烧杯中，以适量Hanks 溶液消洗3 次，去掉组织块表面的血污及结缔组织。
（2）以锋利的眼科剪将组织块反复剪碎，得到约0.5mm x 1mm 大小的小块。
（3）以Hanks 溶液冲洗数遍，稍候组织块下沉，吸除Hanks 溶液。
（4）用少量Hanks 溶液，将组织小块吸入预先置有无菌的磁力搅拌子的锥形烧杯中，再加入15~30ml 上述胰蛋白酶消化液。
（5）将锥形烧杯用橡皮塞盖紧，外封以锡箔。然后移至预先置入37°C 培养箱内的电磁搅拌器上。
（6）打开搅拌器的电源开关，使搅拌子旋转， 关好培养箱，让胰蛋白酶进行消化。
（7）在消化过程中，每隔一定时间吸取消化物滴于载片上，于光学显微镜下观察，检查细胞是否分散成单个。若大部分细胞已分散，立即加入适量Hanks 溶液，终止消化。通常需消化10~20min 。
（8）先以100μm 不锈钢筛过滤，滤去未消化的组织块或大细胞团（如获得的细胞量少，这些组织块可继续进行消化，以便取得较多细胞）。继以20μ 不锈钢筛过滤。
（9）将取得的滤液进行低速（每分钟500~ 1000 转）离心5min，吸除上清液。并用Hanks 溶液离心清洗1~2 次，最后加入含血清的培养液，搅匀，制成细胞悬液。
（10）用计数板计数，确定细胞悬液浓度，通常以1×105~3×105个接种于培养瓶或培养皿中。

2. 需要说明及注意的问题

（1） 用何种酶进行消化可视所培养细胞而定，除胰蛋白酶外，常用1 型胶原酶消化睾丸支持细胞、血管平滑肌细胞和内皮细胞；用II 型胶原酶消化大鼠腺垂体细胞等。
（2）如果没有不锈钢筛， 可用4 层纱布代替，但纱布要预先经高温高压灭菌。
（3） 严格地说，原代培养是指未经传代的细胞，但在实际工作中，人们常将10 代以内的细胞用作原代培养细胞，因为此时的细胞基本上保持着原有的生物学特性。
（4） 从原代培养的操作步骤不难看出，原代细胞中含有多种细胞成分，即它们是异质型( heterogeneity) 的群体，因此在设计实验及分析结果时，切勿忘记这一因素。

5G时代手机必须跟上
作为重视的三星粉丝我对三星的技术
无论是从屏幕还是系统都十分喜欢
新手机当然要推荐大家三星GalaxyS21啦！
他的好真的不是简简单单就能概括的
为了凸显我想给大家种草的诚意
我就从多个方面全方位的为大家介绍一下三星GalaxyS21
希望能找到和我一样喜欢的小伙伴！
 
·外形
手机和人一样，颜值很重要。这关乎第一印象的好坏。三星GalaxyS21的外形真得属于那种一见就爱上的类型，这多亏了流畅的机身，精致小巧便携以外还蕴藏着超强大能力
 
金属相机模组，摄像头模组边缘与金属边框流畅衔接，无论视觉还是手感都质感满满~
纵向排列的镜头整齐中显示着不凡，独特轮廓切割设计，锐利沉稳，看着就富有艺术感
中框一体化设计让边框真的超窄，超高屏占比使用体验满分
雾面质感不易留印手感还好，搭配简洁圆滑的外形，不但第一眼惊艳，还属于耐看的那一种
在这个凸显个性的时代，三星GalaxyS21用他独特的设计语言引领了潮流
 
三星GalaxyS21有「墨影灰」「丝雾白」「梵梦紫」三种颜色选择:
墨影灰深邃稳重，给人以安全可靠的感受
丝雾白简洁优雅，流程的线条与白色搭配犹如天鹅一般
梵梦紫绚丽梦幻，紫色代表浪漫，这是一场华丽的梦境
 
大家可以根据自己喜好的风格进行选择
我选择的是梵梦紫，比较谁的心里没有一个长不大的小孩，对于这种童话般的浪漫色彩我的抵抗力还是不高
 
三星GalaxyS21屏幕绝对是拿手项与出彩点
身为手机屏幕天花板的三星品牌这次也同样没让大家失望
6.2英寸的屏幕一只手即可操作方便舒服
搭载了第二代动态AMOLED屏幕，支持120Hz自适应刷新率。从画面色彩到流畅度都十分强劲~
在现在普遍小曲屏的时代三星却给三星GalaxyS21用上了直屏，说实话这一点十分打动我
我个人还是比较喜欢直屏，我对曲屏唯一的好感就是没有边框，而三星GalaxyS21的超窄边框完全不影响体验，还没有有曲屏烦人的误触、不容易贴膜、显示内容畸变等缺点
试问这样一块屏幕有谁能拒绝？
 
·拍摄
作为一个喜欢记录生活的人，用拍照的放式来留住生活中的惊喜是最开心的事情了。手机的进步已经开始替代相机成为了重要拍照工具，所以手机拍照能力绝对是重要考察点
三星GalaxyS21有着专业级摄像功能，有了它小白也能成为专业摄影师！
三星GalaxyS21后置长焦摄像头采用了6400万像素，F2.0光圈和OIS光学防抖
 
还有夜景模式
不惧光线暗，三星GalaxyS21随时随地都能够为你记录下夜色之美
 
极远变焦（Space Zoom）功能
在使用超过30x 数码变焦，并静止2 秒（或按画面左上角的全景画面），相机会利用AI 人工智能自动把镜头稳住，让你轻松拍摄稳定且清醒的影像
 
支持8K视频拍摄
细节也清晰，不错过生命中的“一丝一毫”
 
导演视角功能
同时录制前置和后置相机镜头让你只用一只手机却能同时运行多个机位，全景、中景、近景，在导演模式中你可以切换的三个不同视角。通过焦距的转变来引导观众的注意力，让视频创作更具备张力。一键切换，即拍即用，自己的生活纪录片当然要自己当导演
 
拍照不仅仅为了风景，把自己拍的美最重要，三星GalaxyS21拍摄人像功能同样十分强大
搭载了1000万像素 F2.2光圈 2PD
全像素双核极速对焦，对焦超迅速，快速捕捉你丰富的面部表情
 
不仅如此，三星GalaxyS21通过AI技术，帮你自然的美颜
变美的同时也不会僵硬，每个人都能绽放属于自己的色彩
 
·功能
作为一款旗舰机，功能方面自然是“黑科技”满满
 
超声波屏下指纹解锁、面部解锁
反应超快又流畅
 
超级防抖功能
移动过程中超稳定，效果堪比云台，让你的拍摄画面不再剧烈抖动
 
 
一键拍摄
一键完成拍摄，使用人工智能将它转化为可以即使分享的照片和视频来供你挑选
编辑好就能直接分享，随拍随发快乐分享无延迟
 
“核心”三星One UI系统
专门为便利而生的三星One UI系统就是GalaxyS21的核心
多种实用功能完全为创造幸福生活而生，下面我就介绍几个我比较喜欢的功能
 
·Samsung Pay交通卡门禁卡设置
不用弹出界面也不需要做任何操作，刷卡就像实体卡一样方便
 
·隐私功能
如今个人信息泄露情况太严重了
三星GalaxyS21可以单独设置每一个应用程序对麦克风、摄像头等等功能的访问许可。应用程序在一段时间内没有使用任何权限，则这些权限都将被自动撤销。将不会再允许应用程序总能查找到您的位置安全感十足
 
 
 
·对象橡皮擦功能
这真的是一个超级强大的功能，在编辑图片的时候，可以删除图片中不想要的内容，只需要点一点，轻松的将图片中不想保留的人或者杂物彻底擦除掉，还不会破坏原图。超级方便省事，自从用了这个功能我在修图的时候已经完全离不开了
 
·拍照提取文字功能
三星输入法有拍照提取文字功能，不用费心编辑，手机直接从图像里提取，不要太方便~
 
智能互联
健身镜像互动
这个非常好玩，有点像体感游戏一样，连接到电视上可以跟着动作锻炼，你的动作都会反馈到屏幕上，健身的同时保持了趣味性，很适合我这也喜欢在家宅的人！
 
这些只是One UI系统优秀功能的一小部分
他真正的强大只有用过才知道
 
·电池
三星 Galaxy S21 内置一块4000mAh的电池，续航能力没问题，手机也自带电池智能管理，如果哪个程序耗电异常就会及时提醒，防止手机陷入无电量危机
 
我真的太喜欢这部手机了，三星把GalaxyS21做的足够出色，大家有换手机的需求的时候真的可以考虑一下！

手感PK掉iPhone13的小米12X

时隔3年，又见数字系列X小尾巴，这是继小米6X后，第三款挂X的小米手机，定位还挺有意思！整体设计跟小米12保持一致，重量只有176g、宽69.9mm，比iPhone13还窄，久违的单手掌控，据说明年没有同规格的产品。这里给个小建议，上手的朋友可以把膜揭了，那中框到屏幕的过度有点小米MIX4上Unibody的感觉了，精致。
划重点，该机跟12拥有同素质DisplayMateA+屏、IMX766相机模组，X轴/双扬/红外一个没砍，主要差别就是处理器为骁龙870，以及没有无线充。
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